臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)

1、臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)1、免疫：是機(jī)體識(shí)別和排斥抗原性異物的一種生理功能2、免疫防御（對外）；免疫自穩(wěn)（防自身免疫?。幻庖弑O(jiān)視（防腫瘤）。3、中樞免疫器官：骨髓、胸腺；外周免疫器官：淋巴結(jié)、脾臟（最大）、黏膜相關(guān)淋巴組織4、B細(xì)胞：通過識(shí)別膜免疫球蛋白來結(jié)合抗原，介導(dǎo)體液免疫；B細(xì)胞受體=BCR=mIg表面標(biāo)志：膜免疫球蛋白（SmIg）、Fc受體、補(bǔ)體受體、EB病毒受體和小鼠紅細(xì)胞受體。成熟B細(xì)胞：CD19、CD20、CD21、

2、CD22（成熟B細(xì)胞的mIg主要為mIgM和mIgD）同時(shí)檢測CD5分子，可分為B1細(xì)胞和B2細(xì)胞。B細(xì)胞功能檢測方法：溶血空斑形成試驗(yàn)（體液免疫功能）。5、T細(xì)胞：介導(dǎo)細(xì)胞免疫。共同表面標(biāo)志是CD3（多鏈糖蛋白）；輔助T細(xì)胞的標(biāo)志是CD4；殺傷T細(xì)胞的標(biāo)志是CD8；T細(xì)胞受體=TCR。T細(xì)胞和NK細(xì)胞的共同表面標(biāo)志是CD2（綿羊紅細(xì)胞受體）；CD3＋CD4＋CD8－=輔助性T細(xì)胞（Th）CD3＋CD4－CD8＋=細(xì)胞毒性T細(xì)胞（Tc或

3、CTL）（T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)）CD4＋CD25＋=調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tr或Treg）T細(xì)胞功能檢測：植物血凝素（PHA）刀豆素（CONA）刺激T細(xì)胞增殖。增殖試驗(yàn)有：形態(tài)法、核素法。T細(xì)胞亞群的分離：親和板結(jié)合分離法，磁性微球分離法，熒光激活細(xì)胞分離儀分離法E花環(huán)試驗(yàn)是通過檢測SRBC受體而對T細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的一種試驗(yàn)；6、NK細(xì)胞：具有細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。直接殺傷靶細(xì)胞（腫瘤細(xì)胞和病毒感染的細(xì)胞）表面標(biāo)志：CD16（ADCC）、CD5

4、6。測定人NK細(xì)胞活性的靶細(xì)胞多用K562細(xì)胞株，而測定小鼠NK細(xì)胞活性則常采用YAC1細(xì)胞株。7、吞噬細(xì)胞包括：單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)（MPS，表面標(biāo)志CD14，包括骨髓內(nèi)的前單核細(xì)胞、外周血中的單核細(xì)胞和組織內(nèi)的巨噬細(xì)胞）和中性粒細(xì)胞。（表達(dá)MHCⅡ類分子）8、人成熟樹突狀細(xì)胞（DC）（專職抗原呈遞功能）：表面標(biāo)志為CD1a、CD11c和CD83。9、免疫球蛋白可分為分泌型（sIg，主要存在于體液中，具有抗體功能）及膜型（mIg，作為抗原

5、受體表達(dá)于B細(xì)胞表面，稱為膜表面免疫球蛋白）10、免疫球蛋白按含量多少排序：IgG＞IgA＞IgM＞IgD＞IgE五類（按重鏈恒定區(qū)抗原性（CH）排序）免疫球蛋白含量測定：單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法、免疫比濁法。11、免疫球蛋白的同種型抗原決定簇位于恒定區(qū)（CH、CL）12、抗體由漿細(xì)胞產(chǎn)生。抗體分子上VH和VL（高變區(qū)）是抗原結(jié)合部位。30、抗血清常見保存條件：28℃保存；冷凍保存（最常用）；真空干燥保存（510年）。31、雜交瘤細(xì)胞放入液氮

6、（196℃）前，需要逐步降溫。復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)，從液氮罐內(nèi)取出凍存管，立即浸入37℃水浴。32、凝集反應(yīng)分為兩個(gè)階段：①抗原抗體的特異性結(jié)合；②出現(xiàn)可見的顆粒凝聚。33、直接凝集反應(yīng)：細(xì)菌、螺旋體和紅細(xì)胞等顆粒性抗原，在適當(dāng)?shù)碾娊赓|(zhì)（0.85%氯化鈉）參與下可直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)凝集。抗原=凝集原，抗體=凝集素。34、玻片凝集試驗(yàn)：主要用于抗原的定性分析，AB0血型的測定。試管凝集試驗(yàn)：肥達(dá)氏試驗(yàn)、外斐試驗(yàn)、輸血交叉配血試驗(yàn)；35、正向間接

7、血凝反應(yīng)（PHA）：紅細(xì)胞包被抗原，用以檢測抗體。（凝集）反向間接血凝反應(yīng)（RPHA）：紅細(xì)胞包被抗體，用以檢測抗原。（凝集）36、間接血凝抑制試驗(yàn)：可用于檢測抗體、自身抗體、變態(tài)反應(yīng)性抗體，也可測定抗原。（不凝集）37、金黃色葡萄球菌A蛋白（SPA）協(xié)同凝集反應(yīng)(反向間接凝集)38、血凝試驗(yàn)（載體為綿羊、家兔、雞的紅細(xì)胞及O型人紅細(xì)胞）可在微量滴定板或試管中進(jìn)行，將標(biāo)本倍比稀釋，一般為1:64，同時(shí)設(shè)不含標(biāo)本的稀釋液為對照孔。凡紅細(xì)胞

8、沉積于孔底，集中呈一圓點(diǎn)的為不凝集。如紅細(xì)胞凝集，則分布于孔底周圍。39、膠乳凝集試驗(yàn)（間接凝集），所用載體為聚苯乙烯膠乳；明膠凝集試驗(yàn)（間接）將病毒抗原或重組抗原吸附于粉紅色明膠顆粒：HIV1抗體和抗精子抗體檢測40、抗球蛋白試驗(yàn)，又稱Coombs試驗(yàn)，是檢測抗紅細(xì)胞不完全抗體的一種很有用的方法。包括直接Coombs試驗(yàn)（檢測紅細(xì)胞上的不完全抗體）和間接Coombs試驗(yàn)（游離在血清中的不完全抗體）41、沉淀反應(yīng)分兩個(gè)階段：第一階段為抗

9、原抗體發(fā)生特異性結(jié)合，幾秒到幾十秒即可完成，出現(xiàn)可溶性小的復(fù)合物，肉眼不可見。第二階段為形成可見的免疫復(fù)合物，約需幾十分鐘到數(shù)小時(shí)才能完成，如沉淀線、沉淀環(huán)。絮狀沉淀試驗(yàn)：絮狀沉淀試驗(yàn)：抗原抗體溶液在電解質(zhì)的存在下結(jié)合，形成絮狀沉淀物，這種絮狀沉淀受抗原和抗體比例的直接影響，因此常用來作為測定抗原抗體反應(yīng)最適比例的方法。42、免疫比濁：最適pH為6.5～8.5，磷酸鹽緩沖液。（R型抗體，增濁劑如聚乙二醇（PEG）、吐溫20）。適合于大批