安徽省油菜菌核病菌致病性、多菌靈抗藥性及遺傳多樣性研究.pdf

1、核盤菌Sclerotinia sclerotiorum(Lib)de Bary屬于子囊菌門、盤菌綱、柔膜菌目、核盤菌屬真菌,其寄主范圍和地理分布十分廣泛,所引致的油菜菌核病是一種相當(dāng)嚴(yán)重的世界性植物真菌病害。
　　本學(xué)位論文對(duì)安徽省不同地區(qū)的油菜菌核病菌的致病性、對(duì)多菌靈抗藥性和遺傳多樣性等進(jìn)行了研究,并探討了致病性分化及抗藥性產(chǎn)生的機(jī)制,以期為油菜菌核病菌的致病機(jī)理研究、抗藥性治理和所致病害的綜合治理提供理論基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如

2、下:
　　1.安徽省油菜菌核病菌致病性分化研究
　　從安徽桐城、旌德、宣州、望江、寧國(guó)、壽縣、合肥、無(wú)為、廬江等市、縣發(fā)病油菜上分離獲得85個(gè)油菜菌核病菌菌株,采用離體葉片接種法測(cè)定了油菜菌核病菌不同菌株對(duì)4個(gè)不同品種油菜的致病力,同時(shí)測(cè)定部分供試菌株的產(chǎn)草酸能力和菌絲生長(zhǎng)速率,分析菌核病菌菌株的致病性與油菜品種抗病性間的相關(guān)性。結(jié)果表明,絕大多數(shù)供試菌株接種油菜葉片后均可引起發(fā)病,同一菌株在不同品種的油菜上致病力有所不同(

3、菌株SX11除外,其對(duì)4個(gè)不同品種的致病力均為0);不同菌株的致病力存在極顯著差異,4個(gè)油菜品種之間存在差異顯著性。菌株的致病力與產(chǎn)草酸能力有一定的相關(guān)性(r=0.8619,R2=0.7429),與菌絲生長(zhǎng)速率無(wú)相關(guān)性,與菌株的地理來(lái)源也無(wú)關(guān)。
　　2.安徽省油菜菌核病菌對(duì)多菌靈抗藥性監(jiān)測(cè)及遺傳機(jī)制研究
　　從安徽省合肥、桐城、旌德、寧國(guó)、廬江、無(wú)為、蕪湖、壽縣、六安、南陵、宣州、繁昌和望江等13個(gè)市縣的油菜病莖上分離得到7

4、4個(gè)油菜菌核病菌菌株,對(duì)其進(jìn)行了多菌靈抗藥性測(cè)定。結(jié)果表明,有22株對(duì)多菌靈表現(xiàn)出不同程度的抗藥性,除廬江、南陵、宣州、繁昌和望江外,上述各地均有抗藥性菌株分布,但抗藥性菌株所占的比例不一,以六安系列監(jiān)測(cè)到的抗藥性個(gè)體比例所占比例最大(100.00％),桐城最小(14.29%);但監(jiān)測(cè)到 SX4對(duì)多菌靈的抗藥性最強(qiáng),高達(dá)418.8048mg/L,SX2和NGA5也達(dá)到高抗水平,EC50分別為214.9593 mg/L和88.5202mg

5、/L。結(jié)果提示,安徽省部分地區(qū)油菜菌核病菌已經(jīng)對(duì)多菌靈產(chǎn)生了抗藥性。本研究通過上下游引物擴(kuò)增獲得與核盤菌相關(guān)的β-微管蛋白基因,該基因全長(zhǎng)1344bp(不包含內(nèi)含子序列),相應(yīng)編碼447個(gè)氨基酸。高抗菌株β-微管蛋白基因198位氨基酸由谷氨酸(Glu)突變?yōu)楸彼?Ala),突變位點(diǎn)和突變類型與其他抗多菌靈病菌一致;低抗菌株的β-微管蛋白基因與敏感菌株一致,沒有發(fā)生突變。本研究對(duì)油菜菌核病菌的抗藥性與致病性相互關(guān)系進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)其抗藥

6、性與致病性沒有相關(guān)性。
　　3安徽省不同地區(qū)油菜菌核病菌遺傳多樣性的ISSR分析
　　本研究采用ISSR標(biāo)記技術(shù)對(duì)47個(gè)安徽省油菜菌核病菌菌株進(jìn)行DNA指紋分析。從篩選出的12個(gè)引物對(duì)這47個(gè)油菜菌核病菌菌株進(jìn)行ISSR-PCR擴(kuò)增,共擴(kuò)出136個(gè)ISSR條帶,其中多態(tài)性條帶為125個(gè),占92.7%,表明安徽省油菜菌核病菌中存在較豐富的遺傳多樣性。菌株間的遺傳相似系數(shù)為0.56~0.91,Nei’s基因多樣性指數(shù)(h)范圍為