鄰苯二甲酸二異丁酯的熒光免疫分析研究.pdf

1、鄰苯二甲酸二異丁酯屬于塑化劑(PES)鄰苯二甲酸酯類，作為工業(yè)材料加工助劑。于1950后大量應用于塑料制品的加工，主要用于增強材料的延展性、耐久性等加工性能。在缺乏相對完善的毒理學研究的情況下，添加了塑化劑的塑料制品大量地應用到食品包裝行業(yè)、玩具業(yè)、醫(yī)療器械和家庭常用用品方面。近年來，大量的毒理學研究表明:塑化劑鄰苯二甲酸二異丁酯是一類環(huán)境雌性激素，這類物質進入人體后，可以影響人體正常分泌物的合成，釋放，轉運，結合等過程，進而阻礙人體的

2、正常發(fā)育。因此，建立其免疫分析方法來實現快速檢測食品中的二異丁酯污染具有十分重要的意義。
　　目前鄰苯二甲酸二異丁酯的檢測手段主要有高效液相色譜、氣相色譜，往往這些色譜分析方法和質譜聯(lián)用。這類分析方法雖然可以很準確地測量出水或食品中鄰苯二甲酸二異丁酯含量且檢測限較低，但這類分析方法分析時間長、所需儀器昂貴、需要專業(yè)的人員進行分析操作且無法實現大批樣品的快速檢測。因此，很有必要開發(fā)一種簡單、快速、可靠、靈敏、廉價的檢測鄰苯二甲酸二異

3、丁酯的方法。免疫分析具有方便、成本低、靈敏度高等優(yōu)點可以滿足簡單、快速檢測鄰苯二甲酸二異丁酯的檢測要求。
　　本文通過鄰苯二甲酸結構類似物4-硝基鄰苯二甲酸作為中間體，經過羧基酯化和硝基還原來獲得具有鄰苯二甲酸二異丁酯結構特征、同時得到可修飾氨基。再將得到的目標分子結構衍生物采用氨基重氮化與載體蛋白牛血清白蛋白(BSA)、雞血清白蛋白(OVA)偶聯(lián)分別制得免疫原和包被原。免疫抗原注射免疫新西蘭兔，制備多克隆抗體，利用高靈敏度抗體建

4、立塑化劑鄰苯二甲酸二異丁酯的免疫分析方法。
　　利用鄰苯二甲酸二異丁酯多克隆抗體建立間接競爭熒光免疫分析方法，經過分析條件的優(yōu)化，分析方法的線性范圍為10.47～357.06 ng/mL(R2=0.991)，檢測限為5.82ng/mL。將建立的分析方法應用到植物油樣品中鄰苯二甲酸二異丁酯的檢測，一方面該方法的樣品加標回收率為79～102％，另一方面利用該方法測得的油樣鄰苯二甲酸二異丁酯含量與傳統(tǒng)GC-MS結果相關度較高，表明該方法