硫辛酸對氧化應(yīng)激育肥豬腸道結(jié)構(gòu)和功能的調(diào)控作用.pdf

1、氧化應(yīng)激是動物機體內(nèi)氧化還原系統(tǒng)失衡的狀態(tài)，是導(dǎo)致人類和動物綜合病癥的主要原因之一。敵草快（Diquat）為氧化還原型雙吡啶除草劑，屬中等毒性化合物。 Diquat進入動物體內(nèi)后，利用分子氧產(chǎn)生氧自由基和其它活性氧（reactive oxygen species，ROS），導(dǎo)致氧化應(yīng)激。硫辛酸（lipoic acid，LA）作為一種高效的抗氧化劑可以減少ROS的產(chǎn)生，減弱DNA的氧化損傷，抑制脂質(zhì)過氧化，并能很大程度地改善體內(nèi)抗氧化防御

2、系統(tǒng)，對氧化應(yīng)激引起的疾病有顯著的緩解作用。本文研究LA對Diquat引起的氧化應(yīng)激狀態(tài)下育肥豬生長性能、血漿和腸道氧化還原狀態(tài)、腸道細胞凋亡、腸道損傷及消化功能的調(diào)控作用。選取24頭（70.64±3.61 kg）的健康大白閹公豬，按照2×2因子設(shè)計，隨機分為對照、LA、Diquat、LA+Diquat四組，每個組設(shè)6個重復(fù)，試驗期29 d。LA添加劑量為800 mg/kg飼糧，飼喂貫穿試驗全程，而一次性腹腔滴注 Diquat于試驗第1

3、5 d進行，無腹腔滴注 Diquat試豬滴注等量的生理鹽水。于試驗第29 d對所有試豬前腔靜脈采血后電擊暈懸掛屠宰取樣。
　?。?）運用試劑盒檢測血漿和腸道的抗氧化酶類指標，Western blotting檢測熱休克蛋白70（HSP70）和凋亡標志性蛋白Caspase-3的表達量。
　　試驗結(jié)果表明Diquat極顯著降低了試豬生產(chǎn)性能、血漿與腸道抗氧化能力（P<0.01），極顯著升高了腸道HSP70和Caspase-3表達量

4、（P<0.01）；飼糧中添加LA使ADFI顯著增加（P<0.05）、ADG極顯著升高（P<0.01），使育肥豬腸道MnSOD極顯著升高（P<0.01），對血漿和腸道其它抗氧化指標的影響均差異不顯著（P>0.05），使育肥豬腸道HSP70表達量顯著降低（P<0.05），Caspase-3表達量有降低的趨勢（P=0.052）；在應(yīng)激狀態(tài)下，飼糧中添加 LA使 ADFI和ADG極顯著增加（P<0.01），使育肥豬血漿SOD顯著升高（P<0.0

5、5），使育肥豬腸道SOD、MnSOD極顯著升高（P<0.01）。
　?。?）運用試劑盒檢測血漿和腸道氧化損傷標志物的含量以及空腸食糜消化酶的活性，蘇木精-伊紅（HE）染色后運用圖像分析軟件觀察腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)并測定絨毛高度、隱窩深度，并計算絨毛高度/隱窩深度（V/C）比值，熒光定量PCR法檢測閉合蛋白（Occludin）和緊密結(jié)合蛋白（zonula occludens protein-1，ZO-1）轉(zhuǎn)錄水平的相對表達量。
　　試

6、驗結(jié)果表明：Diquat極顯著升高了試豬血漿和腸道丙二醛（MDA）、蛋白質(zhì)羰基（PCO）和8-羥基鳥苷（8-OHdG）的含量（P<0.01），極顯著降低了十二指腸、空腸及回腸絨毛高度、隱窩深度（P<0.01），極顯著增大了十二指腸和空腸 V/ C（P<0.01），顯著增大了回腸 V/ C（P<0.05），極顯著降低了空腸Occludin和ZO-1 mRNA相對表達豐度（P<0.01），極顯著降低了空腸食糜中淀粉酶、胰蛋白酶以及脂肪酶的活

7、性（P<0.01）；飼糧中添加 LA對試豬血漿和腸道 MDA、 PCO和8-OHdG含量的影響均差異不顯著，對十二指腸、空腸和回腸的絨毛高度、隱窩深度以及 V/ C的影響均差異不顯著，對空腸 Occludin和ZO-1 mRNA相對表達豐度也無差異性影響，對空腸食糜中淀粉酶、胰蛋白酶以及脂肪酶活性的影響差異也均無顯著性；在應(yīng)激狀態(tài)下，飼糧中添加 LA使育肥豬血漿8-OHdG含量顯著降低（P<0.05），使育肥豬十二指腸絨毛高度、空腸絨毛

8、高度以及回腸隱窩深度顯著升高（P<0.05），空腸V/C顯著降低（P<0.05），回腸V/C極顯著降低（P<0.01），使育肥豬空腸 Occludin和 ZO-1 mRNA相對表達豐度顯著升高（P<0.05），使空腸食糜淀粉酶和胰蛋白酶的活性顯著提升（P<0.05）。
　　結(jié)論：Diquat導(dǎo)致了育肥豬嚴重的氧化應(yīng)激，并降低了育肥豬的生長性能，造成了育肥豬腸道的細胞凋亡和腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的嚴重損傷并導(dǎo)致育肥豬消化功能的減弱，而飼糧中添