裂殖壺菌LU310高密度發(fā)酵生產(chǎn)DHA及產(chǎn)油微生物胞內(nèi)蛋白提取的研究.pdf

1、二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid, DHA)具有促進嬰幼兒腦部發(fā)育、保護視力和預(yù)防、治療心血管疾病等多種重要的生理功能，常作為功能性因子添加到保健食品和功能食品中而受到了廣泛關(guān)注。由于它的廣泛用途，其全球市場需求量也大大增加。當(dāng)前魚油是商業(yè)DHA的主要來源，但因其魚腥味重、DHA含量較低、資源有限等諸多不利因素，難以滿足市場需求，因此尋找微生物來源的DHA也越來越迫切。利用裂殖壺菌發(fā)酵生產(chǎn)DHA已成為當(dāng)前研究的熱

2、點，但DHA產(chǎn)量普遍較低。
　　本文以從浙江溫州樂清海灣紅樹林中篩選得到的DHA新高產(chǎn)菌株一裂殖壺菌LU310為研究對象，首先發(fā)現(xiàn)凹槽搖瓶培養(yǎng)能明顯提高細(xì)胞生物量和DHA產(chǎn)量。接著，搖瓶間歇補加氮源結(jié)果顯示補加氮源后的生物量和DHA產(chǎn)量比對照組分別提高了10.0％和17.9％。搖瓶間歇補加碳源結(jié)果顯示補加碳源后的生物量和DHA產(chǎn)量比對照組分別提高了39.7％和41.3％。在搖瓶中同時補加碳氮源發(fā)酵使其生物量和DHA產(chǎn)量分別達到了8

3、8.6 g/L和27.74 g/L，比對照組分別提高了53.3％和65.9％。最后，在5L發(fā)酵罐中進行流加分批發(fā)酵放大培養(yǎng)，最終生物量、總油脂和DHA產(chǎn)量分別達到128.7 g/L、64.21 g/L和32.05 g/L，基本實現(xiàn)了裂殖壺菌的高密度發(fā)酵生產(chǎn)DHA。
　　像裂殖壺菌這樣的產(chǎn)多油微生物中含有大量油脂，而這些油脂的存在會在很大程度上影響蛋白的提取和后續(xù)的電泳分析。本研究選取裂殖壺菌、高山被孢霉和小克銀漢霉三種產(chǎn)油微生物為