實(shí)驗(yàn)9高溫對(duì)植物細(xì)胞膜的傷害

1、1. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?■ 學(xué)習(xí)電導(dǎo)儀法測(cè)定膜相對(duì)透性的方法■ 理解逆境對(duì)植物膜透性的影響,植物細(xì)胞膜起調(diào)節(jié)控制細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交換的作用，它的選擇透性是其最重要的功能之一。當(dāng)植物受到逆境影響時(shí)，如高溫或低溫，干旱、鹽漬、病原菌侵染后，細(xì)胞膜遭到破壞，膜的透性增加，選擇透性喪失，細(xì)胞內(nèi)部分電解質(zhì)外滲，將植物組織浸入去離子水中，水的電導(dǎo)將因電解質(zhì)的外滲而加大，傷害愈重，外滲愈多，電導(dǎo)率愈大。膜結(jié)構(gòu)破壞的程度與逆境的強(qiáng)度、持續(xù)的時(shí)間、作物品種的抗

2、性等因素有關(guān)。因此，質(zhì)膜透性的測(cè)定常可作為逆境傷害的一個(gè)生理指標(biāo)，廣泛應(yīng)用在植物抗性生理研究中。本實(shí)驗(yàn)采用電導(dǎo)率法測(cè)定電解質(zhì)的相對(duì)外滲率，來了解脅迫情況下植物受害的程度。,2. 實(shí)驗(yàn)原理,當(dāng)質(zhì)膜的選擇透性被破壞時(shí)細(xì)胞內(nèi)電解質(zhì)外滲，其中包括鹽類、有機(jī)酸等，這些物質(zhì)進(jìn)入環(huán)境介質(zhì)中，如果環(huán)境介質(zhì)是蒸餾水，那么這些物質(zhì)的外滲會(huì)使蒸餾水的導(dǎo)電性增加，表現(xiàn)在電導(dǎo)率的增加上。植物受傷害愈嚴(yán)重，外滲的物質(zhì)越多，介質(zhì)導(dǎo)電性也就越強(qiáng)，測(cè)得的電導(dǎo)率就越高（

3、不同抗性品種就會(huì)顯示出抗性上的差異。）本實(shí)驗(yàn)采用電導(dǎo)率法測(cè)定電解質(zhì)的相對(duì)外滲率，來了解脅迫情況下植物受害的程度。,傷害率,本次實(shí)驗(yàn)測(cè)定高溫對(duì)植物細(xì)胞膜的傷害電導(dǎo)率 K=GQQ:電極常數(shù)（電導(dǎo)儀本身決定）G:實(shí)測(cè)電導(dǎo)值傷害率（％）＝,3 材料、儀器設(shè)備及試劑,（一）材料：梧桐葉片；（二）儀器設(shè)備： 1. 電導(dǎo)儀；2.打孔器；3. 真空干燥器； 4. 恒溫水浴鍋；,4 實(shí)驗(yàn)步驟,1) 打取葉圓片：自選葉片，洗凈

4、吸干，避開葉脈打取30個(gè)葉圓片, 放入1支試管, 再打取30個(gè)葉圓片,放入另1支試管, 依此類推, 每支試管皆放入30個(gè)葉圓片；2) 試管分別編號(hào)為：1A,1B, 2A,2B ……5A,5B，每管加入15ml純水, 抽真空20min；3) 水浴處理：5組(1A1B,2A2B ……5A5B)分別在60℃水浴0，10，20，30，40min，取出后用自來水冷卻10分鐘；,4) 測(cè)量電導(dǎo)率：用電導(dǎo)儀測(cè)定浸泡溶液的電導(dǎo)率（分組單獨(dú)領(lǐng)取電導(dǎo)儀

5、，詳細(xì)使用方法分組指導(dǎo)）；5) 煮沸電導(dǎo)率：測(cè)過電導(dǎo)率的10支試管再放入100℃沸水浴中15min，以殺死植物細(xì)胞，使細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)全部滲漏出來，取出試管后用自來水冷卻10min，測(cè)其煮沸電導(dǎo)率。,電導(dǎo)儀的使用方法,電源開關(guān)“開”，預(yù)熱；打開（測(cè)量/校正）撥至“測(cè)量”；（補(bǔ)償/一般）撥至“一般”；（×1/×10-2）撥至“×1”；量程范圍選“×103”，使待測(cè)值介于0.1～0.999之間。每次

6、往待測(cè)液中插入電極時(shí)，都要首先用純水沖洗電極，并用吸水紙輕輕拭干。,5 數(shù)據(jù)記錄與處理,表1 高溫對(duì)葉片傷害率的影響,6 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析,計(jì)算電導(dǎo)率時(shí)，取2支試管的平均值計(jì)算傷害率比較不同時(shí)間處理的葉片細(xì)胞透性的變化情況，記錄結(jié)果，并加以解釋以傷害率同處理時(shí)間的關(guān)系作圖,精品課件！,精品課件！,7 注意事項(xiàng),整個(gè)過程中，葉片接觸的用具必須絕對(duì)潔凈（全部器皿要洗凈），也不要用手直接接觸葉片，以免污染； 水浴加熱隔幾分鐘搖一次