瘧原蟲(chóng)顯微鏡鏡檢技術(shù)

1、瘧原蟲(chóng)顯微鏡鏡檢技術(shù),東安縣疾病預(yù)防控制中心 周永玲2011.07.10,瘧疾簡(jiǎn)介,瘧疾是一種古老的傳染病,俗稱“冷熱病”、“打擺子”、“發(fā)瘧子”、“脾寒”、“瘴氣”等，是由瘧原蟲(chóng)寄生于人體引起的傳染性寄生蟲(chóng)病。,寄生人體的四種瘧原蟲(chóng),間日瘧原蟲(chóng) [Plasmodium vivax，P.v]三日瘧原蟲(chóng)[P．Malariae,P.m]惡性瘧原蟲(chóng) [P．Falciparum,P.f]卵形瘧原蟲(chóng)[P．Ovale,P.o] 我國(guó)主要

2、是間日瘧常見(jiàn)，惡性瘧次之，三日瘧偶爾發(fā)現(xiàn)，卵形瘧已無(wú)病例報(bào)告。,鏡檢瘧原蟲(chóng)方法簡(jiǎn)述,19世紀(jì)后期，顯微鏡的出現(xiàn)使人們不斷發(fā)現(xiàn)了傳染病的病因。1880年法國(guó)軍醫(yī)拉韋朗第一次見(jiàn)到并描述了人紅細(xì)胞內(nèi)的瘧原蟲(chóng)，至此才解開(kāi)了困擾人們數(shù)千年的瘧疾的病因之謎。,鏡檢瘧原蟲(chóng)方法簡(jiǎn)述,目前用于瘧疾診斷的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)包括病原學(xué)檢查、免疫學(xué)檢測(cè)和分子生物學(xué)檢測(cè)三類。鏡檢瘧原蟲(chóng)由于具有操作簡(jiǎn)便、敏感、價(jià)廉和可鑒別蟲(chóng)種等優(yōu)點(diǎn)，廣泛用于瘧疾的病原學(xué)診斷已愈近一個(gè)世紀(jì)

3、，仍是目前最常用的方法，也是我國(guó)瘧疾診斷標(biāo)準(zhǔn)確定的實(shí)驗(yàn)室檢查方法（WS259-2006）。,鏡檢目的與意義,瘧疾診斷標(biāo)準(zhǔn)中把瘧疾病例分為疑似病例、臨床病例、確診病例和帶蟲(chóng)者，前兩者依據(jù)流行病學(xué)史和臨床表現(xiàn)即可做出診斷，而后兩者需通過(guò)發(fā)現(xiàn)病原體方能做出診斷。通過(guò)對(duì)發(fā)熱病人血檢達(dá)到確診瘧疾病例。及時(shí)發(fā)現(xiàn)傳染源和明確感染的瘧原蟲(chóng)種類，以能針對(duì)蟲(chóng)種選擇正確的治療方案。,血片鏡檢,血片制作用于檢查瘧原蟲(chóng)的血涂片有兩種：一種是將血液涂呈薄膜

4、狀，稱薄血膜。一種是血液涂成圓盤，稱厚血膜。薄血膜上的血細(xì)胞要求平輔在玻片上面。,血膜的制作（取血時(shí)間）,取血時(shí)機(jī) 現(xiàn)癥病人一般可隨時(shí)取血，瘧疾普查 時(shí)可不考慮取血時(shí)機(jī)。 在診斷或需要某期瘧原蟲(chóng)作標(biāo)本時(shí)，則應(yīng)掌握適宜的取血時(shí)機(jī)。間日瘧在寒熱發(fā)作時(shí)，外周血液中主要可見(jiàn)環(huán)狀體期；發(fā)作后數(shù)小時(shí)，環(huán)狀體發(fā)育到滋養(yǎng)體期，瘧色素形成，形態(tài)較易辯認(rèn)，為診斷的有利時(shí)機(jī)；36~48小時(shí)，可檢出裂殖體；發(fā)作一、二次后，配子體出現(xiàn)較多。惡性瘧較理想

5、的取血時(shí)間是在發(fā)作后至20小時(shí)內(nèi)取血，初發(fā)患者退熱后常查不到原蟲(chóng)。,血膜的制作（取血操作）,取血方法 采血部位一般人為耳垂，指頭，通常在耳垂取血（現(xiàn)場(chǎng)取血建議用大頭針采血，一人一針，避免血傳疾?。Ｏ扔?5%酒精棉球消毒取血部位（冬季用手捻動(dòng)耳垂使其充血后再行消毒），待酒精干后，用左手拇指和食指緊捏耳垂上方，右手持消毒針迅速刺入耳垂下端1~2毫米，不宜過(guò)深或過(guò)淺。然后用右手中指輕輕向擠壓出血。,血膜的制作（取血操作）,取血量及涂片

6、法（涂片操作）,薄血膜 取潔凈的載玻片2張，1張平置在桌上，以左手拇指，食指夾持載玻片兩端（手指切勿接觸玻片表面），用另一張邊緣平滑（最好為磨口邊緣）的載玻片做推片，用推片一端邊緣的中點(diǎn)從取血部分取約1微升的血量（相當(dāng)于1/4火柴頭大?。?，使血滴與平置的載玻片接觸，并形成25~30度夾角，待血液向兩側(cè)擴(kuò)展約2厘米長(zhǎng)度時(shí)，均勻而迅速地輕輕向左推出（約2.5厘米長(zhǎng)），整個(gè)血膜成舌形。,正確的推片姿勢(shì),取血量及涂片法（涂片操作）,厚血膜

7、 用推 片的一角，從取血部位刮取約4微升血量（相當(dāng)于火柴頭?。?，使血滴與平置的載玻片接觸，再由里向外一個(gè)方向旋轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)2~4圈，涂成直徑0.8~1厘米大小圓形厚血膜，血膜厚薄均勻，過(guò)厚易于脫落，過(guò)薄達(dá)不到檢出率的要求。,涂制厚、薄血膜的位置 通常是將厚、薄血膜涂在一張載片上。方法是將載片分為6等分，第1、2格備貼標(biāo)簽及編號(hào)用；厚血膜涂在第3格中央，薄血膜涂在第4格前緣至第6格中部。作為標(biāo)本的血片每張玻片涂厚、薄血膜各1

8、個(gè)；門診和發(fā)熱病人血片每片1人，涂2個(gè)厚血膜1個(gè)薄血膜，以防血膜脫落而影響檢查。,標(biāo)準(zhǔn)的瘧疾厚薄血膜片位置,血片的染色,一、吉氏染液母液配制 取吉氏粉0.5克置于研缽中，加少量甘油充分研磨，邊加邊磨，至25毫升加完為止，倒入60或100毫升帶有玻塞的有色玻瓶中。在研缽中加少量無(wú)水甲醇，洗去甘油濃液混入瓶?jī)?nèi)，至25毫升甲醇洗凈缽中甘油染液為止，塞緊瓶塞，充分搖勻，置于55~60℃水浴中2小時(shí)，或室溫內(nèi)3~5天，每天用力搖動(dòng)5分鐘，即

9、成原液。吉氏染液是目前較優(yōu)良的血膜染劑，即使在炎熱天氣中，亦可經(jīng)久不變。,血片的染色,二、瑞式染液的配制將瑞氏染劑粉1g置于研缽內(nèi)，加入15ml甘油充分研磨后，倒入有塞玻璃瓶中，再用500ml甲醇洗出研缽中的甘油溶液，倒入瓶中，搖勻后，置室溫下，每天搖動(dòng)5分鐘，3天后即可使用。此方法染色的時(shí)間短，但染色效果不如吉氏染液效果穩(wěn)定，又不能大量血片染色，可用于門診應(yīng)急血片用。,血片的染色,吉氏染液血片染色方法 （推薦使用此方法）先用

10、甲醇或無(wú)水酒精固定薄血膜，待干后進(jìn)行染色。在固定薄血膜后用清水對(duì)厚血膜溶脫血紅蛋白可用滴管滴水于厚血膜上，待血膜呈灰白色時(shí)，將水傾去，晾干后進(jìn)行染色。 成批血片染色：將已固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入2%吉氏染液稀釋液（2毫升原液加中性蒸餾水98毫升稀釋均勻即成），同時(shí)對(duì)厚薄血膜染色30分鐘（如染液不合標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，得酌情增減染色時(shí)間），然后用清水輕輕將染液沖去，再用清水輕輕沖洗一次，干凈后將血片標(biāo)本（血膜面朝下）插于晾干板上，待干鏡檢。

11、,血片的染色,單張血片染色：薄血膜經(jīng)固定干燥后，用2%吉氏染液稀釋液1~2毫升，滴入血片標(biāo)本上染色30分鐘左右；或用中性蒸餾水1毫升，加吉氏母液1~2滴，混合均勻后滴入血片標(biāo)本上，染色10~20分鐘，然后用清水輕輕將片上的染液沖洗干凈，（切勿先倒掉染液再用水沖洗）晾干鏡檢。,瑞氏染液的染色方法：,先用蠟筆在厚、薄血膜間劃一界限，滴幾滴蒸餾水在厚血膜上溶血。溶血后傾去水滴。在薄血膜上加瑞氏染液5～8滴，染色1～2分鐘。然后再加5～8滴蒸餾

12、水于薄血膜上，用吸管將染液與蒸餾水混合均勻后，把染液引到厚血膜上，使厚血膜再染色10分鐘。用清水輕輕沖去染液，晾干。,血片的鏡檢,在學(xué)習(xí)鏡檢瘧原蟲(chóng)之前，必須先對(duì)正常厚薄血膜中各種血細(xì)胞的形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)和染色性質(zhì)加以識(shí)別。學(xué)習(xí)鏡檢瘧原蟲(chóng)，首先要學(xué)看薄血膜，在基本上掌握薄血膜中瘧原蟲(chóng)形態(tài)后，才學(xué)習(xí)鏡檢厚血膜。鏡檢瘧原蟲(chóng)一般只查厚血膜，薄血膜僅作為原蟲(chóng)分類時(shí)參考和血片編號(hào)之用。鏡檢瘧原蟲(chóng)必須用油鏡頭配合5X低倍目鏡鏡檢，當(dāng)發(fā)現(xiàn)疑難問(wèn)題時(shí)

13、可調(diào)換10X目鏡進(jìn)行觀察。檢查時(shí)應(yīng)從厚血膜的上緣開(kāi)始，使血膜從上而下，自左至右，由右至左，一行接一行，一個(gè)視野稍疊一個(gè)視野順序地查完整個(gè)血膜。,瘧原蟲(chóng)血片檢查結(jié)果確定,檢查全部厚血膜未查見(jiàn)瘧原蟲(chóng)者判為陰性。顯微鏡下查見(jiàn)瘧原蟲(chóng)，根據(jù)瘧原蟲(chóng)形態(tài)確定惡性瘧、間日瘧、三日瘧、卵形瘧或混合感染。,制作血膜的注意事項(xiàng),1. 玻片清洗時(shí)，避免玻片碰撞、磨損。制作血膜的載玻片必須完全清潔而毫無(wú)油漬或污垢。制片時(shí)，手指只能持載片的邊緣，不能接觸玻片

14、表面，以免油污使薄血膜產(chǎn)生空白區(qū)以及厚血膜脫落。作為推片的玻片邊緣一定要平滑，才能使推出的血膜均勻一致。,制作血膜的注意事項(xiàng),2. 剛涂制的血膜要平放在標(biāo)本盒內(nèi)，厚血膜未干前勿使標(biāo)本盒傾斜，以免血膜傾向一側(cè)，造成血膜厚薄不均，厚處不溶血和著色而影響檢查結(jié)果；晾干血膜時(shí)應(yīng)注意防塵、防止蒼蠅、蟑螂等昆蟲(chóng)吮吸血膜，干后應(yīng)及時(shí)裝入標(biāo)本盒并蓋嚴(yán)，新的木制標(biāo)本盒需敞開(kāi)放置一段時(shí)間，讓木醇揮發(fā)后才能使用，以免厚血膜紅蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不

15、佳。,制作血膜的注意事項(xiàng),3. 血膜讓其自然干燥，切忌用太陽(yáng)曬或火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。夏天標(biāo)本盡可能24~48小時(shí)內(nèi)固定染色；冬天也不能超過(guò)72小時(shí)。放置時(shí)間越久，厚血膜越不易脫血，染色效果也差。若不能及時(shí)染色，薄血膜宜先用甲醇固定（1~3分鐘）然后用過(guò)濾清水對(duì)厚血膜溶血，晾干固定后裝入盒內(nèi)蓋嚴(yán)，待以后染色。,影響染色效果的因素,血片染色好壞除了與玻片是否清潔，血片制作質(zhì)量好壞等有關(guān)外，還受到以下幾個(gè)因素的影響：（1）染料

16、溶劑的質(zhì)量 染料、甲醇和甘油如果不純，常使配制的染液偏酸或偏堿而影響染色效果。因此必須用分析純的甲醇和中性甘油，而且在配制時(shí)所用的器具必須干凈而無(wú)水份。,影響染色效果的因素,（2）染液的新舊 新配制的染液因色素尚未充分溶解，染色力較弱且常呈現(xiàn)偏堿性。染液存放時(shí)間越久，染色力越強(qiáng)。通常在染液配制1~2周后才使用，盛裝染液的瓶子應(yīng)加塞蓋密。以防吸潮而影響染液質(zhì)量。,影響染色效果的因素,（3）染液稀釋后使用時(shí)間 吉氏和瑞氏染液的主要成份

17、是美藍(lán)、伊紅和由美藍(lán)氧化產(chǎn)生的天青，三者能在酒精溶液中溶解，但在水溶液中伊紅遇到美藍(lán)和天青即產(chǎn)生沉淀。因此，必須在稀釋染液當(dāng)時(shí)使用，一般在半小時(shí)內(nèi)染色力最強(qiáng)。,影響染色效果的因素,（4）染液的稀釋濃度 染液的濃度高其著色就快而深，從而瘧原蟲(chóng)寄生紅細(xì)胞的薛氏點(diǎn)粗大顯著，但顏色常偏堿；染液濃度過(guò)低則染色時(shí)間久，顏色偏酸，薛氏點(diǎn)不明顯或消失。（5）染色時(shí)間 染色時(shí)間長(zhǎng)染色效果好，反之較差。室溫高則著色快，染色時(shí)間可略縮短，氣溫低可適當(dāng)延

18、長(zhǎng)。因此染色時(shí)間應(yīng)根據(jù)染液的質(zhì)量、新舊、稀釋濃度和氣溫而適當(dāng)增減。,影響染色效果的因素,（6）染色用水 染液的稀釋用水和染色后沖洗用水應(yīng)選擇Ph7.0~7.2清潔水，通常使用的新鮮的蒸餾水或過(guò)濾的冷開(kāi)水，以及自來(lái)水、井水、河水、泉水和雨水等。如果偏酸或偏堿，可用緩沖蒸餾水調(diào)整。染色后發(fā)現(xiàn)血膜顏色偏藍(lán)（偏堿）或偏紅（偏酸）時(shí)，可用與之相反的酸、堿度水沖洗血片予以糾正。,影響染色效果的因素,（7）染色后不要直接將染液倒掉，應(yīng)沿玻片或染色缸

19、邊緣加水使染液表面一層溢出，并輕輕沖洗，以免染液色素顆粒沾污血膜。,瘧原蟲(chóng)形態(tài)特征和鑒別要點(diǎn),在RBC內(nèi)發(fā)現(xiàn)瘧原蟲(chóng)是確診瘧疾和鑒別蟲(chóng)種的重要依據(jù)瘧原蟲(chóng)基本構(gòu)造相同--細(xì)胞膜、質(zhì)、核瑞氏或姬氏染色：核染成紫紅色，胞質(zhì)呈蘭色，瘧原蟲(chóng)消化血紅蛋白產(chǎn)物-瘧色素呈棕黃色瘧原蟲(chóng)在RBC內(nèi)各期形態(tài)各不相同,瘧原蟲(chóng)在RBC內(nèi)的形態(tài)（三期六種形態(tài)）,滋養(yǎng)體期：大、小滋養(yǎng)體裂殖體期：成熟、未成熟裂殖體配子體期：雌、雄配子體,人體瘧原蟲(chóng)的基本結(jié)構(gòu)

20、,瘧原蟲(chóng)基本構(gòu)造為 細(xì)胞質(zhì)（胞漿）、核和瘧色素。 1.細(xì)胞漿 被染成蔚藍(lán)色或深藍(lán)色，隨著蟲(chóng)體發(fā)育長(zhǎng)大，細(xì)胞漿逐漸增多。間日瘧原蟲(chóng)發(fā)育到大滋養(yǎng)體階段，胞漿呈阿米巴樣活動(dòng)，胞漿內(nèi)有空泡。,2. 核 即細(xì)胞核或染色質(zhì)粒。在正常情況下核呈鮮紅色，呈圓形或不規(guī)則的顆粒狀。核的結(jié)構(gòu)致密，只有在個(gè)別發(fā)育階段較為疏松，例如間日瘧原蟲(chóng)雄配子體的核。有時(shí)因胞漿厚密或染色深藍(lán)，使核呈暗紅或紫紅色。3. 瘧色素

21、不著色，顏色和顆粒的形狀，因瘧原蟲(chóng)種類而異。間日瘧原蟲(chóng)的色素顆粒呈短棒狀，黃褐色；惡性瘧原蟲(chóng)的色素顆粒呈細(xì)砂狀，黑褐色；三日瘧原蟲(chóng)的色素呈砂粒狀，深褐色；卵形瘧原蟲(chóng)的色素與間日瘧原蟲(chóng)相似。瘧色素在蟲(chóng)體內(nèi)散在分布或聚集成團(tuán)塊。,4. 被寄生的紅細(xì)胞 被間日瘧原蟲(chóng)寄生的紅細(xì)胞脹大、顏色變淡。瘧原蟲(chóng)發(fā)育至阿米巴樣體，紅細(xì)胞出現(xiàn)薛氏點(diǎn)。 被惡性瘧原蟲(chóng)寄生的紅細(xì)胞大小正?；蛏晕⒖s小，紅細(xì)胞上有時(shí)見(jiàn)到茂氏點(diǎn)。 被三日瘧原蟲(chóng)寄生的紅細(xì)胞大小正

22、常，紅細(xì)胞上可見(jiàn)到齊氏點(diǎn)。 被卵形瘧原蟲(chóng)寄生的紅細(xì)胞稍脹大或不脹大，呈卵形或一端呈傘矢狀，薛氏點(diǎn)出現(xiàn)較早，于環(huán)狀體階段便可查見(jiàn)。,,,,,,瘧原蟲(chóng)薄血膜形態(tài)鑒別,（吉氏染色）,,,間日瘧小滋養(yǎng)體--環(huán)狀體,較大，約占寄生紅細(xì)胞的1/3，胞漿較薄，一個(gè)核，很少見(jiàn)到一個(gè)紅細(xì)胞寄生2個(gè)環(huán)狀體和一個(gè)環(huán)狀體有2個(gè)核。,間日瘧滋養(yǎng)體-大滋養(yǎng)體,經(jīng)8～10小時(shí)，蟲(chóng)體增大，胞質(zhì)增多，伸出偽足，阿米巴樣，常含空泡。出現(xiàn)黃褐色的瘧色素，細(xì)小、桿狀，散

23、在分布。紅細(xì)胞脹大，變形，顏色變淡，并出現(xiàn)數(shù)量較多，淡紅色的小點(diǎn)，稱薛氏小點(diǎn),,間日瘧-裂殖體,,未成熟裂殖體經(jīng)40小時(shí)晚期滋養(yǎng)體發(fā)育成熟，蟲(chóng)體變圓，空泡消失，核分成2個(gè)以上。核開(kāi)始分裂又稱裂殖體前期色素聚集成團(tuán)塊,間日瘧成熟裂殖體,成熟裂殖子約有12－24個(gè)，通常16個(gè)，排列不規(guī)則。受染RBC 脹大、顏色蒼白、蟲(chóng)體幾乎充滿紅細(xì)胞瘧色素集中成堆，常聚集一側(cè)。,配子體,瘧原蟲(chóng)經(jīng)過(guò)幾次紅細(xì)胞內(nèi)裂體增殖，部分裂殖子在紅細(xì)胞內(nèi)不

24、再進(jìn)行裂體增殖，而發(fā)育為雌性配子體或雄性配子體，間日瘧原蟲(chóng)配子體呈圓形或橢圓形，瘧色素均勻分布于蟲(chóng)體內(nèi)，核1個(gè)。,間日瘧原蟲(chóng)雌配子體,蟲(chóng)體較大，占滿脹大的紅細(xì)胞胞質(zhì)致密，色深藍(lán)核小致密，深紅色，多位于蟲(chóng)體一側(cè)瘧色素黃褐色，均勻散在,,間日瘧原蟲(chóng)雄配子體,蟲(chóng)體較小，圓形，占滿脹大的紅細(xì)胞胞質(zhì)淺藍(lán)核大疏松，淡紅色，多位于蟲(chóng)體的中央。瘧色素黃褐色，均勻散在,惡性瘧原蟲(chóng)--環(huán)狀體,環(huán)纖細(xì),約為RBC直徑的1/6，RBC不脹大，顏色稍

25、紫或正常核1個(gè)或2個(gè)，紅細(xì)胞常含2個(gè)以上原蟲(chóng)蟲(chóng)體常位于紅細(xì)胞的邊緣 ，呈“鳥(niǎo)飛狀”不帶色素,惡性瘧原蟲(chóng)—大滋養(yǎng)體,一般不出現(xiàn)在外周血蟲(chóng)體小結(jié)實(shí)，圓形，空泡不顯著，不活動(dòng)瘧色素集中一團(tuán)，黑褐色原蟲(chóng)此時(shí)開(kāi)始集中在內(nèi)臟毛細(xì)血管,惡性瘧成熟裂殖體,裂殖子8～26個(gè)，通常8～18個(gè)，排列不規(guī)則瘧色素集中成一團(tuán)，黑褐色蟲(chóng)體占紅細(xì)胞體積的2/3至3/4,惡性瘧原蟲(chóng)雌配子體,新月形，兩端較尖核1個(gè)，較小，致密，深紅色，常位于中央胞漿

26、深藍(lán)色瘧色素黑褐色，緊密分布于核周圍,惡性瘧原蟲(chóng)雄配子體,臘腸形，兩端鈍圓胞漿淺藍(lán)或談紅色核1個(gè)，較大，疏松，淡紅色，位于中央瘧色素黑褐色，小桿狀，在核周圍松散分布,惡性瘧原蟲(chóng)由于在發(fā)作間歇期，絕大部分瘧原蟲(chóng)要進(jìn)入內(nèi)臟毛細(xì)血管發(fā)育，周圍血液內(nèi)僅能發(fā)現(xiàn)環(huán)狀體和配子體。因此，惡性瘧在發(fā)作期為最適宜的查血時(shí)間。 如在血膜上查見(jiàn)許多這樣的小滋養(yǎng)體而無(wú)大滋養(yǎng)體，可判定為惡性瘧原蟲(chóng)。惡性瘧原蟲(chóng)粗大環(huán)狀體與間日瘧原蟲(chóng)的環(huán)狀體相似，較難區(qū)別。

27、此時(shí)應(yīng)依據(jù)血膜上有無(wú)其他發(fā)育階段的瘧原蟲(chóng)來(lái)確定。 如果血膜上只有少數(shù)環(huán)狀體，其形態(tài)又不太典型，則應(yīng)另外取血檢查，不應(yīng)輕易下結(jié)論。,三日瘧原蟲(chóng)主要形態(tài)特征,1. 寄生的紅細(xì)胞正?；蚩s小，有淡紅色細(xì)小的齊氏點(diǎn)2.環(huán)狀體中等大小，核較大，胞漿粗厚；3.滋養(yǎng)體胞漿常呈帶狀，核呈條狀，瘧色素深褐色，粗大常沿邊緣分布；4.裂殖體小于正常紅細(xì)胞，核6～12個(gè)，常排列成菊花狀，瘧色素常聚集于中央；5.雌雄配子體小于正常紅細(xì)胞，色素呈深褐色

28、；6.常可查見(jiàn)各階段的瘧原蟲(chóng)。,卵形瘧原蟲(chóng)的主要形態(tài)特征,1. 寄生的紅細(xì)胞正常或稍脹大，可呈卵圓形或邊緣呈鋸齒（傘矢）狀，薛氏點(diǎn)出現(xiàn)較早粗大，量多； 2. 環(huán)狀體中等大小，核較大，胞漿粗厚； 3. 滋養(yǎng)體胞漿常呈圓形，空泡不明顯，瘧色素棕黃色，，粗大常沿邊緣分布； 4. 裂殖體小于正常紅細(xì)胞，核6～12個(gè)，常排列不規(guī)則，瘧色素常散在。 5. 雌雄配子體小于正常紅細(xì)胞，色素呈深褐色； 6. 常可查見(jiàn)各階段的瘧原蟲(chóng)。,薄血膜4

29、種瘧原蟲(chóng)形態(tài),,厚血膜4種瘧原蟲(chóng)形態(tài),厚、薄血膜的優(yōu)缺點(diǎn)及其適用范圍 薄血膜 用血量約為2μl，涂制成2cm寬×4cm長(zhǎng)面積的薄血膜。由于在制備過(guò)程中，血片通常經(jīng)甲醇固定，使紅細(xì)胞及其內(nèi)瘧原蟲(chóng)的形態(tài)保持完整，便于瘧原蟲(chóng)蟲(chóng)種的鑒定。惟由于用血量少，為保證檢測(cè)的敏感性，常耗時(shí)較多，似不適用于大規(guī)模調(diào)查。即使在醫(yī)院的化驗(yàn)室，由于要求在短時(shí)間內(nèi)作出診斷，因而極有可能出現(xiàn)漏診。,厚血膜用血量約為4μl。涂制成直

30、徑1cm的厚血膜由于在制備過(guò)程中紅細(xì)胞已溶解，瘧原蟲(chóng)在形態(tài)上仍可分辨，但胞漿和胞核不可避免地形成一定程度的固縮。受影響較大的有大滋養(yǎng)體、裂殖體的形態(tài)。在鏡檢厚血膜時(shí)，一般門診須檢查200~1000個(gè)油鏡視野（相當(dāng)于0.5~2.5μl血量），才能確保鏡檢的敏感性和可重復(fù)性。通常的敏感性可達(dá)約10~20個(gè)原蟲(chóng)/μl血。由于厚血膜與薄血膜相比血量大，須查范圍小，節(jié)省時(shí)間，陽(yáng)性檢出率較高。厚血膜能查出瘧原蟲(chóng)數(shù)是薄血膜的15～25倍。所以，我