姜黃素對(duì)心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制初步研究.pdf

1、目的:
　　觀察姜黃素(Curcumin,Cur)對(duì)心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其可能的機(jī)制,為其在心肌保護(hù)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　8~10周齡SPF級(jí)SD大鼠,根據(jù)隨機(jī)原則分成4組(n=10)。(1)對(duì)照組(或假手術(shù)組)、缺血-再灌注損傷模型組(I/R)、姜黃素組(Cur)干預(yù)組、抑制劑組。I/R組采用手術(shù)方法結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支45 min,再灌注120 min,以建立I/R實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。對(duì)照組僅

2、開(kāi)胸,在左冠狀動(dòng)脈前降支下穿線但不結(jié)扎,并于穿線時(shí)及46min后舌下靜脈注射生理鹽水1ml;Cur組在模型組基礎(chǔ)上結(jié)扎前及再灌注前1分鐘由舌下靜脈注射姜黃素(20mg/kg);抑制劑組:在Cur組基礎(chǔ)上同時(shí)給予0.3mg/kg LY294002。分別于心肌缺血前、缺血30min以及再灌注120min時(shí)測(cè)定左室收縮壓(LVSP)、左室舒張壓(LVEDP)、左室內(nèi)壓力變化最大上升和下降速率(±dp/dtmax)。24h后比色法測(cè)定心肌組織中

3、一氧化氮合成酶(NOS)和一氧化氮(NO)含量;TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡;Western blot檢測(cè)心肌組織中磷酸化Akt水平。
　　結(jié)果:
　　1.與缺血-再灌注前相比,I/R組大鼠再灌注120min后,LVSP和+dp/dtmax顯著降低,而LVEDP和-dp/dtmax水平升高(P<0.05);Cur干預(yù)后,與 IR組相比,LVSP、+dp/dtmax升高,而LVEDP、-dp/dtmax有所降低(P<0.05)

4、。而在Cur干預(yù)的同時(shí)給予PI3K抑制劑LY294002處理后,可顯著逆轉(zhuǎn)Cur對(duì)LVSP、+dp/dtmax以及LVEDP、-dp/dtmax的改善作用,且與I/R組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。;
　　2. I/R組NOS活性以及NO含量明顯降低。Cur干預(yù)后,與I/R組相比,NOS活性以及NO含量顯著增高(P<0.05);同時(shí)給予LY294002干預(yù)后,NOS以及NO降低至I/R組水平。
　　3. I/R組中心

5、凋亡細(xì)胞比例為(16.9±3.2)％。當(dāng)在灌注期給予Cur處理后,心肌細(xì)胞凋亡降至(9.4±2.1%),P<0.05。在Cur處理的同時(shí)給予PI3K抑制劑LY294002處理后,可顯著降低Cur對(duì)凋亡的抑制作用,其凋亡細(xì)胞比例為(17.6±2.9)%,與I/R組相比,P>0.05;
　　4.對(duì)照組心肌組織中Bax表達(dá)極低,Bcl-2呈輕度表達(dá)。I/R組大鼠心肌組織中 Bax表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組,Bax/Bcl-2比值增高。Cur

6、處理后,Bax含量明顯低于I/R組,且Bax/Bcl-2比值降低。此外,LY294002處理后,Bax和Bcl-2含量接近I/R組水平。
　　5.對(duì)照組心肌組織中磷酸化Akt呈一定表達(dá)。I/R組大鼠Akt磷酸化水平較低。Cur處理后磷酸化Akt水平顯著增高,而同時(shí)給予PI3K抑制劑Y294002處理后,Akt磷酸化水平再次降低?？侫kt在所有處理組中保持恒定。
　　結(jié)論:
　　姜黃素對(duì)大鼠缺血再灌注心肌損傷具有保護(hù)作用