神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮的關(guān)系

1、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮的關(guān)系,【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?1.觀察坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位的基本波形 ( 雙相或單相波 )2.測(cè)定坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位的傳導(dǎo)速度3.測(cè)定動(dòng)作電位的絕對(duì)不應(yīng)期4.觀察坐骨神經(jīng)干－腓腸肌標(biāo)本的電活動(dòng)與肌肉 收縮之間的關(guān)系,1. 細(xì)胞的生物電可表現(xiàn)為：,靜息電位、動(dòng)作電位,2. 靜息電位：,安靜時(shí)存在于細(xì)胞膜內(nèi)外兩側(cè)的電位差,3. 動(dòng)作電位：,細(xì)胞受刺激時(shí)，在靜息電位基礎(chǔ)上

2、發(fā)生的一次迅速、可逆的擴(kuò)步性電位變化,【實(shí)驗(yàn)原理】,4. 動(dòng)作電位的特點(diǎn)：,“全或無(wú)”現(xiàn)象,5. 神經(jīng)纖維興奮后，興奮性的周期性變化：,①  絕對(duì)不應(yīng)期：興奮性為零② 相對(duì)不應(yīng)期：興奮性＜正常③  超常期：興奮性＞正常④ 低常期：興奮性＜正常,【實(shí)驗(yàn)原理】,電刺激坐骨神經(jīng),【實(shí)驗(yàn)原理】,產(chǎn)生興奮（動(dòng)作電位），興奮沿神經(jīng)傳導(dǎo),神經(jīng)－肌接頭興奮傳遞,接頭后膜產(chǎn)生終板電位，總和成動(dòng)作電位,肌肉興奮，產(chǎn)生收縮,蟾蜍

3、,【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】,【實(shí)驗(yàn)器材和藥品】,BL-420E 生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)兩棲類手術(shù)器械神經(jīng)屏蔽盒張力換能器記錄電極輸入線及刺激電極輸出線任氏液, 棉球20%高滲甘油、1%普魯卡因,【實(shí)驗(yàn)方法】,一、坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位觀察,分離的坐骨神經(jīng)干應(yīng)盡可能長(zhǎng)，剪去分支,徹底去除表面的結(jié)締組織膜，避免傷及神經(jīng)干，任氏液浸泡5～10分鐘。,視頻3-1 坐骨神經(jīng)干標(biāo)本制備,注意: 1. 用棉球蘸任氏液擦拭電極。 2.

4、神經(jīng)平搭在電極上,要有方向性,二、連接實(shí)驗(yàn)裝置（見圖3-1）,單擊實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 → 選擇肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn) 神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo) 單擊 “電刺激”項(xiàng)目中強(qiáng)度1改為“0.05” “程控”項(xiàng)目中程控刺激選擇“程控” 單擊 觀察動(dòng)作電位曲線，找出坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的閾刺激和最大刺激值,1．

5、觀察坐骨神經(jīng)干雙相動(dòng)作電位波形,,,,,,三、實(shí)驗(yàn)觀察,單擊“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目” → 選擇“肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn)” 神經(jīng)干興奮傳導(dǎo)速度測(cè)定 對(duì)話框 輸入C1與C3間的距離 單擊確定 點(diǎn)擊 (專用信息顯示區(qū))

6、 自動(dòng)得出傳導(dǎo)速度,2. 測(cè)定神經(jīng)干興奮的傳導(dǎo)速度,,,,,,,,單擊實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 → 選擇肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn) 神經(jīng)干興奮不應(yīng)期測(cè)定 對(duì)話框 點(diǎn)擊程控觀察隨著兩次刺激間隔時(shí)間的逐漸縮短，動(dòng)作電位2的幅度變化情況，直至消失為止，此時(shí)的刺激間隔(波形顯示窗口下方顯示)，即為絕對(duì)不

7、應(yīng)期的時(shí)程。,3. 測(cè)定絕對(duì)不應(yīng)期,,,,,圖3-2 坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位絕對(duì)不應(yīng)期的測(cè)定,4. 觀察單相動(dòng)作電位,用鑷子將二個(gè)記錄電極之間(C1和C2)的神經(jīng)夾傷，觀察單相動(dòng)作電位。,如果兩個(gè)電極之間的神經(jīng)組織有損傷，興奮波只能通過(guò)第一個(gè)引導(dǎo)電極，不能傳導(dǎo)至第二個(gè)引導(dǎo)電極，則只能記錄到一個(gè)方向的電位偏轉(zhuǎn)波，稱為單相動(dòng)作電位。,1、神經(jīng)干分離盡可能長(zhǎng)一些，分離過(guò)程中勿損傷 神經(jīng)；2、神經(jīng)干的兩端不要碰在屏蔽盒上，也不要把神

8、 經(jīng)兩端折疊在電極上，以免影響動(dòng)作電位的大 小和波形；3、刺激強(qiáng)度在開始是不要過(guò)強(qiáng)，先由弱強(qiáng)度開 始，逐漸至適宜強(qiáng)度，以免過(guò)強(qiáng)刺激損傷神經(jīng) 標(biāo)本。,【注意事項(xiàng)】,【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】,1. 報(bào)告坐骨神經(jīng)干雙相動(dòng)作電位波形圖，測(cè)出閾刺激和最大刺激。2. 報(bào)告坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的神經(jīng)興奮的傳導(dǎo)速度和不應(yīng)期。,【實(shí)驗(yàn)方法】,二、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮的關(guān)系 （制備2個(gè)坐骨神經(jīng)干－腓腸肌標(biāo)本）,分離的坐骨神經(jīng)干應(yīng)盡可能長(zhǎng)

9、，避免傷及神經(jīng)干；要保留一段股骨；任氏液浸泡5～10分鐘。,視頻3-2 坐骨神經(jīng)干-腓腸肌標(biāo)本制備,標(biāo)本與儀器的連接,張力換能器,神經(jīng)屏蔽盒,刺激電極,記錄電極,,連接絲線,坐骨神經(jīng)干,腓腸肌,標(biāo)本與儀器的連接,單擊實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 → 選擇肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn) “肌肉興奮－收縮時(shí)相關(guān)系” 點(diǎn)擊“刺激觸發(fā)方式” （調(diào)整刺激參數(shù)），然后點(diǎn)擊 觀察單刺激（閾上刺激）坐骨神經(jīng)后，有無(wú)

10、神經(jīng)動(dòng)作電位和肌肉收縮出現(xiàn)；二者之間的先后時(shí)間關(guān)系,,,5、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系,,,觀察項(xiàng)目（1）：,參數(shù)設(shè)置,5、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系,通道1（動(dòng)作電位）：G＝500； T＝0.01s；F＝10kHz 掃描速度：5ms/div 通道2（肌張力）：G＝20；T＝DC；F＝30Hz； 掃描速度 5ms/div(與通道1保持一致),,5、神經(jīng)興奮傳

11、導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系,用蘸有1%普魯卡因的小棉球包裹在刺激電極與記錄電極之間的神經(jīng)干上，調(diào)節(jié)刺激強(qiáng)度使所致動(dòng)作電位幅度最大，每5分鐘用上述強(qiáng)度刺激神經(jīng)一次，觀察神經(jīng)動(dòng)作電位和肌肉收縮曲線的變化，直至反應(yīng)消失,觀察項(xiàng)目（2）：,5、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系,另取一坐骨神經(jīng)干-腓腸肌標(biāo)本，將標(biāo)本重新固定于肌槽內(nèi)，重復(fù)實(shí)驗(yàn)觀察（1）步驟,,參數(shù)設(shè)置,5、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系,通道1（動(dòng)作電位）:G＝500; T＝0.01s; F＝10kH

12、z/3.3k 掃描速度：5ms/div-20ms/div；通道2（肌張力）：G＝20；T＝DC；F＝30kHz； 掃描速度 5ms/div(與通道1保持一致),,5、神經(jīng)興奮傳導(dǎo)與肌肉收縮關(guān)系,取另一個(gè)標(biāo)本，將腓腸肌浸泡在高滲甘油任氏液中10-20min ，（浸泡期間，可間歇用鋅銅弓刺激神經(jīng)，若肌肉無(wú)反應(yīng)）將標(biāo)本固定于裝置中，重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)觀察（1）步驟。觀察神

13、經(jīng)動(dòng)作電位和肌肉收縮曲線的變化。,,觀察項(xiàng)目（3）：,1、分離神經(jīng)干分離盡可能長(zhǎng)一些，分離過(guò)程中勿 損傷神經(jīng)；實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)經(jīng)常滴加任氏液，防止標(biāo)本干燥，失去興奮性；2、神經(jīng)干的兩端不要碰在屏蔽盒上，也不要把神經(jīng)兩端折疊在電極上，以免影響動(dòng)作電位的大小和波形；3、用高滲甘油浸泡肌肉時(shí)，勿將神經(jīng)浸入甘油中；4、肌肉和神經(jīng)標(biāo)本連接于儀器時(shí)，注意盡量不要觸摸牽拉損傷標(biāo)本；5、每次刺激后必須讓肌肉有一定的休息時(shí)間（0.5－1min）。,【

14、注意事項(xiàng)】,【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】,記錄神經(jīng)動(dòng)作電位與肌肉收縮的先后時(shí)間關(guān)系；當(dāng)用普魯卡因阻斷神經(jīng)興奮傳導(dǎo)后，肌肉有無(wú)收縮；用高滲甘油浸泡肌肉與神經(jīng)接頭處后，神經(jīng)興奮和肌肉收縮關(guān)系如何,,【實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論】,正常曲線,普魯卡因阻斷神經(jīng)傳導(dǎo),,【實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論】,正常曲線,浸泡高滲甘油后,【思考題】,1、坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位為什么不是“全或無(wú)” ，而是在一定范圍內(nèi)隨刺激強(qiáng)度增加而增大？2、神經(jīng)－肌接頭興奮傳遞的過(guò)程。3、骨骼肌興奮－收縮耦聯(lián)的

15、機(jī)制。4、高滲甘油阻斷興奮收縮耦聯(lián)的機(jī)制,【討論】,坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位為什么不是“全或無(wú)”的，而是在一定范圍內(nèi)隨刺激強(qiáng)度增加而增大？,單一細(xì)胞的動(dòng)作電位是“全或無(wú)”的，而坐骨神經(jīng)干是混合神經(jīng)，神經(jīng)干含有若干條神經(jīng)纖維，其興奮性大小各不相同。給予弱的刺激時(shí)，興奮性高的神經(jīng)纖維興奮產(chǎn)生動(dòng)作電位，隨著刺激強(qiáng)度增加，參與興奮的神經(jīng)纖維數(shù)目增多，所以記錄到的坐骨神經(jīng)干復(fù)合動(dòng)作電位幅度增大。,【討論】,高滲甘油阻斷興奮收縮耦聯(lián)的機(jī)制？,甘油可選擇