結核病實驗室生物安全

1、結核病實驗室生物安全,自治區(qū)疾控中心結核病實驗室,什么是生物安全,生物安全是指對由現代生物技術的開發(fā)和應用過程中可能產生的負面影響，所采取的有效預防和控制措施.,保護人（實驗人員、同事、實驗室輔助人員）物品(標本和器材等) 環(huán)境(空氣、土壤、水),生物安全的目的,國家發(fā)展與改革委員會科技部建設部國家環(huán)保部國家質檢總局（中國合格評定國家認可中心）國家衛(wèi)生計生委農業(yè)部民航局其它有關部門,實驗室管理部門,國家對病原微生物實

2、行分類管理，對實驗室實行分級管理。 國家實行統(tǒng)一的實驗室生物安全標準。實驗室應當符合國家標準和要求。,基本規(guī)定,病原微生物的分類和管理,國家根據病原微生物的傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度，將病原微生物分為四類：　　第一類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現或者已經宣布消滅的微生物?！　〉诙惒≡⑸?，是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、

3、動物與動物間傳播的微生物?！　〉谝活?、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。,第三類病原微生物，是指能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。第四類病原微生物，是指在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。,結核分枝桿菌危害等級,根據衛(wèi)生部病原微生物危害等級分類，結核分枝桿菌屬于第二類，即指能夠引起人類或者動物嚴

4、重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。,實驗室的設立與管理,國家根據實驗室對病原微生物的生物安全防護水平，并依照實驗室生物安全國家標準的規(guī)定，將實驗室分為一級、二級、三級、四級。,,,BSL-1,,,BSL-2,,,BSL-3,,,,,,原則：定向氣流,設施設備,標準操作程序,個人防護裝備,管理,,,,,實驗室生物安全控制要素,結核菌是通過氣溶膠傳播,,涂片培養(yǎng)液的傾倒和轉移；高速混合含菌液體；

5、滴加、接種培養(yǎng)物；取樣器和振蕩器的使用；容器內外壓力不同時打開容器,可能產生氣溶膠的操作,實驗室儀器設備操作及其危險性,在實驗室中使用離心機、攪拌機、勻漿機、振蕩器、超聲波粉碎儀和混合儀處理含有感染性結核菌的材料時，以及打開培養(yǎng)容器；凍干和過濾也可以產生感染性氣溶膠,保證實驗室通風,保證實驗室的窗戶可以通風將含有氣溶膠的空氣與室外空氣進行交換，以排出或稀釋氣溶膠濃度。,如果實驗室進行了正確的試驗操作，那么與患者的一次不加防護的咳嗽相

6、比，在操作中產生的氣溶膠是很少的。,實驗室危險,給予口罩或面巾 教會如何較衛(wèi)生的方式咳嗽 分開的區(qū)域侯診 盡快接受相關檢查(在排隊前) 轉診到專門的結核病診斷和治療場所(機構),對結核病可疑癥狀者或結核病患者應該采?。?根據我國發(fā)布的《人間傳染的病原微生物名錄》的要求，對于結核分枝桿菌大量活菌操作須在符合生物安全三級（BSL-3）的環(huán)境中進行； 樣本檢測，包括樣本的病原菌分離純化、藥物敏感性實驗、生化鑒定、免疫學

7、實驗、PCR核酸提取、涂片、顯微觀察等初步檢測活動，可以在符合生物安全二級（BSL-2）的環(huán)境中進行。,結核分枝桿菌實驗操作要求,用于保護操作人員、處理樣品安全與環(huán)境安全的通風安全柜，柜內保持負壓狀態(tài)，適用于生物危險度等級為1、2、3的媒質的操作。Ⅱ級生物安全柜為臨床生物防護中應用最普遍的一類生物安全柜。,Ⅱ級生物安全柜,安全柜的最佳放置位置,安全柜應該放在什么地方？盡量隔離安全柜降低人流盡量離開風管出口盡量離開門和窗口,注

8、 意,,,,A,B,C,D,,,A ， B : 不可 D ，C : 建議,Installation,生物安全柜的使用,準備：在開始工作前應考慮實驗中的操作步驟和所需設備，充分做好準備工作。準備好消毒劑和處理遺撒事件的物品。盡量減少房間內的走動，保證正常氣流。前窗開至適當高度，打開安全柜的燈和風機。讓生物安全柜工作區(qū)排氣幾分鐘之后再開始工作,生物安全柜的使用,操作：消毒桌面（75%酒精，使用紫外線作為

9、表面消毒的效果不一定能完全無菌）安全柜內只放本次實驗所需的物品。所有物品離前窗至少15cm，即在隔柵之后，所有污染性的操作盡量遠離工作區(qū)域的后部。大物體之間要保持一定距離。,生物安全柜的使用,操作：干凈和被污染的物品分開放置；被污染的物品盡量不要進入干凈區(qū)域，應放置在工作區(qū)域的后部。操作時物品和手臂不要頻繁穿過前窗。操作完畢后，將物品表面用適當的消毒液擦拭后移出，用消毒液擦拭安全柜內面。,,污染區(qū),工作區(qū),清潔區(qū),,,,不要覆

10、蓋前、后、側邊的隔柵,,,操作完畢后用消毒液擦拭安全柜內面,生物安全柜內發(fā)生意外應急處理,用蘸取消毒液的紗布或紙巾覆蓋濺出物，靜置使消毒液和濺出物接觸至少15分鐘用適當的消毒液擦拭濺出物周圍表面或其他容器表面換新手套，凈化安全柜幾分鐘將污染物高壓滅菌,生物安全柜外發(fā)生意外應急處理,發(fā)生重大濺灑事故時，所有人應立即離開實驗室，待氣溶膠沉降完全后再處理。,可以在 BSC內用火焰 ?,在生物安全柜內所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中，應避免

11、使用明火。使用明火會對氣流產生影響。在對接種環(huán)進行滅菌時，可以使用微型燃燒器或電爐，而不應使用明火。,高壓滅菌器使用,負責高壓滅菌的人員應接受過良好的培訓并持證上崗。滅菌前：檢查滅菌容器的蓋子，將蓋子旋松后再放入消毒物品。容器內各種液體約裝八分滿，切勿裝滿。具有揮發(fā)性的物質，不可高壓滅菌。滅菌前務必確定水位在正常要求水位以上。,高壓滅菌器使用,滅菌過程中：隨時查看所設定溫度（121度）、壓力是否正確。（121度，30分鐘）

12、滅菌后：開門前務必確定內鍋壓力表已經歸零。滅菌器中各項物品及滅菌器本身均高溫，取出物品時應戴手套。隨時保持鍋內清潔，以延長使用年限。,個人防護裝備 (PPE),在生物安全實驗室中，這些器材和用品主要是保護實驗人員免于暴露于生物危害物質（氣溶膠、噴濺物以及意外接種等）危險的一種物理屏障。,N95是感染防護的最低標準，N95口罩非常重要，“NIOSH”認證。,,,不合格,個人防護裝置選擇原則,要求工作人員應掌握的要點必須十分了解和

13、掌握自己工作性質和特點所涉及的實驗工作需要使用個人防護裝備的類型正確的使用方法使用前應仔細檢查，不使用標志不清、破損或泄漏的防護用品,,個人防護,出實驗室前，一定要洗手！,廢棄物處理,傳染性廢棄物對實驗員和環(huán)境危險性極大.在廢棄物離開實驗室前必須高壓滅菌或去污染處理.,結核菌污染物品滅菌,結核分枝桿菌對濕熱敏感100℃煮沸5min可殺死痰中結核桿菌。121℃壓力蒸汽30min，可殺滅動物臟器、痰或培養(yǎng)基中的結核分枝桿菌。,生