煙草內(nèi)生真菌種群多樣性及煙草赤星病生防內(nèi)生菌的篩選.pdf

1、本研究從2007年到2008年以河南省9個田間種植的煙草品種（長脖黃、凈葉黃、金星6007、G28、中煙100、中煙101、NC89、K326、6614）的根、莖、葉為試驗材料，通過兩年的重復(fù)實驗對9個品種不同生育期中煙草內(nèi)生真菌的多樣性及其動態(tài)分布規(guī)律進行了研究，明確了我省煙草內(nèi)生真菌的組成及分布規(guī)律，建立了煙草內(nèi)生菌資源庫。并用獲得的內(nèi)生菌對煙草赤星病病原進行室內(nèi)拮抗活性測定。篩選出了對煙草赤星病菌有較好拮抗活性的菌株，為煙草赤星病

2、菌生物防治研究奠定了基礎(chǔ)。同時研究了煙草赤星病病菌和內(nèi)生鏈格孢菌之間的關(guān)系。 具體結(jié)果如下： 1.內(nèi)生真菌多樣性：對獲得的977個菌株在人工培養(yǎng)條件下進行促進產(chǎn)孢和形態(tài)鑒定，有943株菌株產(chǎn)孢，占總菌株的96.52％，分屬于15個屬，分別是：鏈格孢屬（Alternaria Nees）毛殼菌屬（Chaetomium Kunze et Fr.）、青霉菌屬（Penicilium Link：Fr.）、鐮孢菌屬（FusariumL

3、ink.Fr.）、木霉菌屬（Trichotderma Pers.）、曲霉菌屬（Aspergillus P.Micheli ex Link：Fr.）、黑孢菌屬（Nigrospora Zim.）、炭疽菌屬（Colletotrichum Gorda）、莖點霉屬（Phoma Sacc.）、平臍蠕孢屬（Bipolaris Shoemaker）、單端孢屬（Trichothecium Link）、凸臍蠕孢屬（Exserohilum K.J.Lenoa

4、dSuggs）、擬盤多毛孢屬（Pestalotiopsis Steyaert）、彎孢屬（Curvularia Boedijn）和黑痣菌屬（Phyllachora Nitschke ex Fuckle）。準(zhǔn)確鑒定到種的內(nèi)生真菌有23種，鏈格孢[Alternariaalternate（Fr.：Fr.）Keissler]、甘薯生鏈格孢[Alternaria bataticola（I.kata）Yamamoto]、鄭州鏈格孢（Alternari

5、azhengzhouensis T.Y. Zhang）、繩生毛殼（Chaetomium unicola Cooke）、琥珀色毛殼（Chaetomium succineum L.M. Ames）、賴氏毛殼（Chaetomium raii G.Malhotra&Mukerji）、金色毛殼（Chaetomium aureum Chives）、旋絲毛殼（Chaetominum bostrychodes Zopf）、指狀青霉[Penicilium

6、 digitatum（Pers.：Fr.）Sacc.]、串珠鐮刀菌（Fusarium moniliforme Sheldon）、蕉斑鐮刀菌（Fusarium stoveri Booth）、長枝木霉（Trichoderma longibrachiatum Rifai：）、黑曲霉（Aspergillus.niger Tiegh.）、煙曲霉（Aspergillus. fumigatus Fresen.）、球黑孢[Nigrospora spha

7、erica（Sacc.）Mason]、膠孢炭疽菌[Colletotrichum gloeosporioides（Penzig）Penzig et Saccardo.]、附球莖點霉（Phoma epicoccina Punithalingam）、麥根腐平臍蠕孢[Bipolaris sorokiniana（Sacc.）Shoemaker]、嘴突凸臍蠕孢[Exserohilum rostratum（Drechler）Leonard&Suggs

8、.]、粉紅單端孢菌[Trichotheciumroseum（Pers：）Link：]、煙草擬盤多毛孢（Pestalotiopsis nicotiae W.Han）、新月彎孢[Curvularialunata（Wakker）Boedijn]、煙草黑痣菌（Phyllachora nicotiae W， Han）。其中鏈格孢屬（AlternariaNees）和毛殼屬（Chaetomium Kunze）是煙草內(nèi)生真菌的優(yōu)勢屬，分別占分離總菌株的

9、22.42％和16.27％。在977株菌株中有34株菌株未產(chǎn)孢，占總菌株的3.48％。 2.9個煙草品種整個生育期中內(nèi)生真菌種群動態(tài)：從苗期到成熟期，煙草中的內(nèi)生真菌種類出現(xiàn)率和分離數(shù)的規(guī)律均為：苗期<團棵期<旺長期<成熟期。從團棵期內(nèi)生真菌數(shù)量和種類都開始顯著增加。整個生育期中所檢測到的菌群在旺長期和成熟期全部出現(xiàn)。隨著栽培時間的延長，煙草內(nèi)生真菌的種類和數(shù)量呈遞增趨勢。 3.煙草不同器官中內(nèi)生真菌種群動態(tài)：從煙草的根

10、、莖、葉中分離得到的977株內(nèi)生真菌，葉帶菌量最多，莖次之，根最少；所分離到的菌群也是葉最多，莖次之，根最少；其中根部174株涉及7個屬，莖部365株涉及11個屬，葉部438株涉及14個屬。結(jié)果表明，煙草的不同部位內(nèi)生真菌的數(shù)量、分布和種群存有差異。 4.煙草內(nèi)生真菌年際變動趨勢：對2007年和2008年分離出的煙草內(nèi)生真菌進行比較，發(fā)現(xiàn)優(yōu)勢種屬比較穩(wěn)定，在07、08年都能檢測到，這表現(xiàn)出了內(nèi)生菌優(yōu)勢種穩(wěn)定的一面。個別菌群年際出

11、現(xiàn)率不同。結(jié)果表明煙草內(nèi)生真菌在水平年際間存在差別，具有隨時間有變動的趨勢。 5.內(nèi)生菌拮抗活性：拮抗結(jié)果表明，分離獲得的內(nèi)生菌菌株對病原菌均有不同程度的抑制作用。從煙草分離到的977株內(nèi)生真菌、329株內(nèi)生細菌、11株內(nèi)生放線菌中，篩選出了對煙草赤星病菌有較好拮抗活性的內(nèi)生真菌2株，內(nèi)生細菌4株，內(nèi)生放線菌1株，它們的抑菌率均可達到70％以上。接種實驗結(jié)果證明這7株內(nèi)生菌對煙草均無致病性，初步確定其在生防應(yīng)用方面是安全的。

12、 6.內(nèi)生菌潛在致病性研究：通過形態(tài)比較鑒定煙草內(nèi)生菌優(yōu)勢種鏈格孢和從煙草赤星病病斑上分離到的病原鏈格孢菌株是同一個種。通過對煙草內(nèi)生鏈格孢菌的致病性測定，發(fā)現(xiàn)部分內(nèi)生鏈格孢菌不引起明顯的癥狀，部分內(nèi)生菌可引起不同程度的病交。接種試驗結(jié)果表明，部分內(nèi)生鏈格孢菌在人工接種條件下有明顯致病能力或潛在致病性，初步確定煙草赤星病菌在煙草體內(nèi)具有長期潛伏的特性，當(dāng)環(huán)境條件適宜和寄主易感病時才表現(xiàn)出病害癥狀，該結(jié)果對于煙草赤星病的防治具有重要的