桔?？寡趸δ芏嗵堑暮Y選及結(jié)構(gòu)解析.pdf

1、桔梗是桔?？浦参锝酃latycodon grandiflorum(Jacq.)A.DC.的干燥根。在國家新藥“芩百清肺濃縮丸”的研制過程中，選用了經(jīng)方“止嗽散”為基礎(chǔ)進行加減，其中藥食同源的桔梗，作為舟楫之藥，起到了不可替代的作用，桔梗皂苷一直是“祛邪”藥效學(xué)研究的熱點，而其中含量豐富的多糖則是本研究（扶正）的重點。本文以桔梗為研究對象，對其多糖進行提取分離，通過體外抑制肺炎支原體和抗氧化實驗，篩選出活性較強的桔梗多糖片段（PGP-D

2、），并對篩選出的多糖做進一步的純化及結(jié)構(gòu)分析，為優(yōu)化劑型、進一步探討構(gòu)效關(guān)系提供理論依據(jù)。
　　本研究首先以桔梗多糖為指標(biāo)，優(yōu)選了桔梗的最佳產(chǎn)地為：安徽亳州。通過熱水回流提取法提取桔梗多糖，采用響應(yīng)面分析法對桔梗多糖提取的工藝條件進行優(yōu)化，確定了最佳的工藝參數(shù)，料液比1:31.41，提取溫度92.76℃，提取時間2.45 h，提取次數(shù)2.82次，該條件下桔梗多糖提取率為50.24％。建議實際應(yīng)用參數(shù)為料液比1:31，提取溫度93℃

3、，提取時間2.5 h，提取次數(shù)為3次，提取率為49.85%。
　　采用Sevage法除蛋白，并對其去除次數(shù)進行了比較，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過兩次除蛋白后蛋白脫除率為28.49%，多糖保留率為81.16%，且桔梗多糖中蛋白只剩0.05%。對桔梗多糖三種脫色方法進行比較發(fā)現(xiàn)，活性炭法的脫色效果最差，幾乎起不到脫色效果；AB-8樹脂脫色效果最好，當(dāng)脫色多糖溶液為7倍柱體積時，多糖的脫色率仍能達到75%以上；過氧化氫脫色效果較好，其添加量為5%時，脫色

4、率為69.42%。
　　脫色脫蛋白的桔梗多糖經(jīng)乙醇分級得到桔梗多糖PGP-B，PGP-C和PGP-D，其多糖含量分別為73.33%、72.45%和80.83%；特性粘度[η]分別為28.56，9.71和4.10；粘均分子量分別為1.35×105，2.90×104和8.45×103。抑制肺炎支原體活性實驗表明多糖沒有抗肺炎支原體的活性；而體外抗氧化實驗表明 PGP-B，PGP-C和PGP-D均具有一定的自由基清除能力和總還原能力，但

5、沒有陽性對照抗壞血酸效果好，經(jīng)比較PGP-D的抗氧化能力最好。
　　PGP-D經(jīng)DEAE-52純化后得到PGP-D-a和PGP-D-b兩個多糖組分，經(jīng)紅外光譜鑒定可知，這兩個組分都具有多糖特有的官能團，均為多糖類化合物。對PGP-D-a的單糖組成進行分析，可知PGP-D-a主要是由L-鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖組成的。PGP-D-a中各單糖摩爾比為0.30:1.00:0.33:0.94:1.