熱應(yīng)激對(duì)小鼠肝臟抗氧化功能的影響及日糧添加TBHQ的緩解作用研究.pdf

1、熱應(yīng)激使家畜采食量減少，機(jī)體營(yíng)養(yǎng)代謝消耗增加和免疫力下降，造成家畜生長(zhǎng)性能和繁殖性能的降低，給畜牧生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。通過營(yíng)養(yǎng)調(diào)控手段，緩解熱應(yīng)激對(duì)動(dòng)物造成的負(fù)面影響，已受到越來越多學(xué)者的關(guān)注。
　　 本試驗(yàn)利用小鼠熱應(yīng)激模型研究熱應(yīng)激對(duì)小鼠肝臟抗氧化功能的影響，并研究熱應(yīng)激小鼠肝臟組織中Keap1-Nrf2/ARE通路相關(guān)基因的表達(dá)水平。另外，探討是否可以通過添加抗氧化劑TBHQ來增強(qiáng)小鼠肝臟的抗熱應(yīng)激能力。
　　

2、 試驗(yàn)一:熱應(yīng)激對(duì)小鼠肝臟抗氧化功能的影響。選用30只8周齡雄性小鼠，每天在相同時(shí)間（11:00至13:00）將小鼠置于恒溫生化培養(yǎng)箱(溫度42℃，相對(duì)濕度60％)中2h。分別在熱處理第1d、2d、4d、8d和12d時(shí)處死小鼠，取出肝臟，檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)，結(jié)果顯示:熱處理后小鼠的體表溫度和直腸溫度都極顯著高于熱處理前(P＜0.01)。熱處理第1d和2d時(shí)，肝臟器官指數(shù)相對(duì)于熱處理前都極顯著升高（P＜0.01），熱處理還導(dǎo)致小鼠肝臟組織充血和

3、肝細(xì)胞水腫增大，說明熱處理引起了小鼠的熱應(yīng)激。相對(duì)于熱處理前，小鼠肝臟組織的MDA含量在熱處理第2d和8d顯著升高，GSH含量、GSH-PX活力和總SOD活力在第4d和12d顯著升高，肝臟組織的抗氧化系統(tǒng)和氧化系統(tǒng)在不斷的相互作用。相對(duì)于熱處理前，Keap1基因的表達(dá)量從熱處理第1d開始顯著降低，Nrf2基因的表達(dá)量在第4d和12d顯著升高，HO-1基因的表達(dá)量在第1d顯著升高，NQO1和GCLC基因的表達(dá)量在第1d和4d顯著升高。熱處

4、理第1d、2d、4d和8d檢測(cè)到Nrf2蛋白在肝細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)表達(dá)。Keap1-Nrf2/ARE通路相關(guān)基因的表達(dá)被激活，肝臟自身的抗氧化系統(tǒng)開始調(diào)節(jié)熱應(yīng)激引起的氧化損傷。
　　 試驗(yàn)二:日糧添加TBHQ對(duì)熱應(yīng)激小鼠肝臟氧化損傷的緩解作用。將35只6周齡雄性小鼠隨機(jī)的分成2組:基礎(chǔ)組和TBHQ組?；A(chǔ)組飼喂基礎(chǔ)日糧，TBHQ組飼喂添加1％ TBHQ的日糧，2周后TBHQ組進(jìn)行熱處理，處理同試驗(yàn)一。試驗(yàn)結(jié)果顯示:TBHQ組中，熱應(yīng)激第

5、1d時(shí)，小鼠的肝臟器官指數(shù)相對(duì)于熱應(yīng)激前極顯著升高（P＜0.01）;熱應(yīng)激第2d、4d和8d時(shí)，肝臟組織的顯微結(jié)構(gòu)和熱應(yīng)激前比較沒有顯著差異，相對(duì)于試驗(yàn)一的結(jié)果，說明日糧添加TBHQ對(duì)肝臟具有一定的保護(hù)作用。熱應(yīng)激前，TBHQ組小鼠肝臟組織的GSH-PX活力和總SOD活力顯著高于基礎(chǔ)組，Keap1基因的表達(dá)量顯著低于基礎(chǔ)組，肝細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)檢測(cè)到Nrf2和HO-1蛋白的表達(dá)，說明日糧添加TBHQ提高了肝臟組織的抗氧化水平。相對(duì)于熱應(yīng)激前，T

6、BHQ組小鼠肝臟組織的GSH含量在熱應(yīng)激第2d降低，GSH-PX活力在第1d、2d和4d降低，日糧添加TBHQ降低了肝臟組織的氧化損傷，肝臟組織的抗氧化酶活性沒有顯著升高。相對(duì)于熱應(yīng)激前，TBHQ組小鼠肝臟組織的Nrf2基因的表達(dá)量在熱應(yīng)激第1d和8d顯著升高，HO-1基因的表達(dá)量在第1d和4d顯著升高，NQO1基因的表達(dá)量在第1d、2d和8d顯著升高，GCLC基因的表達(dá)量在第1d顯著升高，說明Keap1-Nrf2/ARE通路相關(guān)基因的