11 薄層色譜法檢驗(yàn)操作規(guī)程

1、GMP質(zhì)量管理（9）文件編號(hào)：ZLSOPTZ01101第1頁(yè)共4頁(yè)薄層色譜法檢驗(yàn)操作規(guī)程薄層色譜法檢驗(yàn)操作規(guī)程文件名：薄層色譜法檢驗(yàn)操作規(guī)程文件編號(hào)：ZLSOPTZ01101制定人：日期：年月日文件類型：工作標(biāo)準(zhǔn)審核人：日期：年月日版次：第二版批準(zhǔn)人：日期：年月日印數(shù)：共2份生效日期：年月日頒發(fā)部門：GMP辦公室分發(fā)至：質(zhì)量保證部、化驗(yàn)室1.目的：規(guī)范薄層色譜法檢驗(yàn)操作，保證檢驗(yàn)的質(zhì)量。2.適用范圍：適于本公司原料、成品檢驗(yàn)。3.責(zé)任者

2、：質(zhì)量保證部、中心化驗(yàn)室、化驗(yàn)員對(duì)本規(guī)程實(shí)施負(fù)責(zé)。4.檢驗(yàn)依據(jù)：《中國(guó)獸藥典》2010年版一部附錄。5.內(nèi)容：5.1薄層色譜法，系將供試品溶液點(diǎn)樣于薄層板上，經(jīng)展開、檢視后所得的色譜圖，與適宜的對(duì)照物按同法所得的色譜圖作對(duì)比，用于藥品的鑒別或雜質(zhì)檢查。5.2儀器與材料5.2.1薄層板：除另有規(guī)定外，玻板要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。最常用的固定相有硅膠G、硅膠GF254、硅膠H和硅膠HF254，其次有硅藻土、硅藻土G、氧化鋁、氧

3、化鋁G、微晶纖維素、微晶纖維素F254等。其顆粒大小，一般要求粒徑為5～40m。薄層涂布，一般分為無(wú)黏合劑和含黏合劑兩種。前者系將固定相直接涂布于玻板上，后者系在固定相中加入一定量的黏合劑，一般常用10%～15%煅石膏（CaSO4.2H2O在140℃加熱4小時(shí)）混勻后加水適量使用，或羧甲基纖維素鈉水GMP質(zhì)量管理（9）文件編號(hào)：ZLSOPTZ01101第3頁(yè)共4頁(yè)出為宜，一般為1.0～2.0cm。。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層板表面。5.3

4、.3展開：展開缸如需先用展開劑飽和，可在缸中加入足夠量的展開劑并在壁上貼兩條與缸一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封頂蓋，使系統(tǒng)平衡或按各品種項(xiàng)下的規(guī)定操作。將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5～1.0cm（切勿將樣點(diǎn)浸入展開劑中），待展開至規(guī)定距離（一般為10～15cm），取出薄層板，晾干，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定檢測(cè)。展開可以單向展開，即向一個(gè)方向展開，也可以進(jìn)行雙向展開，即先向一個(gè)方向展開，

5、取出，待展開劑完全揮發(fā)后，將薄層板轉(zhuǎn)動(dòng)900，再用原展開劑或另一種展開劑進(jìn)行展開；亦可多次展開。5.3.4顯色與檢視熒光薄層板可用熒光猝滅法；普通薄層板，有色物質(zhì)可直接檢視；無(wú)色物質(zhì)可用物理或化學(xué)方法檢視。物理方法是檢出斑點(diǎn)的熒光顏色及強(qiáng)度；化學(xué)方法一般用化學(xué)試劑顯色后，立即覆蓋同樣大小的玻板，檢視。5.4系統(tǒng)適用性試驗(yàn)按各品種項(xiàng)下要求對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，使斑點(diǎn)的靈敏度比移值（Rf）、和分離效能符合規(guī)定。（1）檢測(cè)靈敏度系指雜

6、質(zhì)檢查時(shí)，采用對(duì)照溶液稀釋若干倍的溶液與供試品溶液和對(duì)照溶液在規(guī)定的色譜條件下，在同一塊薄層板上點(diǎn)樣、展開、檢視，前者應(yīng)顯示清晰的斑點(diǎn)。（2）比移值（Rf）系指從基線至展開斑點(diǎn)中心的距離與從基線至展開劑前沿的距離的比值。從基線至展開斑點(diǎn)中心的距離Rf=從基線至展開劑前沿的距離可用供試品溶液主斑點(diǎn)與對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)的比移值進(jìn)行比較，或用比移值來(lái)說(shuō)明主斑點(diǎn)或雜質(zhì)斑點(diǎn)的位置。（3）分離效能鑒別時(shí)，在對(duì)照品與結(jié)構(gòu)相似的藥物的對(duì)照品制成的混合對(duì)照