實(shí)驗(yàn)二離子及藥物對(duì)離體蛙心臟活動(dòng)的影響

1、大學(xué)學(xué)生實(shí)驗(yàn)報(bào)告大學(xué)學(xué)生實(shí)驗(yàn)報(bào)告開課學(xué)院及實(shí)驗(yàn)室：開課學(xué)院及實(shí)驗(yàn)室：生科院生化樓6032015年3月1717日學(xué)院學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院年級(jí)、年級(jí)、專業(yè)、專業(yè)、班生技131姓名姓名學(xué)號(hào)學(xué)號(hào)實(shí)驗(yàn)課程名稱實(shí)驗(yàn)課程名稱動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)成績(jī)成績(jī)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)二離子及藥物對(duì)離體蛙心臟活動(dòng)的影響指導(dǎo)指導(dǎo)老師老師[實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康腯1學(xué)習(xí)離體蛙心灌流的實(shí)驗(yàn)方法。2觀察Na、K、Ca三種離子及腎上腺素、乙酰膽堿等因素對(duì)心臟活動(dòng)的影響。[實(shí)驗(yàn)原理實(shí)

2、驗(yàn)原理]1心臟的正常節(jié)律性活動(dòng)需要一個(gè)適宜的內(nèi)環(huán)境，內(nèi)環(huán)境的變化直接影響著心臟的正?；顒?dòng)。本實(shí)驗(yàn)在蛙心的灌流液內(nèi)人為地加入一些物質(zhì)而改變心臟活動(dòng)的內(nèi)環(huán)境，觀察心臟活動(dòng)有何變化。2心肌細(xì)胞的生理特征：電生理特征：自律性，興奮性，傳導(dǎo)性機(jī)械生理特征：收縮性[實(shí)驗(yàn)對(duì)象實(shí)驗(yàn)對(duì)象]青蛙[實(shí)驗(yàn)器材和藥品實(shí)驗(yàn)器材和藥品]1器材器材生物信號(hào)采集系統(tǒng)、張力換能器(10g)、蛙類手術(shù)器械1套、蛙心插管、蛙心夾、試管夾、雙凹夾、萬能支架、滴管、150ml小燒

3、杯4個(gè)、任氏液。2藥品藥品0.65％氯化鈉、2％氯化鈣、1％氯化鉀、1：10000腎上腺素、1：10000乙酰膽堿等。[實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟]1離體蛙心的制備2觀察項(xiàng)目(1)記錄心臟在僅有任氏液時(shí)的收縮曲線，觀察心率及收縮幅度，作為正常對(duì)照。(2)吸去管內(nèi)的任氏液，換以等量0.65％NacCl，觀察并記錄心跳的變化。(3)等量任氏液換洗，待心跳恢復(fù)正常后，加入5%NaCI1—2滴，記錄觀察心跳的變化。(4)等量任氏液換洗，待心跳恢復(fù)正常后，

4、加入2％CaCl21—2滴，記錄觀察心跳的變化。(5)等量任氏液換洗，待心跳恢復(fù)正常后，加入l％KCl1～2滴，記錄觀察心跳的變化。(6)等量任氏液換洗，待心跳恢復(fù)正常后，加入1：l0000腎上腺素1～2滴，記錄并觀察心跳的變化。(7)吸去管內(nèi)的任氏液，換以等量4攝氏度任氏液，觀察并記錄心跳的變化。(8)等量任氏液換洗，待心跳恢復(fù)正常后，加入2.5%NaHCO31—2滴，記錄觀察心跳的變化。因可能是因?yàn)樽鐾赈}離子對(duì)心臟活動(dòng)影響后，用任氏

5、液沖洗心臟不徹底，導(dǎo)致有鈣離子殘留，也可能是其他因素，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。6、滴加、滴加0.01%Adr0.01%Adr溶液溶液滴加腎上腺素后，蛙心收縮增強(qiáng)，心臟舒張完全，描記的心搏曲線幅度明顯增大。其作用機(jī)理是：腎上腺素可與心肌細(xì)胞膜上的B受體結(jié)合，提高心肌細(xì)胞和肌漿網(wǎng)膜Ca2通透性，導(dǎo)致肌漿中Ca2濃度增高，使心肌收縮增強(qiáng)。另外，理論上，腎上腺素還有降低肌鈣蛋白與Ca2親和力，促使肌鈣蛋白對(duì)Ca2的釋放速率增加，提高肌漿網(wǎng)膜攝取Ca2的速

6、度，刺激Na與Ca2交換，使復(fù)極期向細(xì)胞外排出Ca2的作用加速。這樣將使心肌舒張速度增快，整個(gè)舒張過程明顯增強(qiáng)。但是，所測(cè)得的心率變化減弱，可能是其他因素所造成的。7、置換置換4攝氏度任氏液攝氏度任氏液當(dāng)置換成低溫的任氏液時(shí)，細(xì)胞活性下降，導(dǎo)致其興奮性和收縮強(qiáng)度均減弱。8、滴加滴加2.5%NaHCO32.5%NaHCO3溶液溶液加入堿性溶液，可使細(xì)胞內(nèi)氫離子外逸，與胞外鉀離子進(jìn)行H—K交換，鉀離子外流減少，細(xì)胞膜電位減少。另外，堿也使細(xì)

7、胞液中鈣離子濃度降低，比如形成碳酸氫鈣沉淀，內(nèi)流的鈣離子減少，從而導(dǎo)致心肌收縮力減弱。9、滴加、滴加3%3%乳酸乳酸加入酸性溶液，加速胞外氫離子進(jìn)入胞內(nèi)，使得去極化程度加強(qiáng)，從而導(dǎo)致心肌收縮加強(qiáng)。1010、滴加、滴加0.01%Ach0.01%Ach溶液溶液滴加乙酰膽堿后，蛙心收縮減弱。其機(jī)理為：乙酰膽堿與心肌細(xì)胞膜M受體結(jié)合；一方面提高心肌細(xì)胞膜K通道的通透性，促使K外流，復(fù)極過程中K外流增加，動(dòng)作電位2、3期縮短，Ca2進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)減少

8、，使心肌收縮減弱；另一方面乙酰膽堿可直接抑制Ca2通道，減少Ca2內(nèi)流，進(jìn)而使心肌收縮減弱。1111、加、加2滴0.01%0.01%阿托品和阿托品和0.01%Ach0.01%Ach與只加乙酰膽堿相比與只加乙酰膽堿相比加了阿托品后再加乙酰膽堿的牛蛙心臟跳動(dòng)無明顯變化。因?yàn)榘⑼衅纺芘c心肌細(xì)胞膜的M膽堿受體結(jié)合，妨礙乙酰膽堿與其結(jié)合，從而起抗膽堿作用。但由于心臟本身的緣故使每次收縮的時(shí)間增加了。附：圖1開始時(shí)，心率變化圖20.65%NaCl