過氧化氫泡沫消毒劑的實驗研究.pdf

1、過氧化氫是一種氧化型高效消毒劑，殺菌能力強(qiáng)，殺菌譜廣，分解后無殘留毒性，近年來已經(jīng)成為開發(fā)環(huán)保型消毒劑的主要消毒劑。泡沫劑型有許多優(yōu)點，對光滑表面的附著能力強(qiáng)，藥物用量少，無需水源，節(jié)約成本，特別適合應(yīng)用于對車輛表面、地面、建筑物墻壁等物品表面的消毒。文獻(xiàn)報告，美國軍方已經(jīng)研制出過氧化氫泡沫消毒劑，主要用于化生戰(zhàn)劑的洗消，國內(nèi)則尚未見類似產(chǎn)品報道。我們在實驗室研究了一種過氧化氫泡沫消毒劑，通過泡沫生成能力及持久性測試(改良Warring

2、Blender試驗法)，篩選了各種泡沫乳化劑、泡沫穩(wěn)定劑，觀察了其與過氧化氫配伍的影響，最后通過正交設(shè)計試驗，確定了過氧化氫泡沫消毒劑最終配方，并進(jìn)一步對該過氧化氫泡沫消毒劑的殺菌規(guī)律進(jìn)行了實驗室系統(tǒng)研究。主要結(jié)果如下： 第一部分：過氧化氫泡沫消毒劑的配方篩選研究采用改良WarringBlender試驗法，觀察了三種泡沫乳化劑(十二烷基二甲基芐基氯化銨、十二烷基硫酸鈉和十二烷基苯磺酸鈉)的泡沫生成能力，及其與消毒劑配伍變化情況，

3、發(fā)現(xiàn)十二烷基二甲基芐基氯化銨的效果最好。當(dāng)十二烷基二甲基芐基氯化銨濃度為4.8％時，泡沫體積最多，并且有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。 為了提高泡沫的穩(wěn)定性，我們選擇了幾種泡沫穩(wěn)定劑(海藻酸鈉，阿拉伯膠，黃原膠等)，觀察其對配方的影響，在實驗室條件下，通過配伍變化、泡沫生成量、泡沫半衰期的觀察，發(fā)現(xiàn)阿拉伯膠的效果最好。 為確定配方中各成分的最佳比例，我們運用三因素二水平的正交設(shè)計，觀察各組方的泡沫生成量與消毒效果。

4、 應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計軟件對正交試驗中泡沫生成體積的結(jié)果進(jìn)行方差分析。方差分析總模型有統(tǒng)計學(xué)意義，P=0.0003，十二烷基二甲基芐基氯化銨(因素A)、阿拉伯膠(因素B)及A*B的交互作用有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)，過氧化氫(因素C)對泡沫生成體積無統(tǒng)計意義(p=0.8361)。因為泡沫體積越大越好，故最終配方中因素A取1水平因素B取1水平，因素C是殺菌主要成分，故按下一步的殺菌效果確定其最終用量。 采用載體浸泡定量殺菌試驗

5、，以洗脫中和濾膜抽濾法去除殘余消毒劑(0.3％卵磷脂+3％吐溫80+0.5％硫代硫酸鈉為洗脫中和液，無菌生理鹽水為抽濾液)，觀察配方對枯草桿菌黑色變種(ATCC9372)芽孢的殺滅效果，配制了含相同濃度十二烷基二甲基芐基氯化銨、阿拉伯膠及四種不同濃度的過氧化氫配方。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，配方中隨著過氧化氫含量增加，殺芽孢性能也提高。結(jié)合過氧化氫的特點及實際應(yīng)用情況，確定最終配方成分及含量為：5.07％過氧化氫，4.8％十二烷基二甲基芐基氯化銨，0.

6、3％阿拉伯膠。 新配制的過氧化氫泡沫消毒劑，為水溶性混濁液，平均pH值為4.81，通過貯存穩(wěn)定性加速試驗分析，在54℃存放14天，過氧化氫含量的下降率為3.35％。 第二部分：過氧化氫泡沫消毒劑的殺菌規(guī)律研究1、對細(xì)菌芽孢的殺滅動力學(xué)實驗測試了枯草桿菌黑色變種(ATCC9372)芽孢和炭疽桿菌(疫苗株)芽孢的殺滅動力學(xué)變化。細(xì)菌芽孢存活率的自然對數(shù)，與過氧化氫泡沫消毒劑的作用時間的曲線擬合回歸方程分別為：枯草桿菌黑色變種

7、(ATCC9372)芽孢y=-0.116478t(F=12.816，p=0.0373)；炭疽桿菌(疫苗株)芽孢y=-0.298948t(F=62.513，p=0.0156)。前者的D值(即殺滅90％細(xì)菌芽孢所需時間)為19.77min，后者為7.70min。 在10℃～40℃試驗條件下，過氧化氫泡沫消毒劑對枯草桿菌黑色變種(ATCC9372)芽孢的殺滅作用，隨著溫度的升高，也相應(yīng)提高。不同溫度下枯草桿菌黑色變種(ATCC9372

8、)芽孢存活率自然對數(shù)與作用時間的曲線擬合線性回歸方程及D值分別為：10℃時y=-0.016628t(F=10.994，p=0.0452)，D值是138.48min；20℃時y=-0.106620t(F=24.058，p=0.0162)，D值是21.60min；30℃時y=-0.241754t(F=21.569，p=0.0434)，D值是9.52min；40℃時y=-0.431613t(F=31.738，p=0.0301)，D值是5.33

9、min。不同D值的自然對數(shù)與溫度成直線回歸，y=-0.105879T+5.629824(F=25.436，p=0.0371)，其Z值(即D值增減10倍時的溫度變化)為9.44℃，溫度系數(shù)(Q10值，即溫度每增加10℃時殺滅微生物的時間變化比值)是2.88。 與單純過氧化氫的消毒效果進(jìn)行比較，還發(fā)現(xiàn)本配方中其他成分對微生物的殺滅效果具有協(xié)同增效作用，對枯草桿菌黑色變種芽孢的殺滅協(xié)同系數(shù)為4.13。 2、對白色念珠菌、細(xì)菌繁

10、殖體和噬菌體的殺滅規(guī)律殺滅白色念珠菌(ATCC10231)時，33.3％過氧化氫泡沫消毒劑作用1min，25％消毒劑作用3min，殺滅率均大于99.9％；濃度系數(shù)(n值)為1.9095。 殺滅金黃色葡萄球菌(ATCC6538)時，10％過氧化氫泡沫消毒劑作用5min，5％消毒劑作用10min，殺滅率均大于99.9％；濃度系數(shù)(n值)為0.8548。 殺滅大腸桿菌(8099)時，5％過氧化氫泡沫消毒劑作用1min，2.5％

11、消毒劑作用3min，殺滅率均大于99.9％；濃度系數(shù)(n值)為0.90317。 殺滅f2噬菌體時，有機(jī)物的存在對殺滅效果的影響很大。對營養(yǎng)肉湯(TSB)稀釋制備的噬菌體，消毒劑原液作用60min殺滅率為99.96％；對生理鹽水稀釋制備的噬菌體，消毒劑原液作用20min殺滅率即達(dá)為99.96％。 3、其它因素對消毒作用的影響實驗表明，試驗體系中有機(jī)干擾物(小牛血清)的含量變化，對過氧化氫泡沫消毒劑殺滅枯草桿菌黑色變種芽孢的