組織學(xué)和胚胎學(xué)

1、組織學(xué)與胚胎學(xué) ( histology and embryology ),緒論(Introduction) 細(xì)胞(cell),組織學(xué)與胚胎學(xué)的定義和研究內(nèi)容光學(xué)顯微鏡術(shù)電子顯微鏡術(shù)組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)技術(shù),原位雜交組織學(xué)與胚胎學(xué)的學(xué)習(xí)方法細(xì)胞連接重點與小結(jié),,內(nèi)容提要,,一、組織學(xué)與胚胎學(xué)的定義和研究內(nèi)容,組織學(xué)（histology）：研究機(jī)體微細(xì)結(jié)構(gòu)及其相關(guān) 功

2、能的科學(xué)。,,研究內(nèi)容：,胚胎學(xué)（embryology）：研究機(jī)體發(fā)生、生長及其 發(fā)育機(jī)制的一門科學(xué)。,,研究內(nèi)容：,人體組織學(xué)（human organization)： 研究人體結(jié)構(gòu)（微細(xì)結(jié)構(gòu)）的自組織過程及其規(guī)律的科學(xué)。,研究內(nèi)容：,為什么學(xué)習(xí)組織學(xué)與胚胎學(xué)？,哪個是不正常的？,問題 解決方法 觀察對象太小

3、 放大（顯微鏡） 觀察對象無色，無反差 染色（HE染色） 觀察對象生化成分不同 細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué) 觀察對象是活體 培養(yǎng),,,,二、組織學(xué)與胚胎學(xué)的研究方法和技術(shù),,(一) 光鏡技術(shù) 1. 石蠟切片: 取材固定 脫水透明

4、 包埋切片 染色封片,,,,2. 冰凍切片、涂片、鋪片、磨片等,光鏡標(biāo)本制作程序,,,,,切片機(jī),,3. 組織切片染色法,,,HE染色：蘇木精（Hematoxylin）伊紅（Eosin）染色,堿性染料,將嗜堿性物質(zhì)（本身酸性）染成藍(lán)色,酸性染料,將嗜酸性物質(zhì)（本身堿性）染成紅色,,,,細(xì)胞核中的DNA和RNA、細(xì)胞質(zhì)中的RNA,細(xì)胞質(zhì)、膜性結(jié)構(gòu)（線粒體、溶酶體、滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）,,,,,嗜堿性:對于堿性染料親和力強(qiáng)的性

5、質(zhì)?？杀惶K 木精染成紫藍(lán)色。嗜酸性:對于酸性染料親和力強(qiáng)的性質(zhì)?？杀灰?紅染成紅色。中性: 對于兩種染料親和力都不強(qiáng)的性質(zhì), HE染 色著色淡。,組織結(jié)構(gòu)的嗜色性,,,,特殊染色法 ： 硝酸銀、地衣紅、甲苯胺藍(lán)染色法等活體染色： 臺盼藍(lán)活體注射,地衣紅染色示彈性纖維,甲苯胺藍(lán)染色示肥大細(xì)胞,臺盼藍(lán)活體染色示巨噬細(xì)胞,血涂片Wright染色,透射電鏡（tran

6、smission electron microscope）： 觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)掃描電鏡（scanning electron microscope)： 觀察組織或細(xì)胞表面的立體結(jié)構(gòu),（二）電子顯微鏡技術(shù),分辨率：電鏡(0.2nm)、光鏡(0.2μm),透射電鏡結(jié)構(gòu)圖,透射電鏡結(jié)構(gòu)圖,掃描電鏡結(jié)構(gòu)

7、圖,(三)組織化學(xué)技術(shù) 1．一般組織化學(xué)術(shù) 原理：化學(xué)或物理反應(yīng)原理 應(yīng)用：對組織或細(xì)胞內(nèi)某種化學(xué)成分進(jìn)行定性、 定位、定量及相關(guān)功能的研究。,PAS反應(yīng)：過碘酸-Schiff反應(yīng)(periodic acid Schiff reaction, PAS反應(yīng)）是顯示組織或細(xì)胞內(nèi)多糖的一種染色方法。,,糖類—PAS反應(yīng),肝糖原,小腸粘原顆粒,2.免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry) 技

8、術(shù)： 原理：抗原和抗體特異性結(jié)合。 應(yīng)用：檢測細(xì)胞、組織中多肽、蛋白質(zhì)等。,,（1）直接法,（2）間接法,免疫組織化學(xué)（辣根過氧化物酶標(biāo)記）示胰島B細(xì)胞呈胰島素陽性,,(四) 原位雜交技術(shù)(in site hybridization) 為核酸（DNA和RNA）組織化學(xué)術(shù)。用帶有標(biāo)記物的已知堿基順序的核酸探針，與細(xì)胞內(nèi)待測的核酸結(jié)合（雜交），從而在原位顯示該核酸。,,,（五）細(xì)胞培養(yǎng)術(shù)（cell cultu

9、re） 細(xì)胞培養(yǎng)術(shù)：是把從機(jī)體取得的細(xì)胞在體外模擬體 內(nèi)的條件下進(jìn)行培養(yǎng)的技術(shù)。 原代培養(yǎng)(primary culture)： 傳代培養(yǎng)(sub culture) ： 細(xì)胞系(cell line) ： 細(xì)胞株(cell strain) ：,超凈工作臺,培養(yǎng)箱,體外培養(yǎng)的上皮細(xì)胞在相差顯微鏡下的圖象,三、組織胚胎學(xué)學(xué)習(xí)方法要點,平面

10、與立體的關(guān)系結(jié)構(gòu)與功能相聯(lián)系靜態(tài)結(jié)構(gòu)了解動態(tài)變化縱橫聯(lián)系深化認(rèn)識,平面與立體,結(jié)構(gòu)與功能,舒張狀態(tài),收縮狀態(tài),靜態(tài)與動態(tài),綜合與比較,四、細(xì)胞（一）基本結(jié)構(gòu),（二）細(xì)胞連接 (cell junction) 1. 緊密連接 2. 中間連接 3. 橋粒 4. 縫隙連接,,緊密連接(tight junction)功能:（1）阻止大分子物質(zhì)由外部進(jìn)入細(xì)胞間隙。（2）有一定機(jī)械性的連接作用。,,功

11、能:（1）粘著和連接相鄰細(xì)胞。（2）保持細(xì)胞的形態(tài)。,2.中間連接(intermediate junction),,3.橋粒(desmosome) 是一種最牢固的細(xì)胞連接，多見于易受機(jī)械刺激或摩擦較多的部位。,,功能： （1）利于細(xì)胞之間小分子物質(zhì)和離子的交換，協(xié)調(diào)各細(xì)胞的功能。 （2）利于細(xì)胞之間傳遞電沖動。,4. 縫隙連接(gap junction),,兩種或兩種以上的細(xì)胞連接緊接連在一起，則稱為連接復(fù)