從生姜中篩選血清芳香酯酶激動(dòng)劑組分.pdf

1、對(duì)氧磷酶（PON）是一種人體內(nèi)重要的水解酶，其活性與心腦血管疾病、動(dòng)脈粥樣硬化、癌癥、Ⅱ型糖尿病等多種疾病相關(guān)。生姜具有抗氧化、抗動(dòng)脈粥樣硬化、降低膽固醇、增強(qiáng)免疫功能、止吐等多種藥理作用，常用于治療心血管疾病，增加冠脈血流量的作用。因而從生姜中篩選出PON1激動(dòng)劑組分對(duì)于上述一些疾病預(yù)防及治療有著非常重要的研究和實(shí)際意義。
　　采用以9-（4-甲基苯氧羰基）-10-甲基吖啶三氟甲基磺酸鹽作為底物的化學(xué)發(fā)光法評(píng)價(jià)中，在粗提液濃度為

2、5.00×10-6 g/L時(shí)血清空白組及生姜粗提液實(shí)驗(yàn)組的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)速率常數(shù)K分別為0.0064 min-1、0.0119 min-1，激動(dòng)倍數(shù)為1.86。采用以乙酰苯酚為底物的紫外分光光度法評(píng)價(jià)時(shí)發(fā)現(xiàn)生姜粗提液激動(dòng)活性在濃度為4.00×10-5 g/L時(shí)達(dá)到最大。生姜粗提液能激動(dòng)血清PON1催化吖啶酯水解兩種評(píng)價(jià)方法的結(jié)論一致。
　　從生姜粗提液中依次萃取得到石油醚萃取液（PEE）、乙酸乙酯萃取液（EAE）、正丁醇萃取液（n-B

3、E），化學(xué)發(fā)光法評(píng)價(jià)時(shí)發(fā)現(xiàn)三種萃取液濃度為8.00×10-5 g/L時(shí)都對(duì)血清PON1有激動(dòng)作用，其速率常數(shù)分別為0.0099 min-1、0.0081 min-1、0.0068 min-1，激動(dòng)作用的大小為：PEE＞EAE＞n-BE。采用紫外分光光度法評(píng)價(jià)時(shí)發(fā)現(xiàn)三種萃取液都對(duì)血清PON1有激動(dòng)作用，且激動(dòng)作用隨著濃度的增大先增大后降低。在萃取液濃度為8.00×10-5 g/L時(shí)，激動(dòng)作用的大小為：PEE＞EAE＞n-BE，該結(jié)果與化學(xué)

4、發(fā)光法測(cè)定相符合。
　　采用柱層析和薄層層析從乙酸乙酯萃取液中首次分離得到2個(gè)混合物（樣品1＃、樣品2＃）和純組分C（6-姜烯酚）、D、E（對(duì)香豆酸）、F（6-姜酚）。采用化學(xué)發(fā)光法評(píng)價(jià)時(shí)發(fā)現(xiàn)樣品1＃對(duì)血清PON1呈抑制作用，抑制作用隨著濃度的增大而增強(qiáng)。樣品2＃對(duì)血清PON1有激動(dòng)作用，激動(dòng)作用隨著濃度的增加先增加后減弱，在濃度為1.00×10-4 g/L時(shí)，激動(dòng)作用最大，K=0.01519 min-1，激動(dòng)倍數(shù)為2.44。因此

5、對(duì)樣品2＃進(jìn)一步分離得到組分A和B（3-羥基-7-甲氧基黃酮）。由于組分A、D的量少，對(duì)其無法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。
　　組分A、B、C對(duì)血清PON1有激動(dòng)，激動(dòng)作用都隨著濃度的增大先增大后減弱，在各組分濃度為1.00×10-4 g/L、2.00×10-6 g/L、1.00×10-5 g/L時(shí)激動(dòng)作用達(dá)到最大，K值分別為0.0131min-1、0.0104min-1、0.0205min-1，激動(dòng)倍數(shù)分別為2.05、1.63、3.20，激動(dòng)

6、作用的大小為：組分C＞組分A＞組分B。組分D、E、F對(duì)血清PON1呈抑制作用，抑制作用隨著濃度的增大而增強(qiáng)。
　　采用紫外分光光度法時(shí)發(fā)現(xiàn)組分A、B、C對(duì)血清PON1呈激動(dòng)作用，三種組分的激動(dòng)作用都隨著濃度增大先增大后降低。在最佳的實(shí)驗(yàn)濃度下，激動(dòng)活性的大小為：組分A（0.80×10-5 g/L，70.60 U/L）＞組分C（6.00×10-5 g/L，64.79 U/L）≈組分B（6.00×10-5 g/L，64.59 U/L）

7、。
　　組分E、F對(duì)PON1呈抑制作用，在濃度小于4.00×10-4 g/L時(shí)，組分E的抑制作用大于組分F；在濃度大于4.00×10-4 g/L時(shí)，組分F對(duì)血清的抑制作用大于組分E。采用雙倒數(shù)圖判斷組分E、F的抑制類型，發(fā)現(xiàn)組分E和F為競(jìng)爭(zhēng)性抑制，平均抑制常數(shù)分別為8.98 mmol/L、9.13 mmol/L，抑制作用強(qiáng)度為：組分F＞組分E。
　　采用化學(xué)發(fā)光法評(píng)價(jià)從石油醚萃取液中得到的組分M及組分N，發(fā)現(xiàn)組分M對(duì)血清PO