htngα作用相關(guān)基因bri3的研究ⅰ.小鼠bri3基因的克隆及其功能的初步研究;ⅱ.用酵母雙雜合系統(tǒng)篩選與人bri3相互作用的蛋白質(zhì);ⅲ.人bri3相互作用蛋白bri3bp的基因克隆和定位

1、復旦大學博士學位論文hTNGα作用相關(guān)基因BRI3的研究Ⅰ.小鼠BRI3基因的克隆及其功能的初步研究；Ⅱ.用酵母雙雜合系統(tǒng)篩選與人BRI3相互作用的蛋白質(zhì)；Ⅲ.人BRI3相互作用蛋白BRI3BP的基因克隆和定位姓名：林麗珠申請學位級別：博士專業(yè)：遺傳學指導教師：趙壽元2001.5.1克隆( B R I B P l ) 的蛋白質(zhì)產(chǎn)物都能夠與B R l 3 蛋白相互結(jié)合．然后，將N C S l和B R I B P l 分別克隆到大腸桿菌表達

2、載體上進行G S T 融合表達，再通過體外結(jié)合試驗驗證了融合蛋白與人B R l 3 蛋白的結(jié)合作用．聿研究工作的第三部分是，根據(jù)B R I B P l 的c D N A 序列，采用5 ’R A C E ( R a p i da m p l i f i c a t i o no fc D N Ae n d ) 和電子克隆技術(shù)，分離到一個全長為1 ．9k b 的人類新基因的c D N A ．報送H U G O 基因命名委員會后被命名為B R

3、 l 3 B P ．陀舍有一個編碼2 5 1 個氨基酸殘基的完整開放閱讀框．信號肽分析顯示B R I S B 聲推導蛋白質(zhì)的N 端3 4 個氨基酸為信號肽．表達譜分析發(fā)現(xiàn)B R l 3 B P 基因有兩條不同長度的轉(zhuǎn)錄本：7 ．4k b 和1 ．5k b ，而且在腦、腎和肝組織中表達豐度特別高．放射雜種細胞克隆( R H ) 將其定位，于人染色體1 2 q 2 4 ．2 ．q t e r 區(qū)帶的D 1 2 S 3 4 0 和D 1 2

4、S 9 7 之間．它在G e n B a n k 登錄注冊號為A F 2 8 4 0 9 4 ．因此，本項研究的創(chuàng)新點有：+一、從小鼠腦血管內(nèi)皮細胞中分離出細胞經(jīng)h T N F & 作用后差異表達的基因，其中有一個是功能未知的小鼠基因B R ／3 ．首次實驗證明該基因具有誘導細胞死亡的功能．二、首次證實與小鼠B R l 3 同源性達9 5 ％的人體B R l 3 蛋白相互作用的有三種蛋白質(zhì)，這為進一步弄清B R ／3 基因的功能

5、提供了線索和材料．三、與色R J 3 蛋白相互作用的人體蛋白質(zhì)中有一個是由E S T 編碼的，從這個E S T出發(fā)，克隆到一個新的人類全長c D N A ( B R l 3 B P ) ，G e n B a n k 登錄注冊號為A F 2 8 4 0 9 4 ．并對其結(jié)構(gòu)、組織表達譜作了分析，基因定位在1 2 q 2 4 ．2 - q t e r ．4，。／ 。， j關(guān)鍵詞：T N F 一血管內(nèi)皮細胞，R T - P C R , B R