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文檔簡介
1、免疫免疫PEG1.可用來檢測CIC,特點是簡便,特異性差,易受溫度影響,PEG最終濃度為34%(分子量越大,PEG濃度越?。?;2.是最常用的細胞融合劑,分子量大約6000。3.可加速IC的形成;補體:補體:1.由肝臟或巨噬細胞產(chǎn)生。(抗原刺激機體不可產(chǎn)生?。。儆讦虑虻鞍?.滅活:56℃30min。低溫不能滅活。3.補體降低:a)消耗:SLE,冷球蛋白血癥,自免性溶貧,類風(fēng)關(guān),移植排斥等;b)丟失:燒傷,失血,腎臟病變;c)合成不足:肝
2、病,營養(yǎng)不良;d)細菌感染(G尤甚),替代途徑激活(凝聚的Ig、內(nèi)毒素,菌體多糖、水解蛋白酶等可激活替代途徑);4.補體升高:感染恢復(fù)期,惡性腫瘤(C234);心梗、病毒肝炎、糖尿病、正常妊娠則升高。5.補體活化:①經(jīng)典:IC激活C1q,進一步激活C1r和C1s;激活順序,142356789;經(jīng)典途徑激活可用C1q結(jié)合試驗來檢測;②MBL:MBL結(jié)合至細菌啟動的途徑,激活物是MBL或CRP,繞過C1途徑;③旁路:C3開始。6.CH50測
3、定:檢測的是經(jīng)典途徑的溶血總活性。7.單個補體測定:①免疫溶血法:非檢測含量,而檢測活性;②免疫化學(xué)法:單向免疫擴散,火箭免疫電泳,透射比濁法,散射比濁法;8.補體結(jié)合試驗(cft):不檢測補體,而是利用補體檢測抗原抗體。不溶血為陽性。所用補體多為豚鼠血清;9.溶血反應(yīng)和補體結(jié)合試驗所用溶血素多為兔抗羊RBC抗體;溶血試驗用2個單位的溶血素;10.C1抑制分子缺陷,導(dǎo)致遺傳性血管神經(jīng)性水腫;11.C3a和C5a叫做過敏毒素,可作用于肥大
4、細胞和嗜堿性粒細胞,引起過敏反應(yīng)。12.C3b與C3b受體結(jié)合后促使B細胞活化?;蚬こ炭贵w的優(yōu)點基因工程抗體的優(yōu)點:非異源性。人鼠嵌合體指:Ig的人(C區(qū))和鼠(V區(qū))連接。白介素白介素1IL1、6刺激肝臟細胞分泌急性時相反應(yīng)蛋白;2IL2:T細胞生長因子?;罨疶細胞產(chǎn)生,促進淋巴細胞增殖??纱貰細胞分泌抗體;激活NK細胞;3IL4:可促進免疫球蛋白的類型轉(zhuǎn)換,促進IGE轉(zhuǎn)換;4IL5刺激EO增殖分化;5IL6支持漿細胞增殖分化,以及
5、B細胞雜交瘤細胞增殖;6IL8對中性粒有趨化作用;7IL410是Th2細胞分泌的細胞因子,可負調(diào)節(jié)細胞免疫應(yīng)答;IL10抑制IL2合成;細胞因子細胞因子1.多數(shù)細胞因子以單體形式存在,以非特異方式發(fā)揮作用,不受到MHC的限制。2.TGFα刺激靶細胞產(chǎn)生IL1,IL6;激活NK細胞;3.TGFβ可負調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答;4.干擾素可抑制TH0細胞向TH2細胞轉(zhuǎn)換,激活NK細胞;B細胞細胞1.B細胞:①不成熟B細胞僅表達SmIgM;②成熟B細胞表面
6、表達SmIgMSmIgD;CD21③B2是外周血中的主要B細胞。2.功能:B1主要和免疫調(diào)節(jié)、免疫病、B細胞源性腫瘤密切相關(guān);B2是體液免疫的執(zhí)行細胞。3.B1:CD51920224.B2:CD231220225.CD21可與EB病毒結(jié)合;6.B細胞到漿細胞發(fā)育發(fā)生障礙,可發(fā)生選擇性免疫缺陷癥;T細胞細胞1.Th1細胞:分泌IL2IFNγIFNβ;Th2細胞:分泌IL45610;2.全部T細胞都表達CD2;3.成熟T細胞表達CD3;4.
7、部分T細胞表達CD4CD8;SLEIgG,IgA升高較多類風(fēng)關(guān)類風(fēng)關(guān)IGM增高為主標志性抗體標志性抗體SLE:①抗Sm抗體:不與活動度相關(guān);②抗dsDNA抗體:活躍期明顯升高;DiGege綜合征:綜合征:先天性胸腺發(fā)育不良,胚胎胸腺移植治療有效。結(jié)核分枝桿菌:結(jié)核分枝桿菌:抗PPD抗體,結(jié)核菌活動的重要標志。HLA抗原抗原1.HLA分子多態(tài)性主要體現(xiàn)在多肽結(jié)合區(qū)上,而非Ig樣區(qū);2.1類分布較廣,有核細胞。淋巴、WBC表面最多。而RBC
8、、神經(jīng)細胞、滋養(yǎng)層細胞則不表達。3.2類分布較窄,主要在B細胞,單和巨噬細胞,DC及其他APC上。4.檢測淋巴細胞HLA抗原:微量淋巴細胞毒試驗。5.移植移植1①超急性排斥反應(yīng):數(shù)分鐘,數(shù)小時,長至2448小時發(fā)生;②急性排斥反應(yīng):數(shù)周——數(shù)月,免疫抑制劑治療后可緩解③亞急性排斥反應(yīng):④慢性排斥反應(yīng):數(shù)月——數(shù)年,免疫抑制劑治療后常無效;2同種異體移植:排斥反應(yīng)最主要,受者T細胞,針對移植物抗原發(fā)生免疫應(yīng)答。3移植物抗宿主反應(yīng):常見于骨
9、髓移植,骨髓中的免疫細胞攻擊受體(嚴重免疫抑制狀態(tài))。4受者對供體MHC識別,間接識別被激活的T細胞以CD4為主。原發(fā)性巨球蛋白血癥原發(fā)性巨球蛋白血癥漿細胞惡性增殖,分泌IgM增多。遺傳性血管性水腫遺傳性血管性水腫補體系統(tǒng)缺陷病,缺乏C1NH,導(dǎo)致炎癥介質(zhì)產(chǎn)生失控。普通易變型免疫缺陷普通易變型免疫缺陷B細胞功能缺陷病,信號轉(zhuǎn)導(dǎo)異常。慢性肉芽腫:慢性肉芽腫:屬于原發(fā)性吞噬細胞功能缺陷。中性粒細胞和單核細胞的調(diào)理、吞噬、殺傷能力受損。ADA
10、缺陷病缺陷病聯(lián)合免疫缺陷病,ADA下降,多見于嬰幼兒。沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng)1.免疫濁度反應(yīng):要保持抗體過量,若抗原過量則不準確;2.單向擴散:單抗結(jié)果偏低,多抗偏高;3.雙向擴散法:①可測定抗體效價;②抗體多,線靠近抗原孔;抗原多,線靠近抗體孔;免疫電泳免疫電泳1.對流免疫電泳:雙向免疫擴散電泳;2.火箭免疫電泳:單向免疫擴散電泳3.免疫電泳:定性試驗:分析成分的種類和性質(zhì)。4.免疫固定電泳:用于蛋白質(zhì)的鑒定5.交叉免疫電泳:抗原蛋白質(zhì)的定
11、量免疫散射比濁免疫散射比濁顆粒直徑如遠小于入射波長,成為Rayleigh散射?;瘜W(xué)發(fā)光化學(xué)發(fā)光1.(直接)吖啶酯類2.(催化)堿性磷酸酶標記:底物為AMPPD。3.(能量傳遞)參與氧化反應(yīng),非酶標記物,三聯(lián)吡啶釕;4.辣根過氧化物酶標記:底物為魯米諾。放免與免放放免與免放1放免標記抗原,競爭性抑制,2免放標記抗體,非競爭抑制,抗體過量。時間分辨熒光免疫測定時間分辨熒光免疫測定1.特異光信號是長壽命熒光;2.蛋白質(zhì)、激素、藥物、腫瘤標志物
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