馬尾松松針揮發(fā)油化學成分及抗氧化活性研究

1、1馬尾松松針揮發(fā)油化學成分及抗氧化活性研究胡文杰1李閣1李冠喜2（井岡山大學生命科學學院1，吉安343009）（曲阜師范大學生命科學學院2，曲阜273165）摘要采用水蒸氣蒸餾法提取馬尾松松針揮發(fā)油，利用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（GCMS）對揮發(fā)油進行化學成分分析，并以DPPH自由基、ABTS自由基、超氧陰離子自由基的清除能力以及總還原力為評價指標，研究其抗氧化作用。結(jié)果表明，從馬尾松松針揮發(fā)油中共分離鑒定出了34種化合物，其相對質(zhì)量分數(shù)占揮發(fā)

2、油總量的95.76%，主要化合物為石竹烯（15.85%）、α杜松醇（12.12%）、大根香葉烯B（10.81%）、β古巴烯（7.94%）、l(10)4杜松二烯（6.65%）、γ依蘭油烯（6.01%）、蛇麻烯（5.82%）和β瑟林烯（3.63%）等。馬尾松松針揮發(fā)油具有較強的抗氧化活性，DPPH自由基、ABTS自由基、超氧陰離子自由基的清除能力以及總還原力隨揮發(fā)油質(zhì)量濃度的增加而增強；DPPH自由基、ABTS自由基、超氧陰離子自由基的半數(shù)

3、清除率IC50值分別為5.16、5.47、4.34mgmL。通過本次試驗證實，馬尾松松針揮發(fā)油作為天然抗氧化劑具有較大的開發(fā)潛質(zhì)。關(guān)鍵詞馬尾松揮發(fā)油化學成分抗氧化氣相色譜質(zhì)譜中圖分類號：S682.31Q945.64文獻標識碼：A文章編號：ChemicalConstituentsAntioxidantofVolatileOilfromPinusmassonianaLambNeedlesHUWenjie1LIGe1LIGuangxi2(Co

4、llegeofLifeSciencesJinggangshanUniversity1Ji’an343009)(SchoolofLifeSciencesQufunmalUniversity2Qufu273165)AbstractThevolatileoilfromPinusmassonianaLambneedleshasbeenextractedbysteamdistillationanalyzedbyGCMS.Theantioxidan

5、tactivityofthevolatileoilwasexpledwithDPPHfreeradicalsABTSfreeradicalssuperoxideanionfreeradical(O2－)totalreducingpowerasindicats.Theresultsshowthattheoptimalextractionprocessisasfollows:thirtyfourcompoundsareidentifiedb

6、yGCMStechniqueaccountingf95.76%oftotalpeakarea.ThemajcompoundsinPinusmassonianaLambneedleswereCaryophyllene(15.85%)αTerpineol(12.12%)__________________________基金項目：江西省教育廳科技項目（GJJ170651），井岡山大學博士科研啟動項目（JZB1309）收稿日期：2018011

7、2作者簡介：胡文杰，男，1974年出生，博士，植物資源開發(fā)與利用3然后利用水蒸氣蒸餾提取裝置進行提取，收集揮發(fā)油，得到淺黃色油狀液體，再用無水Na2SO4脫水，稱重，油的提取率為0.64%。1.2.21.2.2GCMSGCMS色譜條件色譜條件色譜柱：Elite5MS（30m0.25mm0.25μm）；載氣：He（99.999%），流速1.0mLmin；進樣口溫度為250℃；程序升溫：初始80℃，保持2min，以8℃min升溫至250℃，

8、保持2min。進樣量0.5μL，分流比20:1。質(zhì)譜條件：EIMS，其EI離子源溫度200℃，接口溫度230℃，掃描范圍（mz）50650。1.31.3馬尾松松針揮發(fā)油抗氧化活性的測定馬尾松松針揮發(fā)油抗氧化活性的測定1.3.11.3.1DPPHDPPH自由基的清除作用自由基的清除作用參照樊梓鸞等[15]的方法（略作改動）。在以無水乙醇為溶劑的3mLDPPH溶液（0.1mmolL）中分別加入1mL不同質(zhì)量濃度（2﹑4﹑6﹑8和10mgmL

9、）的揮發(fā)油樣品，搖勻后在室溫條件下避光放置30min，于517nm波長下測定吸光值A(chǔ)；以無水乙醇代替揮發(fā)油樣液，測定吸光值A(chǔ)0。用相同濃度的抗壞血酸水溶液作為陽性對照。DPPH自由基清除率的計算公式如下：清除率=（A0A）A0100%（1）1.3.21.3.2ABTSABTS自由基的清除作用自由基的清除作用參照劉榮等[16]的方法（略作改動）。將等量的7.4mmolLABTS溶液與2.6mmolL過硫酸鉀混合，室溫下避光靜置12h，于4

10、℃冰箱備用。用無水乙醇將ABTS自由基溶液稀釋至其在734nm處吸光度為0.700.02。取不同質(zhì)量濃度（2﹑4﹑6﹑8、10mgmL）的揮發(fā)油樣品1mL于試管中，加入4.5mL的ABTS溶液，混勻，室溫下避光6min，于734nm條件下測定吸光值A(chǔ)；以無水乙醇代替揮發(fā)油樣夜，測定吸光值A(chǔ)0。用相同濃度的抗壞血酸水溶液作為陽性對照。ABTS自由基清除率的計算用式（1）。1.3.31.3.3超氧陰離子自由基的清除作用超氧陰離子自由基的清除

11、作用參照Adsare等[17]的方法（略作改動）。將1mL不同質(zhì)量濃度（2﹑4﹑6﹑8和10mgmL）的揮發(fā)油樣液分別與pH為8.2TrisHcl（50mmolL）3mL混合，25℃恒溫10min，加入1mL25℃預(yù)熱的6mmolL鄰苯三酚，迅速將其搖勻，于320nm波長下每隔30s測定其吸光值A(chǔ)；以無水乙醇代替揮發(fā)油樣品，測定其吸光值A(chǔ)0。用相同濃度的抗壞血酸水溶液作為陽性對照。超氧陰離子自由基清除率計算公式如下:清除率=（ΔA0－Δ