組織胚胎學(xué)緒論

1、組織學(xué)與胚胎學(xué)第一章 組織學(xué)緒論,一 、研究內(nèi)容和意義組織學(xué): 是研究機(jī)體微細(xì)結(jié)構(gòu)和相關(guān)功能的科學(xué)。研究內(nèi)容:細(xì)胞、組織、器官和系統(tǒng)幾部分, 又稱顯微解剖學(xué)。,細(xì)胞（cell－C）,組織（tissue）,器官（organ）,,,系統(tǒng)（system）,,1. 細(xì)胞 C膜、C質(zhì)、C核 是人體結(jié)構(gòu)和功能的最小單位 光學(xué)顯微鏡（light microscope－LM）即可觀察到。,細(xì)胞膜細(xì)胞核細(xì)胞質(zhì),,,,卵細(xì)胞,神經(jīng)

2、C－神經(jīng)元,神經(jīng)節(jié)C、神經(jīng)膠質(zhì)C,(1)透射電鏡（EM）:觀察C內(nèi)部更細(xì)微的結(jié)構(gòu), 即超微結(jié)構(gòu)。,(2) 掃描電鏡觀察組織C的表面立體結(jié)構(gòu)。,2. 組織: 結(jié)構(gòu)相同或相似的C群及 C外基質(zhì)構(gòu)成。 四大基本組織：上皮組織結(jié)締組織肌組織神經(jīng)組織,3. 器官: 不同的組織按一定的比例、數(shù)量及方式組合成器官。系統(tǒng): 若干功能相關(guān)的器官構(gòu)成系統(tǒng)。,細(xì)胞組織器官系統(tǒng),｝,｝,組織學(xué)各

3、論,組織學(xué)總論,蘇木精-伊紅染色法蘇木精：堿性染料，使C核內(nèi)的染色質(zhì)及C質(zhì)內(nèi)的核糖體染成紫藍(lán)色。伊紅：酸性染料，C質(zhì)和C外基質(zhì)中的成分染成紅色。,最常用的組織切片染色法－HE染色,嗜堿性:對(duì)于堿性染料親和力強(qiáng)的性質(zhì)?？杀惶K木精染成紫藍(lán)色。 嗜酸性:對(duì)于酸性染料親和力強(qiáng)的性質(zhì)?？杀灰良t染成紅色。中性: 對(duì)于兩種染料親和力都不強(qiáng)的性質(zhì), HE染色著色淡。,組織結(jié)構(gòu)的嗜色性,C超微結(jié)構(gòu)模式圖,電鏡: “兩暗夾一明”,C膜:,

4、單位膜,細(xì)胞膜,1. 光學(xué)顯微鏡(光鏡)的發(fā)明Light microscope （LM)2. 細(xì)胞學(xué)說的提出和組織學(xué)的建立 3. 電子顯微鏡(電鏡)的發(fā)明和超微 結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn) Electron microscope（EM）4. 當(dāng)代組織學(xué),二. 組織學(xué)的發(fā)展簡史和當(dāng)代組織學(xué),1. 對(duì)組織學(xué)內(nèi)容的審視角度2. 注意形態(tài)與功能的統(tǒng)一3. 注意培養(yǎng)觀察與空間思維 的能力,三.組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法,(一)

5、光鏡技術(shù) 1. 石蠟切片術(shù) ①取材和固定; ②脫水和包埋; ③切片和染色; ④封片。,四.組織學(xué)技術(shù)簡介,其他切片技術(shù): 火棉膠包埋, 冰凍 切片,涂片,鋪片,磨片。其他染色法: 硝酸銀→神經(jīng)細(xì)胞(黑)。,1. 透射電鏡 電子密度高: 當(dāng)電子束投射到密 度大吸附重金屬多的結(jié)構(gòu)時(shí), 電 子被散射的多, 因此, 射落到熒

6、 光屏上的電子少而呈暗像, 電鏡 照片呈黑或深灰色, 稱為電子密 度高。反之稱為電子密度低。,(二)電鏡技術(shù),2. 掃描電鏡觀察組織C的表面立體結(jié)構(gòu)。,組織化學(xué)術(shù): 為應(yīng)用化學(xué)、物理、生物化學(xué)、免疫學(xué)或分子生物學(xué)原理和技術(shù), 與組織學(xué)技術(shù)相結(jié)合而產(chǎn)生的技術(shù), 能在組織切片定性、定位、定量地顯示某種物質(zhì)的存在與否以及分布狀態(tài)。細(xì)胞化學(xué)術(shù):前述技術(shù)用于游離細(xì)胞樣品則稱為～(cytochemistry)。,(三)組織化學(xué)

7、術(shù),1. 一般組織化學(xué)術(shù) 基本原理是在切片上添加某種試劑, 和組織 中待測反應(yīng)物發(fā)生反應(yīng), 其終產(chǎn)物或?yàn)橛猩?沉淀, 以用光鏡觀察, 或?yàn)橹亟饘俪恋硪杂秒?鏡觀察。 (1) 糖類:PAS反應(yīng), pariodic acid Schiff reaction (2) 脂類: 油紅、尼羅藍(lán)及蘇丹類染料 (3) 核酸: 福而根反應(yīng)→DNA; 甲基綠- 派若寧反應(yīng)→DNA綠色,RNA紅色。,(4

8、) 酶類: 酶組織化學(xué)術(shù)。通過顯示酶的 催化活性以表示酶的存在。2. 免疫組織化學(xué)術(shù)immunohistochemistry:是根據(jù)抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,檢 測組織中肽和蛋白質(zhì)的技術(shù)。肽和蛋白質(zhì)均具有抗原性, 當(dāng)把人或動(dòng)物的某種蛋白質(zhì)作為抗原注入另一種動(dòng)物, 其體內(nèi)則會(huì)產(chǎn)生針對(duì)該抗原的特異性抗體。將抗體從動(dòng)物血清中提出后, 與標(biāo)記物相結(jié)合, 即成為標(biāo)記抗體。,用標(biāo)記抗體與組織切片孵育, 抗體 則與組織中

9、相應(yīng)抗原特異性結(jié)合在 顯微鏡下通過觀察標(biāo)記物而獲知肽 或蛋白質(zhì)的分布部位。常用的標(biāo)記 物有熒光素, 辣根過氧化物酶、膠 體金。3. 原位雜交技術(shù)即核酸分子雜交組 織化學(xué)術(shù)。,其原理為用帶有標(biāo)記物的已知堿基序列的核酸探針，與細(xì)胞內(nèi)待測的核酸按堿基配對(duì)的原則進(jìn)行特異性原位結(jié)合，即雜交。然后，通過對(duì)標(biāo)記物的顯示和檢測而獲得待測核酸的有無及相對(duì)量。常用的標(biāo)記物有放射性核素（35S，32P，3H等）和地高辛。,(四) 放射自顯影技