雞傳染性支氣管炎病毒廣西分離株血清型的鑒定及免疫原性的研究.pdf

1、雞傳染性支氣管炎(infectious bronchitis，IB)是由傳染性支氣管炎病毒(infectious bronchitis virus，IBV)引起的一種高度接觸性、急性傳染病。IBV血清型眾多，不同血清型之間的交叉保護(hù)效果存在著差異，以致生產(chǎn)上往往因為使用的疫苗株與現(xiàn)地流行毒株血清型不一致而導(dǎo)致免疫失敗，給世界各地養(yǎng)禽業(yè)帶來極大的經(jīng)濟損失。因此，及時鑒定本地IBV流行毒株的血清型，篩選理想毒株作為研制適合本地使用的疫苗之候

2、選種毒，并對其免疫原性和交叉免疫保護(hù)性進(jìn)行研究將是一項重要且非常有意義的工作。
　　 首先，在本課題已完成對1985～2008年26個廣西IBV分離株進(jìn)行血清分型并將其分為7個血清型的基礎(chǔ)上，從中選擇代表6個不同血清型的單因子血清對2009～2011年間的20個廣西IBV分離株進(jìn)行雞胚氣管環(huán)中和試驗并鑒定血清型。結(jié)果表明，20個新分離毒株歸屬6個血清型：分離株GX-YL0902、GX-NN1009、GX-NN1013、GX-YL

3、1019、GX-NN110034、GX-NN-4共6個毒株歸為血清1型；分離株GX-NN1012、GX-GL2、GD-KP1033、GX-NN-14共4個毒株歸為血清2型；分離株GX-NN1014、GX-NN1011、GX-NN09093、GX-NN110033、GX-NN-11共5個毒株歸為血清3型；分離株GX-GL1為血清4型；分離株GX-HC1006和GX-NN09032歸為血清5型；分離株GX-YL1121與GX-NN-13歸為

4、血清6型。
　　 第二，在之前研究的基礎(chǔ)之上，選擇了致病力強、代表不同基因型和血清型的4個IBV廣西分離株GX-YL5、GX-YL9、GX-NN7和GX-C與目前生產(chǎn)上廣泛使用的商品疫苗株H120一起，按照國家IBV滅活聯(lián)苗中免疫效力試驗的規(guī)程進(jìn)行免疫原性和交叉免疫保護(hù)性試驗。所有試驗雞在14日齡時皮下接種各個毒株制備的單價滅活油乳劑疫苗(OEV)，在免疫后21d使用各個毒株經(jīng)過滴鼻點眼的途徑進(jìn)行攻毒。以攻毒后各疫苗免疫組雞只的

5、臨床發(fā)病率、死亡率、抗體水平的動態(tài)變化以及在呼吸系統(tǒng)(氣管、肺臟)和泌尿系統(tǒng)(腎臟)的病毒重新分離結(jié)果，作為評價交叉免疫保護(hù)力的指標(biāo)。結(jié)果顯示，滅活油乳劑疫苗免疫組采用IBV強毒攻毒后引起雞只出現(xiàn)輕微的臨床癥狀，發(fā)病率為0～10%，死亡率為0～20%，各組間差異不顯著(p>0.05)；非免疫攻毒對照組出現(xiàn)比較嚴(yán)重的臨床癥狀，發(fā)病率為40%～70%，死亡率為20%～40%，與同一毒株免疫組相比存在極顯著差異(p<0.01)或顯著差異(p<

6、0.05)；采用間接ELISA方法對5組試驗雞免疫前、免疫后7d、14d、21d的血清樣品進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示疫苗免疫后7d即可產(chǎn)生抗體，除GX-NN7疫苗免疫組抗體水平表現(xiàn)出隨時間變化略有下降外，其余免疫組抗體水平均具有隨時間變化呈直線上升的趨勢。至免疫后21d，免疫組雞的血清樣品80%呈抗體陽性。而非免疫對照組抗體水平始終為陰性；攻毒后5d采集的氣管、肺臟和腎臟樣品混合進(jìn)行病毒重新分離的結(jié)果顯示，免疫組樣品病毒檢出率為0～40%，保護(hù)

7、率為60%～100%，各組間交叉保護(hù)力差異不顯著(p>0.05)，極顯著高于非免疫攻毒對照組(p<0.01)。H120滅活疫苗免疫組對4個分離株GX-C、GX-NN7、GX-YL5、GX-YL9組織樣品病毒的檢出率分別為10%、20%、30%、30%，表明目前常用的商品疫苗株不能對當(dāng)?shù)亓餍卸局晏峁┩耆谋Ｗo(hù)；其余4種滅活油乳劑疫苗能對同源或者異源強毒株的攻擊提供比較高的保護(hù)率(60%～100%)，其中GX-YL9的OEV對GX-YL9、