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1、實驗五實驗五水中細(xì)菌總數(shù)的檢測水中細(xì)菌總數(shù)的檢測一、一、實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?.采用標(biāo)準(zhǔn)平皿法對水樣中細(xì)菌作計數(shù)。2.掌握微生物實驗中無菌操作技術(shù)方法。二、二、實驗原理實驗原理水中細(xì)菌總數(shù)往往同水體受有機(jī)物污染的程度呈正相關(guān),它是評價水質(zhì)污染程度的一個重要指標(biāo)之一。由于重金屬及某些其他有毒物質(zhì)對細(xì)菌有殺滅或抑制作用,因此總細(xì)菌數(shù)少的水樣,并不能排除已被這些物質(zhì)所污染。試驗采用標(biāo)準(zhǔn)平皿法對水樣中細(xì)菌作計數(shù),這是一種測定水中好氧的和兼性厭氧的異
2、養(yǎng)細(xì)菌密度的方法,由于細(xì)菌在水體中能以單獨個體、成對、鏈狀,成簇或成團(tuán)的形式存在,此外沒有單獨的一種培養(yǎng)基或某一環(huán)境條件能滿足一個水樣中所有細(xì)菌的生理要求,所以由此法所得的菌落數(shù)實際上要低于被測水樣中真正存在的活細(xì)菌的數(shù)目。細(xì)菌總數(shù)是指lml水樣在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中,37C、24h培養(yǎng)后所生長的菌落數(shù)。一般規(guī)定,1ml自來水中總菌數(shù)不得超過100個。三、材料和器皿三、材料和器皿1.培養(yǎng)基:營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基牛肉膏:35g;NaCl:5g;蛋白
3、胨:10g;瓊脂:1520g;H2O:1000ml;pH:7.07.2.2.無菌采樣瓶、滅菌移液管、滅菌培養(yǎng)皿,盛有90ml及9ml滅菌蒸餾水的錐形瓶和試管。四、方法和步驟四、方法和步驟1.采集水樣。2.吸取10ml水樣(河水、污水、游泳池水或港灣水等),注入罐有90ml無菌水的三角瓶中,混勻成101稀釋液,在吸水樣前,水樣應(yīng)徹底攪動均勻。3.按10倍稀釋法將水樣稀釋成102、103、l04。4.營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(用于河水樣)倒平皿(厚度
4、約23毫米,12毫升)水平放置至固化。5.根據(jù)水樣的潔凈程度,污染嚴(yán)重者選取102、103、l04稀釋度;中等的1、本實驗為什么要選擇適當(dāng)?shù)南♂尪龋?、在本實驗操作中應(yīng)該注意什么問題?附:表1稀釋度選擇及菌落報告方式不同稀釋度的平均菌落數(shù)例次101102103兩個稀釋度菌落數(shù)之比菌落總數(shù)(個ml)報告方式(個ml)11360164201640016000或1.6x10422760295461.63775038000或3.8x104328
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