血液及血液成分的制備保存

1、臨床輸血與檢驗(yàn),血液及血液成分的制備保存,㈠血液常識－血液組成 正常人血液容量與體重密切相關(guān)，一般為體重的8-9%，其中血漿占55-60%；血細(xì)胞占40-45%。血漿中絕大多數(shù)為水分，占91-92%，其中固體成分只占8-9%；固體成分中，主要是蛋白質(zhì)，如白蛋白、球蛋白和各種凝血因子，其他為少量無機(jī)鹽類和有機(jī)物質(zhì)。血細(xì)胞則包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板。,一·血液及血液制備的概述,,㈡血液成分制備的概述 將采出來的全血，用物理方法分

2、離成體積小、純度高、臨床療效好、不良反應(yīng)少的單一血液成分的技術(shù)稱為血液成分制備。如紅細(xì)胞、血小板、血漿等的血液成分的制備。,二、全血的制備和保存,㈠全血制備 全血：將一定量的血液采集到含有保養(yǎng)液的采血袋所制成的血液制劑。即包括血細(xì)胞和血漿的所有成分。 國際上一般以450毫升全血為1單位， ★我國則以200毫升為1單位,穿刺部位的選擇 應(yīng)選擇無損傷、炎癥、皮疹、皮癬、疤痕的皮膚區(qū)域?yàn)榇┐滩课?。上肢肘部清晰可見、粗大、充盈?/p>

3、滿、彈性好、較固定、不易滑動(dòng)的靜脈； ☆常選擇的靜脈主要有肘正中靜脈、貴要靜脈等；,穿刺部位消毒 用無菌棉拭蘸取適量使用濃度消毒劑，以穿刺點(diǎn)為中心，自內(nèi)向外螺旋式旋轉(zhuǎn)涂拭，消毒面積不小于6 cm×8 cm。作用1～3 min 。宜消毒2～3遍。不應(yīng)觸摸已消毒的皮膚，不應(yīng)靠近已消毒的皮膚講話。,熱合⑴分段熱合血袋導(dǎo)管，以供交叉配血、血型復(fù)查和血液標(biāo)本保存使用。血袋應(yīng)保留注滿全血的導(dǎo)管至少20 cm。⑵ 在熱合過程中不應(yīng)用

4、力牽拉或扭轉(zhuǎn)導(dǎo)管，待焊極松開1～2秒后方可取出已封口的導(dǎo)⑶應(yīng)檢查熱合部位，如有滲漏，則重新熱合，并評估對血液無菌性的影響。⑷ 熱合分離針頭，將其放置在利器盒內(nèi)。,獻(xiàn)血后注意事項(xiàng)的告知,1、應(yīng)當(dāng)印制獻(xiàn)血后注意事項(xiàng)，并將其發(fā)給每位獻(xiàn)血者。2、獻(xiàn)血后注意事項(xiàng)主要有： 1）穿刺點(diǎn)上的敷料應(yīng)保留至少4小時(shí)； 2）多補(bǔ)充水分，食用易消化的食物和水果，避免飲酒，保證充足的睡眠； 3）獻(xiàn)血后24小時(shí)內(nèi)不劇烈運(yùn)動(dòng)

5、、高空作業(yè)和過度疲勞； 4）工作人員的聯(lián)系方式，如果存在獻(xiàn)血前沒有如實(shí)告知的可能影響血液安全的高危行為，或者獻(xiàn)血后感覺明顯不適或異常，請其及時(shí)聯(lián)系工作人員。,血液保存 全血采集后應(yīng)盡快在合適的溫度下保存血站內(nèi)采血血液應(yīng)及時(shí)儲存至4±2℃在采血車或采血屋，采出的血液要按一定條件進(jìn)行儲存和運(yùn)輸。 一般情況下，在采血后2小時(shí)內(nèi)，應(yīng)將血液快速冷卻到22±2 ℃，并在此條件運(yùn)輸。庫存血發(fā)往臨床

6、用血等處。溫度應(yīng)在2~10 ℃最長運(yùn)輸時(shí)間不應(yīng)超過24小時(shí),㈡全血的保存,⒈血液保存需要解決的問題,需解決的問題,,血液凝固,紅細(xì)胞溶血放氧能力下降,,抗凝劑,,紅細(xì)胞營養(yǎng)代謝抗溶血?jiǎng)└纳品叛醣４嫒萜?⑴血液抗凝劑,,枸櫞酸鈉,肝素,EDTA·2Na,原理,Ca,抗凝血酶Ⅲ,Ca,應(yīng)用,實(shí)驗(yàn)室檢測血液標(biāo)本的抗凝及外科體外循環(huán)手術(shù)的抗凝,全血及血液成分保存的抗凝劑,實(shí)驗(yàn)室檢測血液標(biāo)本的抗凝,⑴血液抗凝劑,枸櫞酸鈉,肝素,

7、EDTA·2Na,原理,Ca,抗凝血酶Ⅲ,Ca,應(yīng)用,實(shí)驗(yàn)室檢測血液標(biāo)本的抗凝及外科體外循環(huán)手術(shù)的抗凝,全血及血液成分保存的抗凝劑,,葡萄糖的在血液中濃度應(yīng)為0.5%~l%，以0.5%為宜,葡萄糖用于維持紅細(xì)胞代謝，氧化功能，延長紅細(xì)胞的保存時(shí)間。 枸櫞酸可防止高壓滅菌葡萄糖的氧化反應(yīng),⑵提供紅細(xì)胞的能量代謝葡萄糖,枸櫞酸,+,枸櫞酸鈉,+,葡萄糖,,,提高ATP水平和活性的另一辦法就是在保存液中加入少量腺嘌呤，可以促

8、進(jìn)ATP的生物合成，有利于紅細(xì)胞活性的維持。,腺嘌呤,,,磷酸腺苷（AMP）,,磷酸化,ATP,,⑶提供紅細(xì)胞的能量代謝--腺嘌呤,目前國際上使用較多的是甘露醇，它的用量很小，一般在1％以下。,⑷抗溶血?jiǎng)?,,血液保存液,,ACD保養(yǎng)液（枸櫞酸鹽-葡萄糖-枸櫞酸）pH5.03 21天,CPD保養(yǎng)液（枸櫞酸鹽-葡萄糖-枸櫞酸-磷酸鹽） pH5.63 21天,CPDA保養(yǎng)液(枸櫞酸鹽-葡萄糖-枸櫞酸-磷酸鹽-腺嘌呤)pH5.6

9、3 35天,加入磷酸鹽,加入腺嘌呤,,,可提高PH使2,3-DPG下降速度減慢,可以促進(jìn)ATP的合成，利于紅細(xì)胞活性的維持,表1 各種血液保存液配方成分,全血保存溫度控制在4℃±2℃保存液CPD CPDA-1 1.血小板4℃保存24小時(shí)喪失50%活性,保存48小時(shí)更為顯著，72小時(shí)雖形態(tài)正常但已失去止血功能;2.中性粒細(xì)胞4℃保存4--8小時(shí)喪失大部分功能,24小時(shí)喪失全部功能;3.Ⅷ因子4℃保存24小時(shí)活

10、性喪失50%。因子Ⅴ保存3天喪失活性可達(dá)50% 全血并不全，因此國內(nèi)外把全血作為制備各種血液成分的原料。,,⒉全血的保存特點(diǎn),三、血液成分的分離制備,㈠原理 血液成分制備的原則是采用手工或血細(xì)胞分離機(jī)方法將全血中的各種血液成分制備成體積小，濃度高，純度好的統(tǒng)一規(guī)格的有效治療成分。,人體血液經(jīng)過抗凝處理后稱為全血，全血離心后主要分為三層，自上而下依次為血漿層、白膜層和紅細(xì)胞層。 血漿層主要包含血漿、水、蛋白

11、質(zhì)、鹽類和各種離子等； 白膜層主要包括富含血小板區(qū)、富含淋巴細(xì)胞區(qū)、富含單核細(xì)胞區(qū)和富含粒細(xì)胞區(qū)，這些有形細(xì)胞比重接近，因此聚集在白膜層； 紅細(xì)胞層可簡單分為年輕紅細(xì)胞和正常紅細(xì)胞，由于二者處于紅細(xì)胞的不同生長時(shí)期，因此比重略有差別。,根據(jù)全血離心后分層的原理，利用各種血液成分相對密度、體積等不同，通過離心、過濾的方法可以將各層中不同的血液成分分離、制備成成分血，這樣就可以合理利用血液資源，滿足患者對不同成分血的

12、需求，提高治療效果。,㈡手工法制備 手工法制備血液成分主要是用單袋或多聯(lián)袋采集血液，置于大容量冷凍離心機(jī)內(nèi)離心，在無菌條件下進(jìn)行分漿，獲得不同的成分。,1. 應(yīng)用塑料聯(lián)袋采集血液，使血液成分可以在密閉無菌的條件下進(jìn)行分離。 血袋依照用途不同，可分為單聯(lián)袋、二聯(lián)袋、三聯(lián)袋、四聯(lián)袋以及雙二聯(lián)袋等。這些是用三通管并聯(lián)起來，其規(guī)格分為采血200-400ml 不等。另一種是上下串聯(lián)起來的多聯(lián)袋，稱為底-頂式血袋。在我國很

13、少使用。,2.根據(jù)血液成分的不同比重，選擇不同的相對離心力進(jìn)行離心，分離出不同的成分,3.血液成分手工制備的注意事項(xiàng),★制備新鮮冰凍血漿時(shí)，保養(yǎng)液為CPD CP2D CPDA-1的血液應(yīng)該在8小時(shí)之內(nèi)分離并速凍 ★保養(yǎng)液為ACD的血液應(yīng)在6小時(shí)之內(nèi)分離并速凍,第二節(jié) 紅細(xì)胞的制備和保存,紅細(xì)胞制劑是由全血去除部分血漿制備而成。 從200ML全血制備的各種紅細(xì)胞制品為1U,一、濃縮紅細(xì)胞,㈠概念 濃

14、縮紅細(xì)胞也稱為壓積紅細(xì)胞或少漿血，是將采集的全血大部分的血漿在全封閉的條件下分離后剩余的部分所制成的紅細(xì)胞成分血。可以在全血有效保存期內(nèi)任何時(shí)間分離出部分血漿制備而成，一般用二聯(lián)袋采集的全血制備濃縮紅細(xì)胞,㈡制備（1）用二聯(lián)袋采集1單位或2單位全血于主袋內(nèi)；（2）將全血在4℃±2℃離心，離心3400×g, 離心7分鐘，沉淀紅細(xì)胞；（3）取出離心后全血，將部分血漿分入空的轉(zhuǎn)移袋內(nèi)；（4）用熱合機(jī)切斷塑料袋間的

15、連接管，制備成濃縮紅細(xì)胞。,㈢濃縮紅細(xì)胞的保存保存在4℃±2℃保存液CPD ACD-B保存期21天 CPDA-1 保存液為35天,二、懸浮紅細(xì)胞,㈠概念 懸浮紅細(xì)胞又稱添加劑紅細(xì)胞，將全血中的大部分（90%）血漿在全封閉的條件下分離后并向剩余物中加入紅細(xì)胞添加液制成的紅細(xì)胞成分,㈡制備,⒈單袋制備法 用單個(gè)塑料袋采集血液，離心后在無菌條件下與空塑料袋相連接，把上層血漿分離移入空

16、袋，將等量的保存液加入紅細(xì)胞內(nèi)充分混勻。單袋制備方法要求嚴(yán)格的制備環(huán)境，整體環(huán)境達(dá)萬級凈化，局部操作空間達(dá)百級凈化。,⒉聯(lián)袋制備法,全血采集于多聯(lián)袋的主袋內(nèi)，與抗凝劑充分混勻后，在6～8小時(shí)內(nèi)制備。1）采血后的多聯(lián)袋在大容量冷凍離心機(jī)內(nèi)離心，離心力一般為3400×g，溫度控制在4℃±2℃，離心7分鐘；2）輕輕取出離心后的血袋懸掛于分離支架上或放于分漿夾內(nèi)，將上層不含血細(xì)胞的血漿分入空的轉(zhuǎn)移袋內(nèi)。注意不可把血細(xì)胞分

17、入血漿中；3）把多聯(lián)袋末袋中的保存液加入主袋濃縮紅細(xì)胞內(nèi)，使紅細(xì)胞與保養(yǎng)液充分混勻，血細(xì)胞比容為0.50-0.65；4）用高頻熱合機(jī)切斷塑料袋間的連接管，封閉紅細(xì)胞袋上的所有管道，制成懸浮紅細(xì)胞。,㈢保存⒈保存在4℃±2℃保存液⒉紅細(xì)胞添加液SAG(生理鹽水-腺嘌呤-葡萄糖)SAGM(生理鹽水-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇） MAP(甘露醇-腺嘌呤-磷酸鹽)可保存35天AS-1 AS-3 AS-5可保存42天,三、

18、少白細(xì)胞的紅細(xì)胞,㈠概念 濃縮少白細(xì)胞紅細(xì)胞 懸浮少白細(xì)胞紅細(xì)胞,白細(xì)胞與輸血反應(yīng)的相關(guān)性 經(jīng)研究證實(shí)，大多數(shù)患者，因輸血或受孕，體內(nèi)產(chǎn)生白細(xì)胞抗體，這些抗體大部分屬于人類白細(xì)胞抗原（HLA)系統(tǒng)的同種抗體，當(dāng)再度輸入含有白細(xì)胞的全血或其他血液成分時(shí)，有可能產(chǎn)生免疫性發(fā)熱反應(yīng)等輸血副作用,㈡制備方法,從全血和濃縮紅細(xì)胞內(nèi)去除白細(xì)胞的方法很多，其效果依據(jù)方法不同而異。,表4 去除紅細(xì)胞中白細(xì)胞的方法,⒈離心白膜

19、法,簡單、經(jīng)濟(jì)，易于操作。 將全血采集于三聯(lián)袋主袋內(nèi)，分離出上層血漿至末袋內(nèi)，然后擠白膜層和白膜層下1-1.5cm 的紅細(xì)胞至空轉(zhuǎn)移袋內(nèi)，白膜層及白膜層下含有大部分白細(xì)胞、血小板和部分紅細(xì)胞。為了提高白細(xì)胞去除率，可將末袋的血漿注入主袋，重復(fù)離心，最后可制成少白細(xì)胞的紅細(xì)胞,⒉濾器過濾法,由于高分子工業(yè)的發(fā)展，促進(jìn)了輸血器材的改革，各種不同功能的濾器相繼問世。主要包括兩大類：第一代是用纖維或泡沫制成的柱狀過濾器。第二代為聚

20、酯或塑料為材料孔徑20-40微米的網(wǎng)狀過濾器；第三代過濾器以聚酯纖維無紡布作高效濾芯材料，不僅具有高效的白細(xì)胞去除率還有選擇性作用，既有去除濃縮紅細(xì)胞中白細(xì)胞和血小板作用，還能從濃縮血小板中去除白細(xì)胞。,㈢保存,⒈保存在4℃±2℃保存液⒉紅細(xì)胞添加液SAG(生理鹽水-腺嘌呤-葡萄糖)SAGM(生理鹽水-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇）MAP(甘露醇-腺嘌呤-磷酸鹽)可保存35天AS-1 AS-3 AS-5可保存42天,四

21、、洗滌紅細(xì)胞,㈠概念 洗滌紅細(xì)胞是采用物理方式在無菌條件小，將保存期內(nèi)濃縮紅細(xì)胞或懸浮紅細(xì)胞等制劑用生理鹽水洗滌，去除絕大部分非紅細(xì)胞成分，并將紅細(xì)胞懸浮在生理鹽水中即為洗滌紅細(xì)胞。 洗滌紅細(xì)胞血漿清除率為≥ 98%，白細(xì)胞清除率≥ 80%，紅細(xì)胞的回收率≥ 70%,⒈封閉式三聯(lián)鹽水袋洗滌法 三聯(lián)鹽水袋為三個(gè)容積350-400ml 單袋用塑料管道相連的密閉無菌、無熱源系統(tǒng)。每袋內(nèi)裝

22、有200ml 注射用生理鹽水，主袋連接穿刺針頭一個(gè)。三個(gè)袋子之間用塑料夾子夾住，彼此不相連。,㈡制備,⒉開放式洗滌法,如無三聯(lián)鹽水袋裝置，可以用普通醫(yī)用生理鹽水，在百級超凈臺內(nèi)連接洗滌或用無菌連接裝置在普通工作間連接洗滌,3）機(jī)器洗滌法,洗滌紅細(xì)胞的機(jī)型較多。國內(nèi)較常見于洗滌冷凍紅細(xì)胞。,㈢保存,洗滌紅細(xì)胞保存溫度4℃±2℃自制備后盡快輸注，最好在6小時(shí)之內(nèi)輸用，保存不超過24小時(shí),五、冰凍紅細(xì)胞,概念

23、冰凍紅細(xì)胞又稱為冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞，是采用甘油作為冰凍保護(hù)劑深低溫保存，根據(jù)臨床需要再進(jìn)行解凍洗滌去甘油處理的特殊紅細(xì)胞制劑,紅細(xì)胞低溫保存法為英國學(xué)Smith首先發(fā)明。后來，人們反復(fù)研究逐步認(rèn)識到，冰凍紅細(xì)胞是長期保存紅細(xì)胞的一種理想方法。紅細(xì)胞的代謝速度取決于保存溫度，如把保存溫度降到使紅細(xì)胞代謝率幾乎停止時(shí)，紅細(xì)胞代謝耗能最少。達(dá)到延期保存紅細(xì)胞的目的。但血液在零度以下會(huì)結(jié)冰，在細(xì)胞內(nèi)外形成冰晶，破壞細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞外液滲透壓

24、升高，促進(jìn)細(xì)胞脫水，最終引起細(xì)胞的解體死亡，所以必須加入防凍液。,一是細(xì)胞內(nèi)防凍劑，具有高溶解度及低細(xì)胞毒性，降低冰點(diǎn)，增加不凍水量如甘油，二甲亞砜二是細(xì)胞外防凍劑，降低冰點(diǎn)，增加不凍水量。如羥乙基淀粉，乳糖。冰凍紅細(xì)胞最常用的防凍劑為甘油,保存,冰凍紅細(xì)胞最大的有點(diǎn)可長期保存，高濃度甘油的紅細(xì)胞可以保存3年，低濃度甘油超速冷凍的紅細(xì)胞可以保存10年。高濃度甘油冷凍的紅細(xì)胞在-80保存，超低溫冰箱即可保存。解凍后的紅細(xì)胞保存在溫度

25、4℃±2℃自制備后盡快輸注，最好在6小時(shí)之內(nèi)輸用，保存不超過24小時(shí),六、年輕紅細(xì)胞,概念 年輕紅細(xì)胞是一種具有較多的網(wǎng)織紅細(xì)胞、酶活性相對增高、平均細(xì)胞年齡較小的紅細(xì)胞成分。大多用血液細(xì)胞分離機(jī)制備。年輕紅細(xì)胞存活期明顯長于成熟紅細(xì)胞，半存活期為44.9天，而成熟紅細(xì)胞僅為29天,保存,輸入體內(nèi)可相對延長存活期，所以對長期依賴輸血的貧血患者，重型珠蛋白生成障礙性貧血患者療效較好。 保

26、存同其他紅細(xì)胞成分,七、輻照紅細(xì)胞,用射線照射滅活活性淋巴細(xì)胞的紅細(xì)胞制劑，用來預(yù)防TA-GVHD的發(fā)生，血液制劑的最佳輻照量是完全消除供血者淋巴細(xì)胞的有絲分裂能力而不破壞其他血液細(xì)胞功能。我國要求的照射劑量為25Gy.,保存,美國FDA規(guī)定紅細(xì)胞輻照后保存不超過28天，最好盡快輸注，輸后體內(nèi)回復(fù)率應(yīng)﹥75%。歐洲會(huì)議推薦紅細(xì)胞的輻照應(yīng)在采血后14天內(nèi)進(jìn)行，并且輻照后紅細(xì)胞的保存時(shí)間應(yīng)在輻照后14天內(nèi),第三節(jié) 血小板的制備和保存,手工法

27、 制備出的血小板為濃縮血小板并可進(jìn)行多人分匯集保存和輸注，一般從獻(xiàn)血員采集200ml或400ml全血采用離心分離后手工擠壓分離出血小板制劑。目前我國規(guī)定手工法由200 ml全血制備濃縮血小板為1u,所含血小板數(shù)≥2.0×1010 機(jī)器單采法 用血細(xì)胞分離機(jī)從單一獻(xiàn)血者體內(nèi)進(jìn)行直接采集，制備的血小板為單采血小板，可從單一獻(xiàn)血者體內(nèi)采集1或2個(gè)成人治療劑量的血小板。我國規(guī)定一個(gè)治療單位（劑量）為≥2.5×1011

28、 無論哪種血小板均可進(jìn)行進(jìn)一步處理，已獲得更為高質(zhì)量和安全的血小板制劑，如去除白細(xì)胞，病毒滅活，輻照等處理，可得到相應(yīng)的血小板制劑,一 濃縮血小板（PC ),㈠概念濃縮血小板（PC)制劑 是將室溫保存的多聯(lián)袋內(nèi)的全血，于采血后在一定時(shí)間內(nèi)（通常6小時(shí)內(nèi)）在20～24℃的全封閉條件下將血小板分離出來并懸浮在血漿內(nèi)制成的成分血，已有研究表明，全血采集后室溫（ 20～24℃）放置后再制

29、備血小板，可得到更高產(chǎn)率。,濃縮血小板（PC)制劑有三種模式：1、富血小板血漿法（PRP)，新鮮采集的全血于4～6小時(shí)內(nèi)分離PRP，再進(jìn)一步分離為濃縮血小板（PC）2、白膜法，從白膜中經(jīng)第二次離心后提取血小板，將5 ～6袋同型白膜和血漿用無菌接駁機(jī)串聯(lián)起來，并過濾后匯集成一單位濃縮血小板。3、機(jī)分法,㈡制備方法,㈢保存,PC均可在22℃±2℃震蕩保存數(shù)天，依據(jù)所使用的血小板專用保存袋而定，國外一般保存血小板5天，國內(nèi)可保

30、存24小時(shí)。 國外常采用多人份匯集濃縮血小板進(jìn)行白細(xì)胞過濾的方式，匯集后濃縮血小板制劑的保存期在美國規(guī)定為 4小時(shí)，歐洲為6小時(shí)。我國雖未有明確規(guī)定，但匯集的多人份濃縮血小板制劑仍應(yīng)盡早使用，保存不得超過24小時(shí)。,二 單采血小板,㈠概念 單采血小板 是使用血細(xì)胞分離機(jī)采集獻(xiàn)血者的血小板所制成的血小板制劑。由于單采血小板是從單一個(gè)體用全自動(dòng)血細(xì)胞分離機(jī)采集而來，通常又稱為機(jī)采血小板。 單采血小板制劑應(yīng)用廣泛

31、，具有純度高、質(zhì)量好等優(yōu)點(diǎn)，可以從單個(gè)獻(xiàn)血者體內(nèi)采集1～2個(gè)成人劑量的血小板(≥3.0×1011,且要白細(xì)胞的求去除白細(xì)胞，歐洲規(guī)定每單采血小板制劑中白細(xì)胞的殘留量必須≤5.0×106，美國單采血小板白細(xì)胞殘留量幾乎能達(dá)到≤1.0×106.,㈡單采血小板對獻(xiàn)血者的要求,獻(xiàn)血者除符合捐獻(xiàn)全血的全部體檢要求外，還需符合以下要求：⒈采前血小板計(jì)數(shù)≥150×109／L,血細(xì)胞比容＞38%。血小板計(jì)數(shù)≥3

32、00×109／L，可以進(jìn)行采集2個(gè)血小板治療量（ ≥6.0×1011血小板）⒉單采血小板的采集過程需要持續(xù)1～1.5小時(shí)，要求獻(xiàn)血者靜脈必須充盈良好。⒊獻(xiàn)血前1天最好多飲水，當(dāng)日必須吃早餐，宜清淡飲食，如稀飯、饅頭。⒋要求獻(xiàn)血者在獻(xiàn)血前1周不得服用阿司匹林、吲哚美辛、保泰松、布洛芬、維生素E,雙密達(dá)莫，氨茶堿、青霉素及抗過敏藥物。⒌單采血小板獻(xiàn)血間隔為1個(gè)月。,㈢制備,⒈連續(xù)單采和非連續(xù)單采⒉美國規(guī)定每單位

33、（1治療劑量）單采血小板計(jì)數(shù)為≥3.0×1011。 我國規(guī)定單采血小板計(jì)數(shù)應(yīng)達(dá)到≥2.5×1011／袋，白細(xì)胞混入量≤5.0×108 ／袋，紅細(xì)胞混入量≤8.0×109／袋。,㈣單采血小板的保存,⒈保養(yǎng)液為ACD-A及開放和采用普通血袋的單采血小板（125～200ml)保存在22℃±2℃震蕩保存保存期為24小時(shí)。⒉未經(jīng)開放處理并采用血小板專用保存袋的單采

34、血小板保存在22℃±2℃震蕩保存保存期可保存5天。,第四節(jié) 血漿的制備和保存,血漿是指抗凝全血經(jīng)離心去除紅細(xì)胞有形成分后的淡黃色液體，含有水，電解質(zhì)和蛋白質(zhì)，主要是白蛋白，免疫球蛋白和各種凝血因子。血漿可由單采或經(jīng)全血制備其他成分分離而來目前國內(nèi)常用的血漿制劑根據(jù)制備方法及來源的不同分為2類： 新鮮冰凍血漿和普通冰凍血漿根據(jù)采集和方式不同還有單采血漿和病毒滅活血漿,一、新鮮冰凍血漿,㈠概念新鮮冰凍

35、血漿在全血采集后6小時(shí)（全血保養(yǎng)液為ACD）或8小時(shí)（全血保養(yǎng)液為CPD、CPDA-A)內(nèi)，在全封閉的條件下，將分離出的新鮮液體血漿速凍后并保存于-20以下冰箱即為新鮮冰凍血漿。,㈢保存,新鮮冰凍血漿含有全部凝血因子，包括不穩(wěn)定的第ⅴ因子和第Ⅷ因子。 新鮮冰凍血漿保存于-20以下的冰箱可達(dá)一年，其后可轉(zhuǎn)為普通冰凍血漿。,二 、普通液體血漿,⒈全血采集后放于4℃±2℃冷藏箱保存；⒉全血在保存期內(nèi)或過期5天內(nèi)，經(jīng)自然

36、沉降或離心后，分出上層血漿，即為普通液體血漿。⒊普通液體血漿立即放入-20 ℃以下的冰箱內(nèi)冷凍保存；⒋新鮮冰凍血漿保存一年后，可改為普通冰凍血漿；⒌制備冷沉淀后所得的血漿在-20 ℃以下冰箱冰凍并保存，也可作普通血漿之用。普通冰凍血漿保存于-20 ℃以下的冰箱內(nèi)冷凍保存保存期為5年,三、其他類型血漿,⒈單采血漿 利用血細(xì)胞成分分離機(jī)采集血漿，已成為血漿一條重要途徑，采集原理和方法與但采血小板相似。單采血漿可在6小時(shí)之內(nèi)速凍并冷

37、貯。制成新鮮冰凍血漿。,⒉病毒滅活血漿 分離制備的新鮮液體血漿可進(jìn)一步采用病毒滅活和濾除紅細(xì)胞等處理，以達(dá)到減少白細(xì)胞和滅活病毒的目的，提高血漿輸注的安全性。 國內(nèi)主要采用的僅有亞甲藍(lán)（MB)光化學(xué)法血漿病毒滅活技術(shù).亞甲藍(lán)是一種光敏劑，可以與病毒的核酸以及病毒的脂質(zhì)包膜結(jié)合，在可見光的作用下發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)，使病毒核酸斷裂，包膜破損，從而達(dá)到病毒滅活的效果。 MB法存在不足，只能滅活包膜病毒，如HBV，H

38、CV，HIV等，而對非包膜病毒如HAV B19病毒無效。而且單一血袋中的各種凝血因子含量差異較大。光照處理后的血漿經(jīng)病毒滅活裝置配套用輸血過濾器可除去亞甲藍(lán)和絕大部分白細(xì)胞，因此，病毒滅活血漿在進(jìn)行病毒滅活的同時(shí)，還濾除了白細(xì)胞,第五節(jié) 冷沉淀的制備和保存,㈠概念冷沉淀 是新鮮冰凍血漿在1～5℃條件下不溶解的白色沉淀物。它是由美國女科學(xué)家Pool博士在1964～1965年期間發(fā)現(xiàn)的，其被加熱至37 ℃成溶解狀態(tài)，主要含有第Ⅷ因子，纖維

39、蛋白原，血管性血友病因子(vWF)以及纖維連接蛋白等成分,㈡制備,⒈新鮮冰凍血漿的融化1）Pool方法：將新鮮冰凍血漿從-20℃冰箱內(nèi)取出，置于4℃±2℃冷藏箱內(nèi)緩慢溶化，血漿融化后，袋子底部不融化白色膠狀物，即為冷沉淀。2）水浴融化法：將新鮮冰凍血漿從冰箱取出，置室溫5分鐘，待雙聯(lián)袋間連接的塑料管變軟；用金屬棒把原料袋上端小孔串在一起，10袋或20袋為一組，懸吊在水浴槽的搖擺架上（空袋用金屬鉤懸掛在水浴槽的上方）,3）水

40、浴槽用自來水和相應(yīng)量的溫水或冰塊調(diào)至16℃。當(dāng)加入原料漿袋后，啟動(dòng)搖擺裝置，使原料漿袋在水浴中擺動(dòng)約30分鐘后溫度調(diào)至4℃。如溫度降至3℃以下，加適量溫水，使其維持在4℃；當(dāng)原料血漿袋內(nèi)血漿全部融化時(shí)（約60-90分鐘），加足夠量的冰塊，使水浴溫度降至0-2℃。,⑷融化后的原料漿袋于2℃±2℃2000×g離心10分鐘，使冷沉淀下沉于塑料袋底部；⑸離心后應(yīng)立即將上層血漿分入空袋內(nèi)，留下約20-30ml 血漿于冷沉淀袋