實驗一 微生物培養(yǎng)基的制備與滅菌

1、實驗一實驗一微生物培養(yǎng)基的制備與滅菌微生物培養(yǎng)基的制備與滅菌（8課時）課時）一、目的要求一、目的要求1、學習配制微生物培養(yǎng)基的一般方法和步驟。2、掌握高壓蒸汽滅菌的原理和操作方法。二、基本原理二、基本原理正確掌握培養(yǎng)基的配制方法是從事微生物學實驗工作的重要基礎(chǔ)。由于微生物種類及代謝類型的多樣性，因而用于培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基的種類也很多，它們的配方及配制方法雖各有差異，但一般培養(yǎng)基的配制程序卻大致相同，例如器皿的準備，培養(yǎng)基的配制與分裝，棉

2、塞的制作，培養(yǎng)基的滅菌，斜面與平板的制作以及培養(yǎng)基的無菌檢查等基本環(huán)節(jié)大致相同。三、實驗材料三、實驗材料1、藥品：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、瓊脂粉、1molL的NaOH和1molLHCl溶液。2、儀器及玻璃器皿：電子天平、高壓蒸汽滅菌鍋、超凈工作臺、酒精燈、移液管、試管、燒杯、量筒、三角瓶、培養(yǎng)皿和玻璃棒等。3、其他物品：藥匙、稱量紙、pH試紙、記號筆、棉花、報紙、線繩和注射器等。四、操作步驟四、操作步驟（一）玻璃器皿的洗滌玻璃器皿在使用前必

3、須用洗滌劑洗刷干凈，然后用自來水沖凈，置于烘箱中烘干后備用。（二）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配制1、培養(yǎng)基配制（1）稱量：按培養(yǎng)基配方計算出各成分的用量，然后用電子天平進行準確稱量后倒入一燒杯中。注意：注意：稱量藥品時，一定要用稱量紙而不能用濾紙。稱藥品用的藥匙不要混用，稱完藥品應(yīng)及時蓋緊瓶蓋。（2）溶解：用量筒稱量所需體積的水（根據(jù)實驗需要可用自來水或蒸餾水），D、滅菌后，趁熱將試管口端擱在一根長木條上，并調(diào)整斜度，便斜面的長度不超過試管總

4、長的12。10無菌檢查將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃溫箱中培養(yǎng)24～48h，無菌生長即可使用，或貯存于冰箱或清潔的櫥內(nèi)，備用。（三）培養(yǎng)基的滅菌培養(yǎng)基經(jīng)分裝包扎后，應(yīng)立即按配制方法規(guī)定的滅菌條件進行進行高壓蒸汽滅菌。（四）培養(yǎng)基的滅菌檢查滅菌后的培養(yǎng)基，一般需進行無菌檢查。最好取出12管（瓶），置于37℃溫箱中培養(yǎng)12天，確定無菌后方可使用。五、實驗內(nèi)容五、實驗內(nèi)容1、根據(jù)要求清洗各種玻璃器皿，并進行烘干和包扎。2、根據(jù)要求配制微生物培養(yǎng)基。

5、3、掌握用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基滅菌。4、掌握液體培養(yǎng)基、平板培養(yǎng)基和斜面培養(yǎng)基的制備。六、實驗報告六、實驗報告1、記錄本實驗配制培養(yǎng)基的名稱、數(shù)量，并圖解說明其配制過程，指明要點。2、記錄所做培養(yǎng)基的無菌檢查結(jié)果。七、實驗思考題七、實驗思考題1、為什么微生物實驗室所用的三角瓶口或試管口都要塞上棉塞才能使用？能否用木塞或棉皮塞代替？2、配制培養(yǎng)基時為什么要調(diào)節(jié)pH？3、高壓蒸汽滅菌為什么比干熱滅菌要求溫度低、時間短？4、高壓蒸汽滅菌的原