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文檔簡介
1、<p><b> 本科畢業(yè)論文</b></p><p><b> ?。?0 屆)</b></p><p> 多刺裸腹蚤實驗室大量培養(yǎng)的研究</p><p> 所在學院 </p><p> 專業(yè)班級 水產養(yǎng)殖學
2、 </p><p> 學生姓名 學號 </p><p> 指導教師 職稱 </p><p> 完成日期 年 月 </p><p><b> 目錄</b><
3、/p><p><b> 中文摘要1</b></p><p><b> 英文摘要2</b></p><p><b> 1.前言3</b></p><p> 2.多刺裸腹蚤的國內外研究現(xiàn)狀4</p><p> 2.1關于形態(tài)學方面的研究4&l
4、t;/p><p> 2.2關于生殖生物學的研究4</p><p> 2.3關于生活史的研究4</p><p> 2.4關于多刺裸腹蚤的研究現(xiàn)狀5</p><p> 3.關于光合細菌研究的概況6</p><p><b> 4.實驗設計7</b></p><p>
5、; 4.1實驗原理7 </p><p> 4.2材料與方法8</p><p> 4.3數據處理10</p><p> 5.結果與分析13</p><p><b> 6.討論13</b></p><p> 6.1光合細菌在提高多刺裸腹蚤生物量上的作用14</p>
6、<p> 6.2光合細菌在縮短多刺裸腹蚤生殖間隔期上和延緩衰亡期上的作用14</p><p> 6.3光合細菌在改善水質方面的作用14</p><p><b> 7.小結14</b></p><p><b> 致謝 15</b></p><p><b>
7、參考文獻16</b></p><p> 多刺裸腹蚤實驗室大量培養(yǎng)的研究</p><p> [摘要] 多刺裸腹蚤(Moina macrocopa)是一種習見的枝角類,隸屬于裸腹蚤科,裸腹蚤屬。營養(yǎng)豐富,是水產經濟動物苗期的重要天然餌料。通過對前人文獻的分析整理,目前對多刺裸腹蚤的有關研究主要集中在食物對多刺裸腹蚤的影響、溫度對多刺裸腹蚤的影響、還有多刺裸腹蚤的海水馴化。對多
8、刺裸腹蚤形態(tài)生理方面的研究比較少見。通過食物對多刺裸腹蚤影響的有關文獻進行整理,得出在多刺裸腹蚤的培養(yǎng)過程中很少有關于用天然水體中的藻類和光合細菌的混合培養(yǎng)液來培養(yǎng)多刺裸腹蚤。整理關于光合細菌在水產養(yǎng)殖上應用的有關文獻,指出在枝角類的培養(yǎng)過程中,用光合細菌投喂的枝角類在上生物量上比藻類培養(yǎng)的枝角類要多;在魚苗的培育過程中,用光合細菌作為餌料添加劑能夠提高魚苗的成活率和生長率;在養(yǎng)蝦池中潑灑光合細菌能夠減少氨氮的含量。本文利用光合細菌和藻
9、類的混合培養(yǎng)液培養(yǎng)液多刺裸腹蚤為實驗組,以只用藻類培養(yǎng)多刺裸腹蚤為對照組。實驗結果表明:加光合細菌組比只用藻類培養(yǎng)組在生物量上平均每天多28.3%;而且加光合細菌組的PH變動的幅度比只用藻類組的PH小0.07。</p><p> [關鍵詞]枝角類 多刺裸腹蚤 光合細菌</p><p> Study On Culture A Large Number Of Moina Macroco
10、pa In Laboratory</p><p> [Abstract] Moina macrocopa is a regular Cladocera, under the Moinidae and Moina, which is an important natural food at the seedling of aquatic economic animals. Ordering through the
11、 analysis of the previous studies , Currently the research about Moina macrocopa is focusing on the effects of food and temperature on the Moina macrocopa, Moina macrocopa seawater acclimation. Moina macrocopa about morp
12、hological and physiological aspects of the research is relatively rare. Ordering through the effect</p><p> [Keywords] Moina macrocopa Cladocera photosynthetic bacteria</p><p> 多刺裸腹蚤實驗室大
13、量培養(yǎng)的研究</p><p><b> 1. 前言</b></p><p> 多刺裸腹蚤(Moina macrocopa)是一種常見的淡水枝角類,分布于各種各樣的淡水水體中。它具有適應能力強、繁殖速度快、營養(yǎng)豐富、容易大量培養(yǎng)等枝角類的大多數優(yōu)點。</p><p> 多刺裸腹蚤營浮游生活,是水體中浮游生物的重要組成部分。個體不大,適口性
14、強;運動速度緩慢,方便魚苗捕捉,是水產經濟動物苗期的重要天然餌料。 </p><p> 多刺裸腹蚤之所以成為重要的水產經濟動物苗種餌料來源,主要是因為其營養(yǎng)豐富,且易于獲取。不僅粗蛋白含量較高,粗蛋白含量高,而且所含氨基酸種類多,含量高,幾乎包含了魚類營養(yǎng)所必需的一切氨基酸。除此之外,還含有各種維生素,如維生素A﹑維生素B1、維生素B12、維生素D、維生素K等,期中以維生素A含量相對豐富。而且,期中礦物質元素含
15、量較為豐富,種類較多。由于它的營養(yǎng)組成相對比較合理,因此容易被動物吸收,利用率很高。</p><p> 但是由于季節(jié)、地域的限制以及近年來魚類人工育苗的研究和生產不斷發(fā)展,對枝角類的需求量每年都在增加,單靠人工捕撈天然枝角類已經遠遠不能滿足我們的需要,枝角類的穩(wěn)定、持續(xù)、大規(guī)模培養(yǎng)對魚類的苗種生產研究具有重要意義。</p><p> 目前對多刺裸腹蚤的有關研究大多集中在不同餌料對其生物
16、量的影響,溫度對其生長繁殖的影響,以及對其進行海水馴化這三個方面。在這三個方面的研究過程中,主要研究關于多刺裸腹蚤的餌料方面。</p><p> 這些研究報道了實驗室條件下的研究單一的生物學,生態(tài)學因子對多刺裸腹蚤的影響。例如多刺裸腹蚤及其卵的形態(tài)結構,溫度和餌料等單一生態(tài)因子對其個體及其群體生長等的影響,但是圍繞工廠化,集約化培養(yǎng)方面的系統(tǒng)研究,在國內尚屬空白[1]。</p><p>
17、 本文選用淡水餌料培養(yǎng)中的一種常用的,營養(yǎng)豐富的枝角類—多刺裸腹蚤為研究對象,通過對國內外有關多刺裸腹蚤培養(yǎng)研究文獻的收集、整理、分析,對有關多刺裸腹蚤培養(yǎng)的研究進展作一綜述,提出自己的觀點,并做實驗進行驗證,分析數據,最后形成畢業(yè)論文,旨在為餌料動物多刺裸腹蚤的實驗室大量培養(yǎng)和集約化培養(yǎng)提供比較系統(tǒng)的理論參考。</p><p> 枝角類是節(jié)肢動物門,甲殼綱,鰓足亞綱,雙甲目,枝角亞目的動物。通稱水蚤。俗稱紅
18、蟲或魚蟲。它與其它甲殼動物不同的特征是,軀體包被于兩殼瓣中,體不分節(jié),頭部具一個大復眼。第二觸角強大為雙肢型,后腹部結構、功能復雜,胸肢4-6對兼具濾食、呼吸功能。是水體浮游動物的重要組分。枝角類個體不大(體長0.2-10mm,一般1-3mm。)、運動緩慢。它們既是一種以藻類和細菌為食的浮游動物,也是魚類、鳥類和其他捕食者的主要捕食對象,在水生生態(tài)系統(tǒng)中占有重要的地位。同時也是水產經濟動物苗期的重要天然餌料[1][15]。</p&
19、gt;<p> 枝角類作為水產經濟動物的活體餌料,具有各種各樣的優(yōu)點,不僅能夠提高水產經濟動物育苗的存活率和生長率,還可以降低養(yǎng)殖成本,提高經濟效益,減少其它生物對水質的污染。如枝角類可以有效的消耗富營養(yǎng)化水體中的藻類。有實驗證明蚤類能有效的抑制“水華”發(fā)生,利于長期的進行養(yǎng)殖。</p><p> 正是由于枝角類在培育水產經濟動物幼苗和消耗富營養(yǎng)化水體中藻類的優(yōu)點,對枝角類的需求逐年增加,單靠人
20、工捕撈天然枝角類已經遠遠不能滿足需要,另一方面由于季節(jié)波動性大,地域的限制加上近年來隨著魚類人工育苗研究以及生產的不斷發(fā)展和觀賞魚等的養(yǎng)殖需要大量的鮮活枝角類。枝角類的穩(wěn)定、持續(xù)、大規(guī)模培養(yǎng)對魚類的人工繁殖和育苗生產研究具有重要意義[1]。</p><p> 枝角類的培養(yǎng)對象應該選擇營養(yǎng)豐富、繁殖速度快、容易培養(yǎng)、大小合適的種類。例如美女蚤、裸腹蚤、隆線蚤、大型蚤等都是目前常用做餌料的枝角類。海產的枝角類種類相
21、對于淡水枝角類來說比較少,對淡水或者咸淡水枝角類進行海水馴化,使其適應一定的鹽度環(huán)境,對海水養(yǎng)殖業(yè)來說是具有重要的實際意義。例如在海水魚的育苗過程中,用蒙古裸腹蚤替代鹵蟲和撓足類,取得了很好的效果。蒙古裸腹蚤因其生存鹽度范圍廣是海水魚育苗中主要的培養(yǎng)對象。但是,在淡水魚育苗的過程中,主要是以自然水體中存在的枝角類為培養(yǎng)對象,水體中的枝角類屬于混合種,并且其中還可能存在著影響魚苗生存和生長的不利因子。因此在工廠化的育苗過程中選擇一種合適的
22、枝角類,在餌料的培養(yǎng)上和魚苗的成活率上具有重要的意義。</p><p> 查閱文獻表明:多刺裸腹蚤是一種常見的枝角類,它的分布范圍很廣。喜歡生活在小型水域,特別是一些有機質豐富的水體中。春夏季數量特別大,在清塘后不久的魚苗池中,它的密度可達到每升水數百個。是一種很有前途的室內集約化培養(yǎng)對象之一。</p><p> 2. 多刺裸腹蚤的國內外研究現(xiàn)狀</p><p>
23、; 2.1 關于形態(tài)學方面的研究</p><p> 多刺裸腹蚤是一種習見的枝角類,隸屬于裸腹蚤科(Moinidae)裸腹蚤屬(Moina)。雌體長0.8-1.2毫米。腹緣剛毛55-65根,列生于整個腹緣,前長而后短。第一觸角長大,呈棒狀,雄性個體更加強大。后腹部具羽狀肛刺7-11個和末端叉狀肛刺一個。尾爪基部無櫛狀刺列而僅有一些微小的梳狀毛[2]。但是由于地域的差異,即使是同一種類它的形態(tài)特征也存在著一定的差
24、異。</p><p> 2.2關于生殖生物學的研究</p><p> 多刺裸腹蚤是一種多周期的枝角類。它的一生要經歷1一3個幼齡和6一8個成齡。溫度在15度一25度范圍內,每一幼齡需要經過時間為半天到一天半,每一成齡需要經過的時間為一天到三天。</p><p> 多刺裸腹蚤的成熟比較早,產出的幼蚤,溫度在15攝氏度到18攝氏度時二天到三天可達到性成熟,經過四天
25、到五天培養(yǎng)第一批幼蚤產出;溫度在十七攝氏度到二十五攝氏度時,一般在一天以內達到性成熟,培養(yǎng)三天以后產出第一批幼蚤。與枝角類相比具有較強的生殖力與繁殖能力。一生可以繁殖6一8次,卵的總數目可達276個,平均236個[3],有可能是枝角類中繁殖能力最強的一種。</p><p> 3.3關于生活史的研究</p><p> 與其它枝角類一樣多刺裸腹蚤具有兩種生殖方式。孤雌生殖(單性生殖或無性生
26、殖)和有性生殖(兩性生殖)。一般在環(huán)境條件情況優(yōu)越的下,所有雌體的種群組成中是無性生殖的。在適宜的環(huán)境條件下,一般多刺裸腹蚤在四天齡到七天齡的齡期中繁殖,每個雌體的懷卵數為4一22個,平均一到二天產生一窩卵。大多數蚤在它們的一生中產卵次數為二到六次。在環(huán)境條件惡化的情況下下,出現(xiàn)雄性個體,進行兩性生殖即雌體和雄體交配,產生休眠卵。王金秋、張佳憶等(2000)研究了生態(tài)因子的波動對多刺裸腹蚤雄性個體發(fā)生的影響,實驗選取溫度,餌料密度,光照
27、你,PH值等四個生態(tài)因子,對實驗對象進行一次性劇烈刺激和多次漸進刺激,結果表明:這二種刺激均未能使多刺裸腹蚤個體直接產生雄性個體[4]。</p><p> 2.4關于多刺裸腹蚤研究現(xiàn)狀</p><p> 與其他枝角類一樣,蚤體的生長除年齡外,多刺裸腹蚤的生長繁殖受到食物、溫度、種群密度、其他理化物質等外界環(huán)境因子的影響。</p><p> 食物對多刺裸腹蚤生長
28、繁殖的影響:楊和荃(1995)研究了不同草漿發(fā)酵物培養(yǎng)多刺裸腹蚤的效果,在試驗用的十八種發(fā)酵草漿中,各個發(fā)酵草漿間的餌料效果的差異顯著?;旌习l(fā)酵草漿是所有發(fā)酵草漿中餌料效果最好的,采收量高達40個/毫升。旱草發(fā)酵草漿的餌料效果普遍比水草發(fā)酵草漿好。投喂旱草發(fā)酵草漿,多刺裸腹蚤的平均采收量為12個/毫升,投喂水草發(fā)酵草漿,平均采收量為8.4個/毫升。實驗結果表明:發(fā)酵草漿具有較好的餌料效果,并有廣闊的開發(fā)利用前景[5]。石志猛(2002)
29、等對四種不同的餌料進行了比較得出:Banat培養(yǎng)液和苜宿草發(fā)酵液都含有大量的細菌和有機腐屑,其中Banat培養(yǎng)液肥力充足材料易得;宿草發(fā)酵液的配制經濟又省力;球藻大小適口,能進行光合作用調節(jié)水質;酵母來源豐富,在枝角類得生產性培養(yǎng)中得到了廣泛得使用。試驗利用小球藻、Banta培養(yǎng)液、苜宿草發(fā)酵液和酵母4種餌料,溫度在25土1攝氏度的條件下。研究對多刺裸腹蚤增殖的影響試驗結果表明Banat培養(yǎng)液培養(yǎng)多刺裸腹蚤具有最高的Ym值,是最好的餌料
30、,其余3種餌料次之。小球藻培養(yǎng)多刺裸腹蚤雖沒有高Ym值,但其生殖量穩(wěn)定,仍舊是一種好餌料[6]。程漢</p><p> 溫度對多刺裸腹蚤生長繁殖的影響:據Teroa和Tanaka(1928)的研究結果,多刺裸腹蚤的生殖率隨著溫度的增高而逐漸加速。隨著水溫的升高,幼齡期與成齡期縮短,但成齡個數有增加趨勢。但是,并沒有發(fā)現(xiàn)壽命長短和個體大小隨溫度的升高而縮短和變小的情況[11]。程漢良等(1999)對多刺裸腹蚤的攝
31、食強度進行了研究,發(fā)現(xiàn)在相同的餌料密度和光照的情況下,溫度對它的攝食強度影響顯著,低溫條件下的攝食強度明顯小于高溫條件下[12]。</p><p> 種群密度對多刺裸腹蚤生長繁殖的影響:Teroa和Tanaka (1928)發(fā)現(xiàn),擁擠可以降低多刺裸腹搔的生殖量。擁擠導致個體間食物競爭的加劇,食物相對貧乏,使得生殖量降低[11]。</p><p> 鹽度對多刺裸腹蚤生長繁殖的影響:王丹麗
32、等(1999)對多刺裸腹蚤進行了不同鹽度下生存和繁殖實驗。實驗結果表明:隨著鹽度的升高多刺裸腹蚤的壽命逐漸縮短,鹽度在千分之六是多刺裸腹蚤的生存上限,但是經過短期的馴化培養(yǎng)多刺裸腹蚤的能在千分之八的鹽度下生存。多刺裸腹蚤最適合的鹽度為千分之二到千分之四[13]。</p><p> 其它因子對多刺裸腹蚤生長繁殖的影響:代謝產物的增加導致環(huán)境惡化,例如:氨氮含量過高,酸堿度的變化等對其生長繁殖起到抑制作用。<
33、/p><p> 這些研究報道大多集中在實驗室條件下研究單一的生物學或生態(tài)學因子對多刺裸腹蚤的影響。例如:在多刺裸腹蚤的培養(yǎng)研究過程中,藻類主要是用單一藻種(小球藻)投喂,細菌主要以酵母為主。很少有利用藻類和光合細菌的混合培養(yǎng)液培養(yǎng)多刺裸腹蚤的報道。</p><p> 3.關于光合細菌的研究概況</p><p> 光合細菌又稱光養(yǎng)細菌,是能進行光合作用的一類原核生物
34、。主要分為產氧光合細菌和不產氧光合細菌二大類,目前最新的分類系統(tǒng)將所有的光合細菌分為藍細菌、綠色非硫細菌、綠色硫細菌、螺旋桿菌、紫色非硫細菌、好氧不產氧光合細菌、外硫紅螺菌、著色菌等八個類群。</p><p> 光合細菌是自然界中存在的比較古老的細菌類群,廣泛分布于地球生物圈的各處,在海洋、湖泊、江河、水田、污泥、土壤、極地等都有分布,甚至在鹽度為300的鹽湖里、在南極冰封的海岸上、90攝氏度的溫泉水中都能找到
35、[17]。</p><p> 光合細菌的代謝類型多樣,具有光合、固碳、降解大分子有機物、固氮、脫氮、硝化、反硝化、硫化物氧化等多種代謝功能,在自然環(huán)境的自凈過程中具有重要的作用。</p><p> 研究表明:光合細菌的營養(yǎng)成分非常豐富,蛋白質含量高達65%,其氨基酸組成接近輪蟲和枝角類,B族維生素的種類齊全,尤其是維生素B12、葉酸、生物素的含量相當高,是啤酒酵母和小球藻的20 -60
36、倍[17]。從二十世紀五十年代開始,我國對光合細菌進行了一些基礎的理論研究,1987年在上海舉行的“第一屆光合細菌國際學術會議”推動了我國光合細菌的研究和應用。目前為止,光合細菌在水產養(yǎng)殖、污水處理、餌料添加、保健品研發(fā)、藥用、農業(yè)增產等方面得到廣泛的應用。</p><p> 光合細菌在水產養(yǎng)殖上的應用</p><p> 優(yōu)化水質,改善養(yǎng)殖環(huán)境:光合細菌是光能異養(yǎng)細菌,以水中的有機物作
37、為自身生存和生長的營養(yǎng)源,能夠快速分解利用水中的氨態(tài)氮、亞硝酸鹽、硫化氫等有害物質,還能分解水生動物的糞便以及殘餌,有利于藻類和浮游動物的增加,起到保護和凈化水質的作用,在國內外已經進入了生產性應用階段,并取得明顯效果。馬述法等(1989)每天向無沙的養(yǎng)殖池中潑灑光合細菌,測得氨態(tài)氮比對照組少21.33mg∕L,溶解氧增加1.02mg∕L[18]。王緒峨(1994)等在扇貝育苗期減少換水三分之一,每天潑灑光合細菌,氨態(tài)氮降低0.004-
38、0.012mg∕L,PH降低0.05-0.07[19]。于偉君等(1991)將液態(tài)光合細菌拌泥沙撒入養(yǎng)蝦池中,三十天后,氨態(tài)氮比對照組降低了0.08-0.4mg∕L,減少換水了30%。[20]</p><p> 作為動物性生物餌料的餌料:光合細菌營養(yǎng)豐富,個體小只有小球藻的二十分之一是輪蟲、豐年蟲、枝角類等餌料動物的常用餌料。小林正泰(1981)從光合細菌的細胞大小,營養(yǎng)價值,微量成分等方面進行分析,并酵母、小
39、球藻和光合細菌培養(yǎng)枝角類和輪蟲,結果以光合細菌為餌料組枝角類和輪蟲的增殖效果明顯。說明光合細菌在營養(yǎng)價值上優(yōu)于酵母和藻類培養(yǎng)組[21]。張明等(1999)用光合細菌、干酵母、小球藻分別培養(yǎng)枝角類,結果用光合細菌培養(yǎng)的枝角類在生物量上是干酵母組和小球藻組的2-4倍[22]。朱厲華等(1997)利用藻類和光合細菌的混合培養(yǎng)液培養(yǎng)輪蟲,以藻類培養(yǎng)組和酵母培養(yǎng)組為對照組。結果以用藻類和光合細菌的混合培養(yǎng)液培養(yǎng)輪蟲的增殖效果明顯[23]。王鑒等(
40、1994)在培養(yǎng)輪蟲的過程中,利用光合細菌作為餌料添加劑,發(fā)現(xiàn)用光合細菌培養(yǎng)的輪蟲在氨基酸和蛋白質的含量上明顯提高[24]。</p><p> 用于魚蝦貝幼體的培育:光合細菌可以直接或間接的作為魚蝦貝幼苗的初期餌料,對幼體的生長、變態(tài)和提高成活率等方面具有明顯的效果。李光友等(1993)在幼蝦的培育中,投喂光合細菌,結果幼蝦的成活率提高百分之三十,變態(tài)率提高百分之十[25]。劉中等(1995)用光合細菌投喂鰱鳙
41、魚幼苗,成活率和體長明顯提高[26]。丁美麗等(1993)在櫛孔扇貝幼體開始的第12天補充光合細菌,幼體的平均體長增加量高于對照組,發(fā)育成的稚貝數目較對照多[27]。龐全釗等(1995)用光合細菌進行河蟹的育苗試驗,結果河蟹幼體的變態(tài)率提高大約百分之十二[28]。</p><p> 作為飼料添加劑:光合細菌營養(yǎng)豐富,其菌體蛋白質含量在65%左右,還含有輔酶Q和相當完全的B族維生素等對動物生長發(fā)育起促進作用的活性
42、物質,是優(yōu)良的飼料添加劑。除了這些之外,光合細菌還含有大量的維生素K,有很高的餌料價值,幾乎對生物無毒性作用。用光合細菌作為飼料添加劑,可以增加飼料的營養(yǎng)價值。對動物的主要作用有:一、降低飼料系數;二、刺激動物免疫系統(tǒng)的完善,提高抗病能力;三、促進動物腸道內有益微生物的生長繁殖;四、增強消化能力,促進生長。李勤生(1998)用光合細菌作為飼料的添加劑,用此細菌飼料飼養(yǎng)團頭魴和草魚,取得了很好的促生長效果,其中團頭魴魚種的日增重率和總增重
43、率分別是對照組的4.71和5.1倍[29]。劉中等(1995)以光合細菌為成魚養(yǎng)殖飼料的添加劑,經過二個月的飼養(yǎng),在出塘時鯉魚每畝增產11.7%,羅非魚每畝增產達到44.8%[30]。黃鈞等(2000)在養(yǎng)殖對蝦的養(yǎng)殖池中潑灑光合細菌,對蝦的產量增加11.65% —21.35%[31]。</p><p> 預防疾?。吼B(yǎng)殖池中含各種病原菌以及大量的含氮物質,這些細菌能夠理由水中豐富的氮源進行大量的繁殖,從而造成魚
44、蝦類感染疾病。通常在這種情況下使用消毒劑或者抗生素來控制病原菌。但是,大量使用這些抗生素會使一些病原微生物產生抗藥性,從而降低了藥效,造成不必要的經濟損失。光合細菌含有抗病毒因子以及多種免疫促進因子,活化機體的免疫系統(tǒng),強化機體的應激反應,提高機體的抗病能力。在代謝過程中產生和釋放的輔酶是具有消炎作用的抗病因子,對水體中的嗜水氣單胞菌、愛德華氏菌、霉菌等致病菌具有一定的抑制作用,也可防治爛鰓病、水霉病、腸道疾病等多種疾病。</p&
45、gt;<p> 光合細菌除了在水產養(yǎng)殖上的作用外,還在保護環(huán)境、藥用、保健品等方面都有應用,并取得一定的進展。</p><p><b> 4. 實驗設計</b></p><p><b> 4.1 實驗原理</b></p><p> 多刺裸腹蚤營養(yǎng)豐富,游動緩慢,大小適合,以藻類和細菌為食,是水產養(yǎng)殖的
46、餌料生物之一。光合細菌營養(yǎng)豐富,具有光合、固碳、降解大分子有機物、固氮、脫氮、硝化、反硝化、硫化物氧化等多種功能。利用光合細菌培養(yǎng)枝角類可以提高蛋白質和氨基酸的含量,提高枝角類的生物量。在水產經濟動物的育苗過程中具有重要的意義。由于實驗室里的培養(yǎng)容器大小所限,就要求接種后多刺裸腹蚤種群應快速增長,給多刺裸腹蚤種群的增長營造一種“無限”的環(huán)境(空間、食物等資源是無限的),這就要求在培養(yǎng)過程中對水質指標如PH、氨氮等進行監(jiān)測,并保證其餌料持
47、續(xù)不斷地供應。</p><p> 本文利用從天然水體中分離得到的多刺裸腹蚤,以天然水體中的混合藻類投喂多刺裸腹蚤,并在培養(yǎng)水體中加入光合細菌以期達到改善水質、節(jié)約藻類的培養(yǎng)成本、減少換水、提高多刺裸腹蚤的生物量的目的。因其食物的復雜性和光合細菌在增加枝角類蛋白質以及氨基酸含量上的作用,在營養(yǎng)上比只用藻類培養(yǎng)或者單種藻類培養(yǎng)的多刺裸腹蚤要全面,在提高魚苗的成活率上具有重要的意義。在實驗的過程中測定培養(yǎng)容器中培養(yǎng)液
48、的PH值、氨氮含量以及多刺裸腹蚤的生物量,并分析這些因子對多刺裸腹蚤在培養(yǎng)容器中數量的影響。為餌料動物多刺裸腹蚤的實驗室大量培養(yǎng)和集約化培養(yǎng)提供比較系統(tǒng)的理論參考。</p><p> 由于研究的時間有限,本研究僅僅比較了在多刺裸腹蚤的培養(yǎng)過程中加入光合細菌一組與未加光合細菌一組在PH、氨氮的含量和生物量上的變化。在測定PH和氨氮的過程中,由于用的是生產使用的試劑盒,雖說更能貼近生產,但是在精確度上有很大的缺陷。
49、并且由于自身水平所限本實驗得到的結果有待進一步研究。</p><p><b> 計算公式</b></p><p> 平均數=∑x²/n </p><p> 方差=∑﹙x-平均數﹚²/n-1</p><p><b> 4.2 材料和方法</b></p><
50、;p><b> 4.2.1 材料</b></p><p> 蚤種 于2011年5月初在舟山市定海區(qū)新華僑飯店對面的環(huán)城河中采集多刺裸腹蚤,經過篩選,獲得大致相同的懷卵個體,在培養(yǎng)一定時間(大約10個小時)后獲得同齡幼體。</p><p> 餌料 取浙江海洋學院西校區(qū)月亮湖中的水,帶回實驗室并用300目的篩絹網過濾,去除其中的大型非目標生物,進行酸化處理獲得
51、混合藻中,在錐形瓶中進行擴大培養(yǎng)(浙水院3#母液為培養(yǎng)基)。還有從水產藥品店購買的光合細菌凍干粉(無錫中順生物技術有限公司)。</p><p><b> 4.2.2 方法</b></p><p> 一、從舟山定海區(qū)新華僑飯店對面的環(huán)城河中取得水樣,將采集的水樣帶回實驗室,在顯微鏡下從水體中篩選出多刺裸腹蚤,在燒杯中培養(yǎng),取得大致相同發(fā)育程度的懷孕多刺裸腹蚤成體。將
52、這些多刺裸腹蚤成體放入燒杯中繼續(xù)培養(yǎng),第二天早上對其進行觀察,取出新生的幼蚤。一般認為這些幼蚤為同齡個體,將這些幼蚤放入準備好的燒杯中預培養(yǎng),方便實驗取用。</p><p> 二、從海洋學院西校區(qū)月亮湖中取得天然水(水中含有多刺裸腹蚤的餌料以及其它的大型生物和雜質),用300目得篩絹網濾去水中的雜質以及大型生物,根據PH試劑盒的具體操作方法測得湖水的PH值為9.0,此水呈堿性。取過濾過的湖水1000ml加入鹽酸
53、,將PH值調到3,利用強酸性殺滅,其它影響藻類培養(yǎng)的生物,之后加入氫氧化鈉,調整PH值至7.4(此值為環(huán)城河水的PH值),觀察所獲得藻液的顏色,發(fā)現(xiàn)此水中的藻類濃度嚴重偏低,顏色幾乎呈透明,遠不能達到投喂多刺裸腹蚤所需的濃度,利用同樣的方法取得酸化處理過的湖水5000ml,將浙水院3#母液加入水中,以此培養(yǎng)基培養(yǎng)藻類,最后獲得達到要求的餌料,投喂多刺裸腹蚤。</p><p> 三、將獲得的同齡蚤放入10個100
54、0ml的燒杯中,每個燒杯3只,并將其分成二組,A組只加藻,B組加光合細菌和藻類。每天同一個時間,投喂相同量以及相同次數的餌料,每天觀察生長發(fā)育情況,并每隔24個小時(此時間根據參閱相關文獻以及經過預實驗獲得),記錄每個燒杯中蚤的數量。每隔24個小時測定水溫,PH以及氨氮并記錄,完成實驗。</p><p> 多刺裸腹蚤數量記錄表</p><p> 表4-1 A組多刺裸腹蚤數量記錄表<
55、;/p><p> Table 4-1 group A of Moina macrocopa record form</p><p> 表4-2 B組多刺裸腹蚤數量記錄表</p><p> Table 4-2 group B of Moina macrocopa record form</p><p> 每天PH記錄表(水博士PH試劑盒5.
56、5-9.4,北京桑普生物化學技術有限公司)</p><p> 表4-3 A組PH記錄表</p><p> Table 4-3 PH record form of group A</p><p> 表4-4 B組PH記錄表</p><p> Table 4-4 PH record form of group B</p>&
57、lt;p> 氨氮含量記錄表(水博士氨氮試劑盒0.10-1.80mg∕L,北京桑普生物化學技術有限公司)</p><p> 表4-5 A組氨氮記錄表</p><p> Table 4-5 ammonia record form of group A</p><p> 表4-6 B組氨氮記錄表</p><p> Table 4-5
58、 ammonia record form of group B</p><p><b> 4.3 數據處理</b></p><p> 根據多刺裸腹蚤的數量記錄表并用EXCEL軟件處理數據得</p><p> 圖4-1表示A組的每個燒杯中多刺裸腹蚤的數量及其平均值隨時間變化的折線圖</p><p> Figure
59、4-1 A group that many in each beaker Moina and the average number of changes with time line chart</p><p> 圖4-2表示B組的每個燒杯中多刺裸腹蚤的數量及其平均值隨時間變化的折線圖</p><p> Figure 4-2 B group that many in each beak
60、er Moina and the average number of changes with time line chart</p><p> 表4-7 A組和B組每天的多刺裸腹蚤數量的平均值及方差</p><p> Table 4-7 group A and group B more than the daily number of Moina mean and variance&
61、lt;/p><p> 繁殖之后B組平均的蚤體數比A多:∑(20.8-17.6)+(24.6-21.6)+(33.8-25.4)+(36.2-30.8)+(22.4-18.6)+(8-7.4)/6=4.1</p><p> A組每天的平均蚤體數:﹙3+3+3+17.6+21.6+25.4+30.8+18.6+7.4﹚/9=14.5</p><p> B組平均每天的蚤
62、體數比A組多:4.1/14.5=28.3%</p><p> 方差分析:F檢驗1420.9/908.5﹦1.56 ﹤6.39 P﹤0.05說明A組和B組無明顯差異</p><p> T檢驗t=o.12﹤3.83 則A組和B組無明顯差異</p><p> 圖4-3表示A組和B組每天的多刺裸腹蚤數量的平均值隨時間變化的折線圖</p><p&g
63、t; Figure 4-3 group A and group B, said the daily number of Moina average change over time line chart</p><p> 表4-8 A組和B組每天的多刺裸腹蚤數量的方差及其平均值</p><p> Table 4-8 group A and group B more than the
64、daily number of Moina and the average variance</p><p> 表4-8 A組和B組中每天PH平均值(Table 4-8 group A and group B, the average daily PH)</p><p> 圖4-4 A組和B組中各個燒杯的PH平均值隨之間的折線圖</p><p> Figure
65、 4-4 group A and group B the average PH of each beaker with the line chart </p><p><b> 5. 結果與分析</b></p><p> 根據 表4-1和圖4-2得:A組和B組中各個燒杯中多刺裸腹蚤的數量增長曲線基本上一致符合“S”形曲線。但是由圖4-3得到B組的中多刺裸腹蚤的蚤體
66、數量增加比A組快,而且在圖4-3中B組的折線頂點比A組的折線頂點要高,說明光合細菌在增加多刺裸腹蚤生物量上具有一個的作用,但是根據方差分析得到A組和B組之間無明顯差異。這個無明顯差異主要是在數量增加的曲線上無明顯差異。在數量上的差異有待討論,并且實驗設計中每組中燒杯的個數太少,會引起實驗較大的誤差。所以不能否認光合細菌有提高多刺裸腹蚤生物量上的作用,張明等(1999)用光合細菌、干酵母、小球藻分別培養(yǎng)枝角類的實驗結果即光合細菌可以增加枝
67、角類生物量,B組平均每天的蚤體數比A組多28.3%。根據表4-8得:A組的方差平均值(56.5)比B組(46.1)要大,說明在B組中各個燒杯中多刺裸腹蚤數量的增加比A組要平均。由此可見光合細菌在穩(wěn)定多刺裸腹蚤生殖率上也有一定的作用。通過對圖4-3的分析A組和B組在數量增加的時間上幾乎一致,在第三天開始大量繁殖,而且在數量減少的時間段上也是幾乎一致的,第七天開始出死亡現(xiàn)象,第八天大量死亡。第五天和第六天這二天生長最</p>
68、<p> 根據表4-8的數據制得圖4-4,圖4-4中A組PH波動幅度(0.15)比B組(0.08)大0.07, B組的折點要比A組多,而且B組的PH值始終在7.32和7.4之間浮動,可見加入光合細菌能夠緩和PH的波動。對穩(wěn)定培養(yǎng)液的酸堿度,改善多刺裸腹蚤的培養(yǎng)環(huán)境上具有一定的作用,有利于多刺裸腹蚤的大量培養(yǎng)。</p><p> 根據氨氮數據記錄表A組和B組中各個燒杯的氨氮含量幾乎沒有任何的變化。主要
69、是因為培養(yǎng)水體中含有大量的藻類,同時多刺裸腹蚤也在吃大量的藻類使得系統(tǒng)處于動態(tài)的平衡之中,所以氨氮的變化不明顯。</p><p><b> 6. 討論</b></p><p> 6.1 光合細菌在提高多刺裸腹蚤生物量上的作用</p><p> 在實驗結果中得到用藻類和光合細菌的混合培養(yǎng)液和只用藻類培養(yǎng)液多刺裸腹蚤,在提高多刺裸腹蚤的生物量
70、上混合培養(yǎng)液的效果比只用藻類培養(yǎng)的效果要好,B組燒杯中每天的蚤體平均數量都比A組要多。光合細菌能夠提高多刺裸腹蚤的生物量原因有二:一、光合細菌本身就是多刺裸腹蚤的生物餌料,其營養(yǎng)豐富,菌體蛋白質含量高,富含多種氨基酸,還含有輔酶Q和相當完全的B族維生素等對動物生長發(fā)育起促進作用的活性物質。二、光合細菌作為一種水質凈化劑,具有光合、固碳、降解大分子有機物、固氮、脫氮、硝化、反硝化、硫化物氧化等多種代謝功能,具有改善水質的作用。能夠為多刺裸
71、腹蚤的生長繁殖提供良好的理化環(huán)境。</p><p> 6.2 光合細菌在縮短多刺裸腹蚤生殖間隔期上和延緩衰亡期上的作用</p><p> 根據表4得到,A組和B組在數量增加或者減少的時間上幾乎一致,在衰亡時間上也是幾乎一致的。但是不能說明光合細菌在縮短多刺裸腹蚤的生殖間隔期上和延緩衰亡期上沒有作用。因為多刺裸腹蚤的壽命和生殖間隔期相對于人來說本身就很小,而且實驗數據本身就是一天一測,為
72、了方便計數,實驗本身存在時間上存在著誤差,在每天的觀察中發(fā)現(xiàn)加光合細菌組中多刺裸腹蚤比未加光合細菌組要活潑,而且有關研究認為光合細菌作為飲料,可以減少人的衰老因子,所以光合細菌在這方面有待進一步研究。</p><p> 6.3 光合細菌在改善水質方面的作用</p><p> 實驗得到光合細菌在穩(wěn)定水的PH上具有一定的作用,但是根據實驗測到的數據中,它對水質的氨氮含量幾乎沒有任何作用。對
73、整個實驗用到試劑盒和對前人的數據的分析得到:由于測水質氨氮的含量是用生產上使用的氨氮測試盒,只能測試氨氮的大致范圍,在精確度上與精密儀器測試的氨氮含量有一定的差距,比如在實驗過程中使用的試劑盒只能到小數點后一位,但是在前人的報道中,測試得到的數值在小數點后二位,而且在測試過程中用試劑處理過的水樣的顏色與比色卡對照,本身就存在一定的誤差。再者培養(yǎng)水體中含有大量的藻類,由于藻類有吸收氨氮的作用。所以我們不能否認光合細菌在降低水中氨氮含量上的
74、作用,實驗結果有待進一步討論。</p><p><b> 7. 小結</b></p><p> 由于自身水平所限,本實驗所得到的有關光合細菌對多刺裸腹蚤在培養(yǎng)過程中的結論有待進一步研究和探討。</p><p><b> [參 考 文 獻]</b></p><p> [1] 王金秋. 淡水枝角
75、類和輪蟲生態(tài)及批量培養(yǎng)技術的研究[D].華東師范大學, 1997 .</p><p> [2] 曾錯. 多刺裸腹蚤(Moina macrocopa)生殖腺發(fā)育和胚胎發(fā)育的形態(tài)學研究[D].華東師范大學, 2006 . </p><p> [3] 何志輝.不同溫度范圍內隆線蚤和多刺裸腹蚤的生長和生殖的初步觀察[]J.動物學雜志,1965,(l):34一37.</p>&l
76、t;p> [4] 王金秋,張佳憶,黃博. 生態(tài)因子的波動對多刺裸腹溞雄體發(fā)生的影響[J]. 應用生態(tài)學報, 2000, (01) .</p><p> [5] 楊和荃. 利用發(fā)酵草漿培養(yǎng)多刺裸腹蚤的研究[J]. 水產學報, 1995, (01) .</p><p> [6] 石志猛,陸開宏,沈燕連. 不同餌料對多刺裸腹蚤增殖的影響[J]. 齊魯漁業(yè), 2002, (12) .&
77、lt;/p><p> [7] 程漢良,李樹國. 大量培養(yǎng)多刺裸腹蚤的研究[J]. 齊魯漁業(yè), 1994, (04) .</p><p> [8] 王金秋,劉世昌,郭東輝. 面包酵母的投喂密度對3種淡水枝角類種群增長的影響[J].生態(tài)學雜志, 1997,(01) .</p><p> [9] 楊志強. 利用蛋黃培養(yǎng)多刺裸腹溞的初步研究[J].中國水產科學, 2000
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80、p> [14] 何志輝. 溫度對多刺裸腹水蚤(Moina macrocopa)的繁殖力和內稟增長能力(γ_m)的影響[J].大連水產學院學報, 1983,(00) .</p><p> [15] 李庭古. 枝角類生物學特征及人工培養(yǎng)技術要點[J]. 淮海工學院學報(自然科學版), 2001, (S1).</p><p> [16] 王金秋,桑月嬋,堵南山,賴偉. 不同培養(yǎng)條件下
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