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1、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文水稻硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因OsNRT1.2和OsNRT1.5超量表達(dá)材料的功能鑒定姓名:馬翠申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):植物營(yíng)養(yǎng)學(xué)指導(dǎo)教師:徐國(guó)華201106水稻硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白O s N R T I .2 和O s N R T I .5 超量表達(dá)材料的功能驗(yàn)證3 ) 采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化水稻分別超量表達(dá)O s N R T l .2 和O s N R T l .5 。分析檢測(cè)結(jié)果表明:與野生型相比,在m R N A 水平O
2、s N R T l .2 、O s N R T l .5 在武運(yùn)粳7 號(hào)、日本晴超量轉(zhuǎn)基因材料表達(dá)均上調(diào)并且在不同氮素水平處理下無(wú)顯著差異;在轉(zhuǎn)基因植株地上部分和根系,低親和組成型O s N R T l .J 『和高親和O s N R T 2 .J 、O s N R T 2 .2 的表達(dá)均沒(méi)有變化.’4 ) O s N R T l .2 武運(yùn)粳7 號(hào)超量表達(dá)植株在水培試驗(yàn)中,用5 .0 m M N 0 3 “ 處理,株高與W W T 有
3、顯著差異( 除W 1 .2 .O E 2 外) ,比w w T 增加了3 .1 —3 .7e m ;根長(zhǎng)、根系全氮含量顯著降低,W 1 .2 .O E l 、W 1 .2 - O E 2 、W 1 .2 .O E 8 分別比w w T 減少了3 .3 、2 .5 、4 .5e m 和1 1 .3 %、1 0 .9 %、1 4 .6 %;氮吸收量比W W T 分別增加了3 9 .5 %、3 3 .9 %、9 7 .8 %:W 1 .2 -
4、 O E l 、W 1 .2 - O E 2 與W W T 地上部分全氮含量沒(méi)有顯著差異,而W 1 .2 - O E 8是W W T 的1 .1 2 倍。在O .2 m M N 0 3 “ 供氮水平上,轉(zhuǎn)基因植株與M 的株高、根長(zhǎng)( 除W 1 .2 .O E l 外) 、地上部分及根系的氮吸收量、全氮含量均無(wú)顯著差異。在0 .2 m MN 0 3 。、5 .0m M N 0 3 ‘供氨水平上,轉(zhuǎn)基因植株比w W T 的生物量分別增加9
5、.4 %~3 1 .1%和1 2 .5 %~4 3 .8 %。在缺氮的田間試驗(yàn)中,轉(zhuǎn)基因植株地上部干重、根系干重比W W T ,分別顯著增加3 5 .4 %一5 7 .2 %和7 9 .3 %一1 2 0 .9 %。O s N R T l .2 在武運(yùn)粳7 號(hào)過(guò)量表達(dá)可能受高濃度硝酸鹽影響,促進(jìn)植株對(duì)硝酸鹽的吸收、生物量增加和根系生長(zhǎng)。5 ) O s N R T l .2 日本晴超量表達(dá)植株水培試驗(yàn)中,在O .2m M N H 4 +
6、、5 .0 m M N I - 1 4 十、O .2m M N 0 3 。、5 .0m M N 0 3 。、2 .5m M N I - h N 0 3 供氮水平上,與W T 的根系長(zhǎng)度變化無(wú)顯著差異。在2 .5m M N H 4 N 0 3 供氮水平上,W T 、1 .2 - O E l 、1 .2 - O E 5 、1 .2 - O E 6 株高分別增加了7 .8c m 、2 0 .2c m 、1 8 .6c m 、2 7 .2c m
7、 ;1 .2 - O E l 、1 .2 - O E 5 、1 .2 - O E 6 地上部分全氮含量比W T 顯著增加,分別增加了2 7 %、1 8 %、2 3 %和1 5 .6 %、9 .5 %、1 9 .2%:生物量分別是w T 的1 .9 、1 .3 、2 .2 倍和1 .8 、1 .7 、2 .7 倍。在缺氮的田間試驗(yàn)中,轉(zhuǎn)基因植株的株高、分蘗數(shù)、有效穗數(shù)、單株產(chǎn)量、千粒重、結(jié)實(shí)率、地上部分干重( 除1 .2 .O E 6 外
8、) 、根系干重與W T 無(wú)顯著差異。6 ) O s N R T l .5 武運(yùn)粳7 號(hào)轉(zhuǎn)基因植株水培試驗(yàn)中,在5 .0m M N H 4 + 、2 .5 m M刪0 3 供氮水平上處理3 0 天,W 1 .5 .O E 2 、W 1 .5 .O E 7 、W 1 .5 .O E 8 干物質(zhì)量比W W T分別增加了5 4 .8 %、7 4 .6 %、3 6 .7 %和6 8 .5 %、2 4 .8 %、3 1 .5 %;生長(zhǎng)中期在5 .0
9、m MN 0 3 。、2 .5m M N H 4 N 0 3 、5 .0 m M N I - h + 供氮時(shí),比野生型先分蘗,且根系粗壯。在缺氮的田間試驗(yàn)中,與w w T 相比,武運(yùn)粳7 號(hào)轉(zhuǎn)基因植株的單株產(chǎn)量( 除W 1 .5 .O E 7外) 、結(jié)實(shí)率、單穗粒數(shù)顯著增加;株高、分蘗數(shù)( 除W 1 .5 .O E 2 外) 、有效穗數(shù)( 除W 1 .5 .O E 2 外) 、千粒重?zé)o顯著差異.轉(zhuǎn)基因植株提前分蘗,從而導(dǎo)致生育期提前,比
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