棉酚分解菌的分離鑒定及其特性研究.pdf

1、棉花是新疆的主要經濟作物，資料得知，新疆地區(qū)的種植面積達到3151萬畝（2015年），農作物秸稈的產量已超出7億噸（2015年），其中棉花秸稈產量達650萬噸（2012年）。棉花秸稈是一種產量巨大，蛋白質和其他營養(yǎng)物質含量較高的可再生植物蛋白飼料資源。但由于棉花全株包含著對動物生長繁殖有潛在危害的有毒物質─游離棉酚,從而限制了棉花秸稈做原料生產青貯飼料或棉籽油加工過程中的沉淀物─棉籽油泥作為飼料添加劑方面的利用價值,造成飼料資源的浪費問

2、題。目前，在國內外降解有毒棉酚的方法有物理法，化學法和生物發(fā)酵法。雖然物理化學脫毒法對棉籽粕的解毒起到了一定作用，但處理當中也存在于成本高，營養(yǎng)物質易破壞等一些缺點。生物發(fā)酵法來降解棉酚是當前最安全，脫毒效果最好，生產成本低的脫毒方法。不僅可使棉花秸稈，棉籽油和棉籽油泥脫毒，同時可提高它們在飼料上的利用等方面有巨大的應用價值。
　　1.本研究從棉花秸稈中共分離出14種菌株，通過以醋酸棉酚為唯一碳源培養(yǎng)基平板劃線來分離篩選出6株具有

3、分解棉酚能力的菌株，編號分別為A1、A2、A4、B1、B2、B9。為了進一步篩選出具有較高的分解棉酚能力的菌株，對其進行復篩。試驗結果表明，菌株B1和B9在棉酚濃度不同的以醋酸棉酚為唯一碳源的固體平板上生長較快且好。從NA平板上菌落形態(tài)觀察結果顯示：B1菌落正反面顏色一致、圓形、邊緣不整齊、乳白色、表面有褶皺、表面濕潤、中心稍隆起、透明；B1菌體細胞長約1.27～2.30μm，桿狀、著色均勻、能夠產生橢圓形芽孢、革蘭氏陽性。B9菌落圓形

4、、淡黃色、邊緣不整齊、不透明、中間凸起如脊狀；B9菌體細胞長約1.26～2.69μm，著色均勻、長桿狀、革蘭氏陽性。根據(jù)一些形態(tài)特征初步鑒定為芽胞桿菌。利用Biolog微生物自動鑒定系統(tǒng)來對其進行鑒定，結果表明，菌株B1和B9都屬于芽胞桿菌屬，種名分別為死谷芽孢桿菌（Bacillus vallismortis）和漠海威芽孢桿菌（Bacillus mojavensis）。
　　2.利用高效液相色譜（HPLC）方法來測定棉花秸稈、棉籽

5、、棉籽餅、食用棉籽油、未加工的棉籽油和棉籽油泥中的總棉酚和游離棉酚含量。探討吐魯番本地樣品中各個棉花副產品中棉酚含量，為后續(xù)研究提供參考數(shù)據(jù)。檢驗結果顯示，棉花秸稈中總棉酚和游離棉酚含量分別為0.02％和小于0.8μg/ml，棉籽中總棉酚含量為1.66%和游離棉酚含量為5949.8 mg/kg，棉餅中總棉酚含量為0.68%和游離棉酚含量為159mg/kg，未加工棉籽油中總棉酚含量為2.50%和游離棉酚含量為8033.5 mg/kg，食用

6、棉籽油中總棉酚含量未檢出，游離棉酚含量≤0.25mg/kg，棉籽油泥中總棉酚含量為5.23%，游離棉酚含量為30796.5mg/kg。對棉籽油和棉籽油泥的脫毒效果試驗得知，菌株B1和B9在同樣的接種量和培養(yǎng)溫度下對棉籽油的脫毒效果有一定的脫毒作用，對棉籽油的脫毒率分別為21.1%和22.2%。但對棉籽油泥的脫毒不太理想，需要繼續(xù)研究。
　　3.將為探討棉酚分解菌B1和B9是否可以作為飼料添加劑，棉酚分解菌（B1、B9）與高效飼用乳