白菜類作物抗根病種質(zhì)資源遺傳多樣性分析及分子標(biāo)記輔助選擇.pdf

1、我國是白菜類作物的主要起源地。近年來大白菜根腫病已成為十字花科植物主要病害之一。利用大白菜遺傳多樣性的分析結(jié)果再對抗根腫病品種進行聚類分析，便可以得到其親緣關(guān)系，并且可以確定出親本間的遺傳距離，進而能夠劃分雜種優(yōu)勢。其次，遺傳多樣性的遺傳資源的研究也是培育大白菜抗根腫病新品種不可或缺的原始素材。同時，利用分子標(biāo)記輔助選擇(MAS)育種可以大大縮短育種年限。利用與抗根腫病緊密連鎖的分子標(biāo)記可以用來對大白菜抗病性狀進行前景選擇，而不用通過耗

2、時接種鑒定來選取抗病單株。
　　本研究首先用78對InDel引物及SSR引物，對抗性基因位于A3染色體上的Y635、Y636材料和抗性基因位于A8染色體上的Y642、Y664材料進行PCR擴增，然后用8％的非變性聚丙烯酰胺凝膠檢測其擴增條帶，篩選出在四份材料間有多態(tài)性、帶型易于判斷、穩(wěn)定性高的29對引物，用于聚類分析圖譜的構(gòu)建。
　　利用篩選出的29對多態(tài)性引物，對50份大白菜抗根腫病F1代群體和1份DH系材料及4份ECD材

3、料進行PCR擴增，根據(jù)基因型不同，為了減小誤差，采用其中的23對SSR引物及InDel引物帶型最易判斷的標(biāo)記，共52個標(biāo)記位點，采用UPGMA(Unweightedpairgroupmethodusinganarithmeticaverage)法，利用NTSYSpc-2.10e版聚類分析軟件構(gòu)建了55份材料的聚類圖。
　　55份聚類分析材料整體上可以分為Ⅰ類和Ⅱ類2個大類。根據(jù)已知材料Y635、Y636和Y642、Y664標(biāo)記位點

4、處在不同的染色體上。可以推測出處于Ⅰ類的33份材料抗根腫病基因有可能位于A3染色體上，處于Ⅱ類的22份材料的抗根腫病基因有可能位于A8染色體上。
　　從聚類圖中分析，當(dāng)相似系數(shù)在0.73左右時，又可以把整個聚類分析材料分成5個亞類。其中Ⅰ類群體可以分為3個亞類，Ⅱ類群體可以分為2個亞類。也可以看出，隨著相似系數(shù)的升高，群體的分類情況也隨之發(fā)生變化，這也反映出親緣關(guān)系的遠近及遺傳背景的差異。從分類結(jié)果上看，各材料的基因型差異較豐富，

5、有特殊基因型差異的材料能夠和大部分材料分開。
　　分別篩選出在抗根腫病Y635、Y636、Y637、Y639群體間有多態(tài)性的標(biāo)記引物各一對，對2013年秋季田間成株的Y635群體的48個株系共955個單株、Y636群體的63個株系共1303個單株、Y637群體的45個株系共1058個單株、Y639群體的21個株系共432個單株進行純合抗性的篩選，經(jīng)PCR擴增，PAGE膠電泳檢測，帶型統(tǒng)計，分別篩選出Y635純合抗性的單株234株、