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文檔簡介
1、一、菌種保藏定期移植保藏法將菌種接在斜面培養(yǎng)基上待菌落生長完好后于4度冰箱保藏。每隔一段時間移植一次再將新長好的斜面保藏。用于斜面保藏的培養(yǎng)基要求含氮多,少含或者不含糖分。即滿足菌種生長繁殖需要,又防止產酸過多影響菌種保藏。缺點:菌株仍有代謝活性,保藏時間不能太長,傳代多,易變異。細菌一般用營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,37度培養(yǎng),酵母菌一般用麥芽汁酵母膏培養(yǎng)基,28—30度培養(yǎng),霉菌采用馬鈴薯葡萄糖瓊脂或者麥芽汁或察氏培養(yǎng)基,30度培養(yǎng)。保藏溫度4
2、—6攝氏度。細菌要求每月移植一次,酵母和霉菌3月移植一次。保藏時觀察冰箱溫度、濕度、試管棉塞是否有長霉現(xiàn)象,如有異常應立即取出重新移植。每次移植應與原種進行菌落、細胞形態(tài)對比,必要時做生產性能檢測。應保藏相繼的三代培養(yǎng)物,以便對照。二、試管接種培養(yǎng)接種前手滅菌,將試管菌種,斜面培養(yǎng)基及其他用具用酒精消毒,一手拿菌種和培養(yǎng)基試管,一手拿接種針在酒精燈上灼燒,凡是進入試管的部分都必須灼燒,待冷卻后把試管移近酒精燈,用右手小指無名指拔去棉塞用
3、手指夾住,管口應在酒精燈火焰無菌區(qū)內,棉四、簾子曲麩皮加水滅菌,出鍋裝入筐中,房間滅菌,雙手滅菌,穿工作服,冷卻到36—38℃,接入三角瓶種曲,先將三角瓶種曲與適量滅菌干麩皮拌勻,分撒入曲料,混勻,用紗布抱起來堆積培養(yǎng)。堆積培養(yǎng)開始品溫30℃,水分50—53%,酸度0.3—0.5,室溫29左右,干濕球相差1—2度,剛開始處于孢子發(fā)芽期,產熱少,用室溫維持品溫,堆積有利于保溫保濕,曲料不易失水。堆積3—4小時翻拌一次,再經5小時左右,曲料
4、變白結塊,品溫接近38℃,將曲料打碎,迅速上簾。上簾應輕松均勻,攤平,厚度1.5厘米左右,蓋滅菌濕潤紗布,紗布含水不易多,嚴禁有水滴入曲料,室溫28℃左右,濕度85—90%,品溫30—32.上簾后5—6小時,曲料上呈白色菌絲,品溫升高到36℃左右,有結塊現(xiàn)象,劃頭遍曲,要求將曲料捏碎,用小噴霧器均勻噴灑補加30%40%的40℃溫開水。在經過6—8小時,菌絲大量生長,劃2遍曲。劃頭遍曲后品溫上升較快,室溫25℃左右,地面灑水,濕度85%,
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