焦化廢水降解酚優(yōu)勢菌分離鑒定及其漆酶活性的研究.pdf

1、對焦化廢水中酚的生物降解進行了研究,以培養(yǎng)降解優(yōu)勢菌為主要研究對象,進行分離篩選、分子鑒定,并針對其產(chǎn)漆酶的特性,培養(yǎng)特定的優(yōu)勢細菌,在適宜條件下通過測定產(chǎn)生的漆酶量研究菌株的生長特性,通過生物掛膜進一步研究菌株的降解性能。實驗結(jié)論如下:
　　 1.以中煤龍華哈爾濱煤化工有限公司廢水處理系統(tǒng)中的活性污泥作為菌種主要來源,取活性污泥的菌懸液投入到酚濃度為200mg/L的溶液中,恒溫振蕩培養(yǎng),每次提高酚濃度200mg/L,至1000

2、mg/L,將馴化的菌懸液平板涂布獲得單個菌落。經(jīng)過分子鑒定為Stenotrophomonas maltophilia K279。
　　 2.固體培養(yǎng)菌株觀察其菌落特征,并取純培養(yǎng)三天的優(yōu)勢菌于載玻片進行原子力顯微鏡觀察,并用Nanoscope5.30r3sr3軟件進行單一菌株的大小測定,觀察后結(jié)果顯示,S.maltophilia K279為長66.591nm、寬59.963nm的無鞭毛、無莢膜短桿菌。在振蕩培養(yǎng)測定其24小時生長

3、曲線時,結(jié)果顯示生長曲線整體呈上升趨勢,并且在16小時以后進入一個相當穩(wěn)定的生長階段。
　　 3.通過提取此優(yōu)勢菌的漆酶,測定酚濃度、溫度和pH值對此優(yōu)勢菌漆酶活性的影響。實驗結(jié)果表明,溫度在35℃～40℃、pH在6.5～7.5的條件下菌株生長狀態(tài)佳,漆酶活性較高。
　　 4.分別在4h,8h,16h,20h,24h時測定其活性。當反應(yīng)8h時S.maltophilia K279產(chǎn)漆酶的活性最低,隨后隨著反應(yīng)時間的增加漆酶

4、活性逐漸升高,在24小時漆酶的活性達到峰值。
　　 5.取優(yōu)勢菌分別在陶粒、活性炭、聚乙烯多孔填料下進行掛膜培養(yǎng),掛膜材料經(jīng)預(yù)處理后做電鏡掃描拍照,通過掛膜效果觀察到:分析其細菌固定數(shù)量、分布情況及生長狀態(tài)幾個方面的情況,三種材料上均掛膜成功并且固定了一定數(shù)量S.maltophilia K279優(yōu)勢菌。
　　 6.微生物固定化技術(shù)維持細菌較高的細胞密度,從而提高其漆酶生產(chǎn)能力,因此將由三種載體填料掛膜處理后的優(yōu)勢菌進行三

5、種不同條件的實驗測定。結(jié)果顯示,聚乙烯固定化后的細菌漆酶活性對于溫度的敏感性相對較低,最適溫度在35℃～45℃之間,并且在6.5～7.5的pH條件下S.maltophilia K279菌株的生長狀態(tài)最佳;在耐酚性能上,當酚濃度大于600mg/L時,菌株對于其的適應(yīng)均較強,酶活性較高。而在含酚量為800mg/L的濃度下,8小時后即可適應(yīng)高酚環(huán)境產(chǎn)生大量降解酚的漆酶。由此也說明較之于陶粒和活性炭兩種填料,聚乙烯更適合作為S.maltophi