香茅精油對(duì)櫻桃番茄主要病原菌抑制性研究.pdf

1、采后病原真菌引起的果蔬腐爛會(huì)導(dǎo)致巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前，化學(xué)合成殺菌劑是控制果蔬采后病害的主要方法。但是化學(xué)合成殺菌劑具有致癌、致畸性、殘留量大、污染環(huán)境且易使病原菌產(chǎn)生抗藥性等缺點(diǎn)，不宜長(zhǎng)期使用。因此，開(kāi)發(fā)一種安全、有效、且不污染環(huán)境的天然殺菌劑替代化學(xué)合成殺菌劑成為目前的研究熱點(diǎn)。植物精油作為植物次生代謝物質(zhì)，具有較強(qiáng)的抑菌活性、低毒、環(huán)境友好等特點(diǎn)，引起學(xué)者的廣泛關(guān)注。香茅精油是從香茅草中提取，具有較強(qiáng)的抑菌作用的精油，目前關(guān)于香茅

2、精油控制櫻桃番茄主要采后病害的研究少有報(bào)道。本論文系統(tǒng)研究了香茅精油對(duì)櫻桃番茄主要采后病原菌——灰葡萄孢菌和鏈格孢菌的抑菌作用并對(duì)其防治機(jī)理進(jìn)行了初探。主要研究結(jié)果如下:
　　1.三種植物精油在櫻桃番茄體外和體內(nèi)的篩選試驗(yàn)
　　通過(guò)體外熏蒸和直接接觸兩種方式對(duì)三種植物精油進(jìn)行了體外及體內(nèi)試驗(yàn)，研究其對(duì)櫻桃番茄主要采后病原菌的抑制作用。結(jié)果表明，香茅精油在體外和體內(nèi)試驗(yàn)中均表現(xiàn)出最強(qiáng)的抑菌作用。在體外直接接觸方式下，香茅精油濃

3、度為1.5μl/ml時(shí)，完全抑制灰葡萄孢和鏈格孢菌絲生長(zhǎng)。在體外熏蒸方式下，在香茅精油添加量為15μl時(shí)，對(duì)灰葡萄孢和鏈格孢的抑菌率分別為84.56％和80.39％。在櫻桃番茄體內(nèi)試驗(yàn)時(shí)，在香茅精油濃度為1.5μl/ml時(shí)，其抑制灰霉病和黑腐病發(fā)病率50.33％和61.03％。
　　2.香茅精油對(duì)櫻桃番茄主要病原菌體外抑制及其在PDA條件下MIC的確定
　　將不同濃度香茅精油在PDA培養(yǎng)基條件下通過(guò)直接接觸和熏蒸方式抑制灰葡

4、萄孢和鏈格孢菌絲的生長(zhǎng)。結(jié)果表明:香茅精油的抑菌效果隨精油濃度的增加而增加。在直接接觸方式下，精油濃度分別為1.5μl/ml和1.0μl/ml時(shí)，可以完全抑制灰葡萄孢和鏈格孢菌絲的生長(zhǎng);在熏蒸方式下，精油添加量為15μl時(shí)，對(duì)灰葡萄孢和鏈格孢的抑制率分別為92.94％和100％。
　　3.香茅精油對(duì)灰葡萄孢及鏈格孢孢子萌發(fā)、在PDB培養(yǎng)基條件下菌絲生物量的影響及MIC的測(cè)定
　　將不同濃度香茅精油在PDB條件下處理灰葡萄孢及

5、鏈格孢，測(cè)定其孢子萌發(fā)率和菌絲生物量。結(jié)果表明:香茅精油可以顯著抑制兩種菌的孢子萌發(fā)及菌絲的生長(zhǎng)。在精油濃度為0.8μl/ml時(shí)，完全抑制灰葡萄孢孢子萌發(fā);在精油濃度1.5μl/ml時(shí)，鏈格孢孢子萌發(fā)率為92.48％。另外，香茅精油對(duì)兩種菌的菌絲生物量有顯著影響，在精油濃度為1.2μl/ml時(shí)，灰葡萄孢菌絲生物量為0，即完全抑制其菌絲生長(zhǎng);在濃度為1.0μl/ml時(shí)，灰葡萄孢菌絲濕重及干重僅為0.3g和19.4mg。在精油濃度為0.8μ

6、l/ml時(shí)，鏈格孢菌絲生物量為0，即完全抑制其菌絲生長(zhǎng);在濃度0.6μl/ml時(shí)，接種后第10d的菌絲濕重及干重為0.34g和8.63mg?？芍?，香茅精油對(duì)灰葡萄孢和鏈格孢在PDB條件下的MIC分別為1.2μl/ml和0.8μl/ml。
　　4.香茅精油對(duì)櫻桃番茄灰霉病和黑腐病發(fā)病率的抑制及其對(duì)水果品質(zhì)的影響
　　用不同濃度香茅精油進(jìn)行櫻桃番茄體內(nèi)抑制灰葡萄孢和鏈格孢試驗(yàn)。結(jié)果表明:香茅精油能夠有效抑制櫻桃番茄灰霉病及黑腐病

7、，其最佳抑菌濃度分別為0.9μl/ml和1.5μl/ml。另外，本試驗(yàn)通過(guò)測(cè)定香茅精油對(duì)櫻桃番茄的重量損失、硬度、可溶性固形物和可滴定酸度四個(gè)指標(biāo)，結(jié)果表明香茅精油對(duì)櫻桃番茄水果品質(zhì)沒(méi)有任何負(fù)面影響。
　　5.香茅精油對(duì)灰葡萄孢及鏈格孢抑菌機(jī)理的初探
　　香茅精油處理兩種菌后，用掃描電鏡觀察其菌絲的微觀結(jié)構(gòu)，并研究精油對(duì)菌內(nèi)DNA和蛋白質(zhì)含量的影響。結(jié)果表明:掃描電鏡結(jié)果顯示對(duì)照組菌絲健康飽滿，表面平整光滑，香茅精油處理后的

8、菌絲變形并伴有表面凹陷、褶皺、粗糙、不平整現(xiàn)象，其中鏈格孢菌絲還有孢子缺失現(xiàn)象產(chǎn)生。另外，處理后的病原菌細(xì)胞外滲率顯著升高，未檢測(cè)到病原菌核酸泄露現(xiàn)象，且瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示對(duì)照組和處理組菌內(nèi)DNA總量沒(méi)有顯著差異，而檢測(cè)到菌內(nèi)蛋白質(zhì)含量顯著降低。推測(cè)香茅精油抑制病原菌的主要機(jī)理在于破壞了病原菌細(xì)胞膜，使菌體蛋白質(zhì)等物質(zhì)泄露。
　　6.香茅精油成分分析
　　用GC-MS對(duì)香茅精油成分進(jìn)行了鑒定，共檢測(cè)出23種化合物，占總成