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文檔簡介
1、板藍根提取液對小鼠免疫機能的影響(一)材料:1.板藍根提取液(直接可灌胃)(蒸餾水一瓶,生理鹽水一瓶,95%乙醇一瓶,量筒小3支,量筒大1支,燒杯3個,玻璃棒3個,吸管10個,注射器一天預(yù)計三支總數(shù)為3x試驗天數(shù),托盤天平2個,培養(yǎng)基3套)2.酒精燈3個,消毒酒精棉一套3.大小鑷子各3把,小剪刀3把4.小鼠(46周,1822g20只,雌雄隨機分兩組)5.雞細胞懸液6.移液槍3把(大小規(guī)格),槍頭1盒,EP管10個,濾紙10張,試管10個
2、,膠頭滴管3個7.染色裝置,(瑞氏染色)8.顯微鏡,解剖盤,固定針,載破片蓋破片(各6個),平皿(6個),96孔培養(yǎng)板3個,離心機,培養(yǎng)箱9.試驗用手套(20個)口罩(20個)生理鹽水,待其稍干后,進行瑞氏染色。油鏡觀察吞噬細胞數(shù)量,計算指數(shù),雞紅細胞為淡黃色橢圓形有核的細胞,數(shù)量多體積較大不規(guī)則的細胞,表面有許多似毛刺裝的小突起即為吞噬細胞。3.小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗無菌條件下分別取出A組B組小鼠脾臟,放入培養(yǎng)液中稀釋,用RPMI164
3、0培養(yǎng)液稀釋至細胞濃度為2106個mL,各取400μL至96孔培養(yǎng)板中,加入200mgLConA溶液10μL,培養(yǎng)基代替ConA溶液做對照,于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h。培養(yǎng)結(jié)束前4h各取上清液200μL,加入已除菌的5mgmLMTT溶液40μL,繼續(xù)培養(yǎng)至結(jié)束。離心保留沉淀,各加入37℃DMSO300μL,振蕩10min,酶標儀測定570nm處吸光值,計算淋巴細胞增殖指數(shù),淋巴細胞增殖指數(shù)按式(4)計算。脾淋巴細胞增殖指數(shù)%
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