spio標(biāo)記內(nèi)皮祖細(xì)胞活體示蹤裸鼠腦膠質(zhì)瘤1.5tmr成像的實(shí)驗(yàn)研究

1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文SPIO標(biāo)記內(nèi)皮祖細(xì)胞活體示蹤裸鼠腦膠質(zhì)瘤1.5T MR成像的實(shí)驗(yàn)研究姓名：王舒楠申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：張偉國(guó)20090501第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)細(xì)胞漿內(nèi)有內(nèi)皮細(xì)胞的特征性結(jié)構(gòu)W e i b e l —P a l a d e 小體，細(xì)胞內(nèi)存在較多線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器，提示細(xì)胞代謝旺盛。免疫熒光檢測(cè)陽(yáng)性表示其正逐漸向內(nèi)皮細(xì)胞分化，成血管實(shí)驗(yàn)側(cè)面證實(shí)了培養(yǎng)細(xì)胞具有內(nèi)皮細(xì)胞的部

2、分功能。( 2 ) 體外s P I o 標(biāo)記E P C s 后經(jīng)普魯士藍(lán)染色見(jiàn)胞漿內(nèi)有藍(lán)染顆粒，電鏡下亦可見(jiàn)胞漿內(nèi)大量高密度物質(zhì)。隨著s P I O 濃度的提高，標(biāo)記的效率也隨之提高，但對(duì)細(xì)胞的毒性也越大。在S P I O濃度為2 5 u ∥I n l 和5 0 u ∥向條件下，臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)死細(xì)胞數(shù)約為9 ％～1 2 ％，與未標(biāo)記細(xì)胞( 約1 0 ％) 相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。大于5 0 u g ／“條件下( 7 5 u g ／皿、l

3、O O u ∥m l 、1 2 5 u ∥l l l l ) ，臺(tái)盼藍(lán)計(jì)算死細(xì)胞的比例分別約為2 1 ％、3 3 ％和4 9 ％，明顯高于未標(biāo)記細(xì)胞( 約1 0 ％) ( P < o ．0 5 ) 。M T T 生長(zhǎng)曲線證實(shí)E P C s 的增值活力在S P I O 濃度小于5 0 u ∥皿條件下無(wú)明顯改變，高于7 5 u ∥叫細(xì)胞增殖活力顯著減低。( 3 ) 細(xì)胞移植后第1 天在T 2加權(quán)像上即可發(fā)現(xiàn)腫瘤內(nèi)有低信號(hào)顯示，隨著時(shí)間

4、的延長(zhǎng)，低信號(hào)越明顯，而在移植未標(biāo)記細(xì)胞的對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組裸鼠的對(duì)側(cè)正常腦組織則沒(méi)有明顯的信號(hào)變化。病理切片普魯士藍(lán)染色與M R I 所示的低信號(hào)區(qū)相吻合，腦腫瘤內(nèi)藍(lán)染的E P c s 顯著高于對(duì)側(cè)正常腦組織和其他器官( 心臟、肝臟、脾臟、腎臟和肺臟) ，主要聚集于腫瘤區(qū)微血管豐富的部位。結(jié)論：( 1 ) 人臍帶血來(lái)源豐富、取材方便，是獲得E P c s 的理想來(lái)源，分離出的E P C s在特定的培養(yǎng)條件下能定向向內(nèi)皮細(xì)胞分化。( 2 )

5、 用一定濃度的S P I O —P L L 復(fù)合物標(biāo)記細(xì)胞效率高、毒性小，能用于M R 進(jìn)行活體示蹤，是一種簡(jiǎn)便實(shí)用的細(xì)胞標(biāo)記工具，其標(biāo)記E P C s 的最佳濃度在2 5 ～5 0 u ∥“之間。( 3 ) E P C s 靶向歸巢至膠質(zhì)瘤區(qū)，可以作為分子靶向治療的有效載體及早期診斷膠質(zhì)瘤的影像標(biāo)記物；1 ．5 TM R I 能夠活體示蹤磁性標(biāo)記的E P C s 在膠質(zhì)瘤中的遷移、分布和轉(zhuǎn)歸，是監(jiān)測(cè)移植細(xì)胞的有效方法。關(guān)鍵詞：膠質(zhì)瘤；