微生物的利用、酶的應(yīng)用復(fù)習(xí)

1、微生物的利用、酶的應(yīng)用,-2-,考點(diǎn)一大腸桿菌的培養(yǎng)和分離,液體,滅菌,培養(yǎng),-3-,涂布,倒置,-4-,1.大腸桿菌革蘭氏陰性、兼性厭氧的腸道桿菌,在腸道中一般對人無害,屬原核生物,是基因工程中被廣泛采用的工具。2.培養(yǎng)基(1)分類:按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長,可以形成肉眼可見的菌落。(2)成分:一般都含有水、碳源、氮源

2、、無機(jī)鹽和生長因子五類營養(yǎng)物質(zhì)。還需滿足不同微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)及氧氣的要求。(3)制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基。制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟:計算→稱量→溶化、調(diào)pH→滅菌→倒平板。,-5-,3.無菌技術(shù)(1)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行消毒和滅菌。(2)消毒與滅菌的區(qū)別①消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒

3、方法有煮沸消毒法,還有化學(xué)藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒等。②滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等。,-6-,(3)無菌操作要求①各種器皿必須是無菌的。②各種培養(yǎng)基必須是無菌的。③菌轉(zhuǎn)移操作的過程必須是無菌的。(4)滅菌方法①高壓蒸汽滅菌法:即用高壓蒸汽滅菌鍋在121 ℃(1 kg/cm2壓力)下滅菌15 min。②干熱滅菌法:用

4、干熱滅菌箱對耐熱器具在160 ℃維持 2 h 或170 ℃維持1 h滅菌。③酒精燈灼燒法:如接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒滅菌。酒精燈火焰上方無菌區(qū),可使菌轉(zhuǎn)移過程在無菌條件下完成。④紫外燈照射滅菌:用紫外燈照射滅菌30 min。,-7-,(5)消毒方法。①煮沸消毒法:100 ℃煮沸5~6 min可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢,可用于培養(yǎng)器皿的消毒。②巴氏消毒法:80 ℃中15 min或70~75 ℃中30 min,實(shí)際生產(chǎn)中常

5、用于鮮奶的消毒。③乙醇消毒法:70%乙醇?xì)⒕芰ψ顝?qiáng),常用于實(shí)驗(yàn)時操作者手臂的消毒。(6)含抗生素的牛奶不能發(fā)酵為酸奶的原因:牛奶發(fā)酵成酸奶是利用乳酸菌發(fā)酵來完成的。乳酸菌屬于細(xì)菌,抗生素有抑制甚至殺死細(xì)菌的作用。,-8-,4.細(xì)菌的培養(yǎng)與分離(1)細(xì)菌培養(yǎng)①用LB液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)大腸桿菌,細(xì)菌以分裂的方式繁殖,分裂速度很快,條件適宜時,約20 min可分裂一次。②如要將已有細(xì)菌培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基,一般用接種環(huán)轉(zhuǎn)移帶菌的

6、培養(yǎng)物。,-9-,(2)細(xì)菌分離①劃線分離法:用接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線操作,將聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基表面。培養(yǎng)10~20 h后,可以得到由一個細(xì)菌繁殖而來的肉眼可見的細(xì)胞群,即菌落。②稀釋涂布分離法:將菌液先進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,然后進(jìn)行培養(yǎng)。③兩種方法比較:劃線分離,方法簡單;涂布分離,單菌落更易分開,但操作復(fù)雜些。兩種方法都能將混雜在一起的微生物分離成單個細(xì)

7、胞,并能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落,以便分離和純化菌種。,-10-,5.大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)(1)實(shí)驗(yàn)?zāi)康蘑龠M(jìn)行大腸桿菌的擴(kuò)增,利用LB液體培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的操作。②進(jìn)行大腸桿菌的分離,用LB固體培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌的劃線培養(yǎng)。③說明大腸桿菌培養(yǎng)的條件和操作要求的原理。(2)實(shí)驗(yàn)步驟①滅菌:用高壓蒸汽滅菌鍋在121 ℃(1 kg/cm2壓力)下對LB液體培養(yǎng)基、LB固體培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿滅菌15 min。②倒平板:待冷卻至60

8、℃左右時,將三角瓶中的培養(yǎng)基在超凈臺上分裝至幾個培養(yǎng)皿中,制成固體培養(yǎng)基。③擴(kuò)大培養(yǎng):將大腸桿菌用接種環(huán)在無菌操作條件下接種至三角瓶中的液體培養(yǎng)基中,37 ℃搖床振蕩培養(yǎng)12 h,完成大腸桿菌培養(yǎng)。,-11-,④劃線分離:從前一步培養(yǎng)得到的菌液中獲取菌種,用接種環(huán)以劃線法接種至第二步制得的固體平面培養(yǎng)基中,在37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)12~24 h后觀察菌落。⑤菌種保存:在無菌條件下將單菌落用接種環(huán)取出,再用劃線法接種在斜面上,37 ℃培

9、養(yǎng)24 h后,置于4 ℃冰箱內(nèi)保存。⑥實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,為防止細(xì)菌污染,需要對培養(yǎng)物進(jìn)行滅菌處理。(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及相應(yīng)結(jié)論若觀察到劃線的末端出現(xiàn)不連續(xù)的單個菌落,表明菌已被分離。,-12-,例題為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}。(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是　　　　　　　

10、　　　　　　　　　;然后,將1 mL水樣稀釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為　　　　　。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時,接種環(huán)通過　　　　　滅菌,在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是　 　。,檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格,3.8×107,灼燒

11、,將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落,-13-,(3)示意圖A和B中,　　表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中　　　　　　的含量,同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高　　　　　　　的利用率。,B,溶解氧,營養(yǎng)物質(zhì),-14-,下面

12、是肺炎雙球菌離體轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的主要步驟:(1)實(shí)驗(yàn)用的器具必須是無菌的,常用　　　　　　　　法滅菌。用此法對培養(yǎng)基滅菌時,常將培養(yǎng)基裝在　　　　(器皿)中進(jìn)行。 (2)實(shí)驗(yàn)操作需在超凈工作臺上進(jìn)行。工作臺上,實(shí)驗(yàn)前一段時間需打開,實(shí)驗(yàn)中需關(guān)閉的是　　　。 A.酒精燈　　　　　B.照明燈C.過濾風(fēng)D.紫外燈,高壓蒸汽滅菌,三角瓶,D,-15-,(3)平面培養(yǎng)基與懸浮培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基相比,應(yīng)增加 　成

13、分。 (4)常用涂布法給平面培養(yǎng)基接種。下列敘述錯誤的是　　。 A.接種的目的是使細(xì)菌相互分離B.接種需過濾除去雜菌后進(jìn)行C.接種工具需灼燒后使用D.接種需在酒精燈火焰旁進(jìn)行(5)在37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)時,培養(yǎng)皿需　　　　,主要目的是避免水滴影響　　　　　的形成。 (6)培養(yǎng)后,如果觀察到菌落重疊,則在涂布法接種之前需進(jìn)行　　　操作。,凝固劑(瓊脂),B,倒置,單菌落,稀釋菌液,-16-,考

14、點(diǎn)二分離以尿素為氮源的微生物,細(xì)菌懸液,菌落,-17-,1.土樣的獲得:在有哺乳動物排泄物的地方取得。2.實(shí)驗(yàn)步驟,-18-,3.微生物兩種常用分離方法比較,-19-,例題從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌,實(shí)驗(yàn)過程如圖所示:(1)圖中物質(zhì)A為　　　　　,若要統(tǒng)計每克土壤樣品中以尿素為氮源的細(xì)菌的活菌數(shù)目,宜采用　　　　　法接種到尿素培養(yǎng)基上,對照組配制的培養(yǎng)基為　　 　培養(yǎng)基,若用同濃度的土壤稀釋液接種,實(shí)驗(yàn)組培

15、養(yǎng)皿中菌 (填“大于”“等于”或“小于”)對照組。在能利用尿素的細(xì)菌菌落周圍,有紅色環(huán)帶出現(xiàn)的原因是　 　。 (2)下列對尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是　　　滅菌。 A.高壓蒸汽　　　　　　B.紫外燈照射C.70%酒精浸泡 D.過濾,無菌水,涂布分離,LB全營養(yǎng),小于,能利用尿素的細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶將培養(yǎng)基中的尿素分解,產(chǎn)生的氨使指示劑呈紅色,D,-20-,

16、(3)下列培養(yǎng)基中,能分離出分解尿素的細(xì)菌的是　 。 A.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水B.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水、尿素C.NaCl、瓊脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物、尿素D.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物(4)欲將分離得到的以尿素為氮源的細(xì)菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),應(yīng)使用LB　　　　培養(yǎng)基。,B,液體,-21-,幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃

17、炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后,進(jìn)行分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下:請回答下列問題。(1)在配制培養(yǎng)基時,要加入尿素和酚紅指示劑,這是因?yàn)镠p含有　　　　,它能以尿素作為氮源;若有Hp,則菌落周圍會出現(xiàn)　　　色環(huán)帶。 (2)步驟X表示　　　　。在無菌條件下操作時,先將菌液稀釋,然后將菌液　　　　到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是獲得　　　菌落。,脲酶,紅,接種,涂布,單,-22-,(3)在

18、培養(yǎng)時,需將培養(yǎng)皿倒置并放在　　　　　　中。若不倒置培養(yǎng),將導(dǎo)致　　　　　　　　　。 (4)臨床上用 14C呼氣試驗(yàn)檢測人體是否感染Hp,其基本原理是Hp能將 14C標(biāo)記的　　　　分解為NH3和 14CO2。,恒溫培養(yǎng)箱,無法形成單菌落,尿素,-23-,考點(diǎn)三果汁中的果膠和果膠酶,半乳糖醛酸甲酯,甲酯,黑曲,澄清,-24-,1.果膠(1)化學(xué)組成:半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯。(2)作用:是植物細(xì)胞壁的主要成分之一。將植物

19、細(xì)胞粘合在一起。去除果膠,會使植物組織變得松散。如山楂果實(shí)中果膠含量最多,煮沸后的山楂泥可制成山楂糕。(3)特性:不溶于乙醇,這是鑒別果膠的簡易方法。2.果膠酶(1)化學(xué)成分:蛋白質(zhì)。(2)作用:果膠酶和果膠甲酯酶可把果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸,使渾濁的果汁變得澄清。(3)來源:常用黑曲霉、蘋果青霉等來生產(chǎn)果膠酶。,-25-,3.酶活性酶活性大小可用在一定條件下,酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)速率來表示。反應(yīng)速率可用單位時間內(nèi)反應(yīng)

20、物的減少量或產(chǎn)物的生成量來表示。影響酶活性的因素有溫度、酸堿度及酶抑制劑等。4.果汁中果膠和果膠酶實(shí)驗(yàn)(1)實(shí)驗(yàn)?zāi)康蘑偬骄恐谱鞴淖罴褩l件。②檢測果膠酶活性。(2)實(shí)驗(yàn)步驟、結(jié)果、結(jié)論①利用果膠酶制作果汁的實(shí)驗(yàn)步驟。第一步,制備水果勻漿:用小刀除去蘋果或山楂果實(shí)中帶種子的部分,切成塊后,放入勻漿機(jī)中,再加入少量水制成勻漿。,-26-,第二步,設(shè)置對照組:取A、B兩燒杯,各加入5 g勻漿液,A加入10 mL黑曲霉的提取液或

21、果膠酶溶液,B加入10 mL 水,間歇攪拌20~30 min。②實(shí)驗(yàn)結(jié)果:A組澄清度高,B組澄清度低。③實(shí)驗(yàn)結(jié)論:果膠酶能水解果膠,使渾濁的果汁變澄清。④探究利用果膠酶制作果汁的最佳條件的實(shí)驗(yàn)步驟(緊接上面第二步)。第三步,取4支試管,編號1~4號。將A燒杯中混合物分別放入1號和2號試管中,將B燒杯中混合物分別放入3號和4號試管中,每支均放入4 mL。第四步,將1號和3號試管放在沸水浴或酒精燈上加熱,2號和4號試管不加熱,觀察

22、。第五步,再向上述4支試管中各加入95%的乙醇4 mL,觀察。,果汁中的果膠和果膠酶,1和4沒法比較，是不同的變量,最澄清,最渾濁,？,？,加熱的目的？,我們看到的渾濁不是果膠而是果渣，果膠是透明的。由于果膠的存在溶液粘度較高，果渣不容易析出，因此果汁會渾濁。 加果膠酶是降解果膠，加酒精是析出果膠，果膠少了溶液粘度下降，果渣析出，果汁澄清。 加熱直接使溶液的粘度降低，使果汁澄清。,-29-

23、,果膠是植物細(xì)胞細(xì)胞壁及胞間層的主要組成成分之一。果膠酶能夠水解果膠,瓦解植物細(xì)胞的細(xì)胞壁及胞間層。在果汁生產(chǎn)中應(yīng)用果膠酶可以提高出汁率和澄清度。請你幫助完成以下有關(guān)果膠酶和果汁生產(chǎn)的實(shí)驗(yàn)課題。實(shí)驗(yàn)用具和材料:磨漿機(jī)、燒杯、試管、量筒、刀片、玻璃棒、漏斗、紗布等;蘋果、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的果膠酶溶液、蒸餾水等。Ⅰ.驗(yàn)證果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用,實(shí)驗(yàn)方法及步驟:(1)將蘋果洗凈去皮,用磨漿機(jī)制成蘋果泥,加入適量蒸餾水備用。(2)取兩個

24、100 mL潔凈的燒杯,編號為1、2號,按相應(yīng)程序進(jìn)行操作,請把表中未填寫的內(nèi)容填上。,-30-,(3)取出兩個燒杯,同時進(jìn)行過濾。一定時間后,觀察(或比較)　　　　　　　　 和　　　　　　　,并記錄結(jié)果。 (4)最可能得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論:　 。,注入果膠酶溶液,濾出的果汁體積,果汁澄清度,相同時間內(nèi),1號燒杯中濾出果汁體

25、積比2號燒杯多,且澄清度高,說明果膠酶對果膠的水解有催化作用,-31-,Ⅱ.探究果膠酶催化果膠水解的最適pH本課題實(shí)驗(yàn)步驟中,在進(jìn)行果膠酶溶液和蘋果泥的混合并調(diào)整pH時有下面兩種操作:方法一:將試管中的果膠酶溶液和燒杯中的蘋果泥相混合,再把混合液的pH分別調(diào)至4、5、6、7、8、9、10。方法二:將試管中的果膠酶溶液和燒杯中的蘋果泥的pH分別調(diào)至4、5、6、7、8、9、10,再把pH相等的果膠酶溶液和蘋果泥相混合。,-32-,(1

26、)請問上述哪一種操作更科學(xué):　　　　　　。并說明理由:　　　　　　　。 (2)如果用曲線圖的方式記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果,在現(xiàn)有的條件下,當(dāng)橫坐標(biāo)表示pH,縱坐標(biāo)表示　　　　　　　,實(shí)驗(yàn)的操作和記錄是比較切實(shí)可行的。根據(jù)你對酶特性的了解,在圖中選擇一個最可能是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的曲線圖:　　　　。,方法二,方法二的操作能確保酶的反應(yīng)環(huán)境從一開始便達(dá)到實(shí)驗(yàn)的預(yù)設(shè)pH,果汁體積,甲,-33-,工業(yè)生產(chǎn)果汁時,常常利用果膠酶破除果肉細(xì)胞壁以提高出汁率。

27、為研究溫度對果膠酶活性的影響,某學(xué)生設(shè)計了如下實(shí)驗(yàn):①將果膠酶與蘋果泥分裝于不同試管,在10 ℃水浴中恒溫處理10 min(如圖A)。②將步驟①處理后的果膠酶和蘋果泥混合,再次在10 ℃水浴中恒溫處理10 min(如圖B)。③將步驟②處理后的混合物過濾,收集濾液,測量果汁量(如圖C)。,-34-,④在不同溫度條件下重復(fù)以上實(shí)驗(yàn)步驟,并記錄果汁量,結(jié)果如下表:根據(jù)上述實(shí)驗(yàn),請分析并回答下列問題。(1)果膠酶能破除細(xì)胞壁,是

28、因?yàn)楣z酶可以促進(jìn)細(xì)胞壁中果膠的水解,產(chǎn)物是　　　　　　　。 (2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)溫度為　　　　左右時,果汁量最多,此時果膠酶的活性　　　　。 (3)為什么該實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蛲ㄟ^測定濾出的蘋果汁的體積大小來判斷果膠酶活性的高低?　　　　。,半乳糖醛酸,40 ℃,最高,果膠酶將果膠分解,破壞了植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和胞間層,使榨取果汁更容易,而且大量的果膠被分解也會增加果汁的量。因此蘋果汁的體積大小反映了果膠酶催化分解果膠的能

29、力,-35-,(4)果膠酶作用于一定量的某種物質(zhì)(底物),保持溫度、pH在最適值,生成物量與反應(yīng)時間的關(guān)系如下圖:在35 min后曲線變成水平是因?yàn)椤　　　　　　?#160;若增加果膠酶濃度,其他條件不變,請?jiān)谠瓐D上畫出生成物量變化的示意曲線。,底物消耗完畢,-36-,-37-,考點(diǎn)四α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測,吸附法,KI-I2,-38-,1.固定化酶(1)概念:將水溶性的酶用物理或化學(xué)的方法固定在某種介質(zhì)

30、上,使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。(2)將酶改造為固定化酶的原因。由于酶在水溶液中很不穩(wěn)定,且不利于工業(yè)化使用,所以要將酶改造成固定化酶。(3)酶固定化的方法吸附法、共價偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法等。(4)固定化酶作用的機(jī)理將酶吸附在惰性載體(如石英砂)上,制成固定化酶,并裝柱,當(dāng)?shù)孜锝?jīng)過固定化酶柱時,在酶的作用下轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物。,-39-,2.實(shí)驗(yàn)原理淀粉(遇碘顯藍(lán)色) 糊精(遇碘顯

31、紅色) 麥芽糖(遇碘不顯色) 葡萄糖3.α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用檢測的實(shí)驗(yàn)(1)實(shí)驗(yàn)?zāi)康蘑僦苽涔潭ɑ?淀粉酶。②進(jìn)行淀粉水解的測定。,-40-,(2)實(shí)驗(yàn)材料的制備①α-淀粉酶的固定化。在燒杯中將5 mg α-淀粉酶溶于4 mL蒸餾水中(由于酶不純,可能有些不溶物)。再加入5 g石英砂,不時攪拌,30 min后裝入1支下端接有氣門芯

32、并用夾子封住的注射器中(石英砂體積約4 mL)。用10倍體積蒸餾水洗滌此注射器,以除去未吸附的游離淀粉酶,流速為1 mL/min。②可溶性淀粉溶液:取50 mg可溶性淀粉溶于100 mL熱水中,攪拌均勻。③5 mmol/L KI-I2溶液:稱取0.127 g碘和0.83 g碘化鉀,加蒸餾水100 mL,完全溶解后裝入滴瓶中。,-41-,(3)實(shí)驗(yàn)步驟①淀粉溶液流經(jīng)固定化酶柱:將灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管加淀粉溶

33、液,使該溶液以0.3 mL/min的流速過柱。②接取流出物:待從固定化酶柱中流出5 mL后接收 0.5 mL 流出液。③流出物鑒定:向流出液中加入1~2滴KI-I2溶液,觀察顏色。用水稀釋1倍后再觀察顏色。④洗滌:保存固定化酶柱。實(shí)驗(yàn)后,用10倍柱體積的蒸餾水洗滌此柱,放置在4 ℃冰箱中保存。⑤幾天后取出冰箱中的該固定化酶柱,重復(fù)上述實(shí)驗(yàn),觀察結(jié)果。,-42-,(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果(5)實(shí)驗(yàn)結(jié)論固定化α-淀粉酶能將淀粉水

34、解成糊精。,-43-,下面是關(guān)于固定化酶和細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的問題。請回答下列問題。(1)某興趣小組欲利用固定化酶進(jìn)行酶解淀粉的實(shí)驗(yàn),分組見下表。將吸附了α-淀粉酶的石英砂裝入柱中后,需用蒸餾水充分洗滌固定化酶柱,以除去　　　　　　　　　　。按上表分組,將配制好的淀粉溶液加入到固定化酶柱中,然后取一定量的流出液進(jìn)行KI-I2檢測。若流出液呈紅色,表明有　　　　生成;若各組呈現(xiàn)的顏色有顯著差異,則流出液中淀粉水解產(chǎn)物濃度最高

35、的是　　　組。,未吸附的α-淀粉酶,糊精,-44-,(2)下列關(guān)于上述固定化酶實(shí)驗(yàn)的敘述,錯誤的是　　　。 A.固定化酶柱長度和淀粉溶液流速決定了酶柱中酶的含量B.淀粉溶液流速過快會導(dǎo)致流出液中含有淀粉C.各組實(shí)驗(yàn)所用的淀粉溶液濃度應(yīng)相同D.淀粉溶液的pH對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響(3)現(xiàn)有一份污水樣品,某興趣小組欲檢測其中的細(xì)菌數(shù),進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)。將一定量的污水樣品進(jìn)行濃度梯度稀釋。取適量不同稀釋度的稀釋液,用　　　　　　法分

36、別接種于固體平面培養(yǎng)基上,經(jīng)培養(yǎng)后進(jìn)行計數(shù)。該實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意,接種前,從盛有　　　　　　的容器中將玻璃刮刀取出,放在酒精燈火焰上灼燒,冷卻后待用;分組時,需用　　　　　　　　作為對照。,A,涂布分離,70%酒精,未接種的培養(yǎng)基,-45-,(4)在上述細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行計數(shù)時,應(yīng)計數(shù)的是接種了　　　　。 A.各個稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)B.合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)C.各個稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)D.合理稀釋

37、度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù),D,-46-,回答下列問題。(1)在工業(yè)生產(chǎn)中,為提高酶的使用效率和產(chǎn)品純度,一般需要將酶進(jìn)行固定化處理。利用石英砂固定α-淀粉酶的方法屬于　　　。 A.吸附法　　　　　　　B.偶聯(lián)法C.交聯(lián)法D.包埋法(2)一定濃度的淀粉溶液流經(jīng)α-淀粉酶固定化柱后,被水解成　　　　,遇碘顯　　　色。,A,糊精,紅,-47-,(3)α-淀粉酶可以通過枯草桿菌發(fā)酵生產(chǎn),以下是利用誘變育種方法培育獲得產(chǎn)生較

38、多淀粉酶的菌株的主要實(shí)驗(yàn)步驟。(原理:菌株生長過程可釋放淀粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉,在菌落周圍形成透明圈)第一步,將枯草桿菌菌株接種到　　　　培養(yǎng)基上進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。 第二步,將枯草桿菌菌株分成兩組,A組用　　　　處理,B組不處理(作對照)。 第三步,制備多個含淀粉的固體培養(yǎng)基。第四步,將A、B組分別稀釋后,分別在含淀粉的固體培養(yǎng)基上利用　　　　法分離,適宜條件下培養(yǎng)得到單菌落。 第五步,觀察A、B組