2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:1、采用改良差速貼壁聯(lián)合胰酶限時消化的方法培養(yǎng)大鼠乳鼠的嗅鞘細(xì)胞,并對細(xì)胞分泌的神經(jīng)生長因子進(jìn)行檢測。2、將原代培養(yǎng)的嗅鞘細(xì)胞與異種神經(jīng)支架在體外共同培養(yǎng),觀察在體外環(huán)境下支架對細(xì)胞的生長是否有影響。
  方法:實(shí)驗(yàn)一:取10只SD大鼠的乳鼠(鼠齡7d),取乳鼠的嗅球,應(yīng)用改良差速貼壁聯(lián)合胰酶限時消化3 min的方法培養(yǎng)細(xì)胞;對細(xì)胞進(jìn)行神經(jīng)生長因子的檢測,細(xì)胞密度調(diào)整到密度1×106/ml,接種到24孔板內(nèi),每組密度又分為3

2、d組、5d組、7d組、9d組,神經(jīng)生長因子酶聯(lián)反應(yīng)檢測不同時間點(diǎn)細(xì)胞在分泌生長因子量上的差異。實(shí)驗(yàn)二:萃取異種神經(jīng)(青紫藍(lán)兔脛神經(jīng))支架,對萃取后神經(jīng)進(jìn)行HE染色、S-100、Laminin免疫組織化學(xué)染色;在體外將嗅鞘細(xì)胞與異種神經(jīng)支架進(jìn)行共培養(yǎng),通過掃描電鏡觀察細(xì)胞與支架的共存情況;神經(jīng)生長因子酶聯(lián)反應(yīng)檢測單純嗅鞘細(xì)胞(對照組)、嗅鞘細(xì)胞與支架共培養(yǎng)(實(shí)驗(yàn)組)在3d、5d、7d、9d不同時間點(diǎn)上神經(jīng)生長因子分泌上是否存在差異。

3、>  結(jié)果:實(shí)驗(yàn)一:應(yīng)用改良差速貼壁聯(lián)合胰酶限時消化3min的方法能夠培養(yǎng)出的較高濃度的嗅鞘細(xì)胞,細(xì)胞純度能夠達(dá)到70%;統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)經(jīng)胰酶限時消化3 min后的嗅鞘細(xì)胞分泌的神經(jīng)生長因子含量隨時間的延長而逐漸減少。胰酶消化后第3d神經(jīng)生長因子分泌的含量最高(P=0.012 P<0.05)。實(shí)驗(yàn)二:萃取后的異種神經(jīng)支架鏡下未見雪旺氏細(xì)胞和髓鞘結(jié)構(gòu),神經(jīng)基底膜、內(nèi)膜、束膜和外膜均存在;嗅鞘細(xì)胞能夠貼附生長在異種神經(jīng)支架上;實(shí)驗(yàn)組與對照組在

4、3d、5d、7d、9d四個不同時間點(diǎn)神經(jīng)生長因子的分泌量上的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)
  結(jié)論:1、聯(lián)合培養(yǎng)嗅鞘細(xì)胞的方法能獲得更高濃度的嗅鞘細(xì)胞,細(xì)胞濃度能夠達(dá)到70%,能夠滿足后期移植對細(xì)胞的要求。2、聯(lián)合培養(yǎng)的嗅鞘細(xì)胞在細(xì)胞生長到大約10d(胰酶限時消化后3d)的時候分泌的神經(jīng)生長因子量最多。3、萃取后的異種神經(jīng)支架能夠滿足作為載體支架的要求。4、原代培養(yǎng)的嗅鞘細(xì)胞能夠抓附在神經(jīng)支架上生長。5、嗅鞘細(xì)胞與支架共同培

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