中華絨螯蟹雄性生殖細胞體外培養(yǎng)的研究.pdf

1、雄性生殖細胞體外培養(yǎng)的研究是生殖生物學研究領(lǐng)域的一個熱點。目前，哺乳動物生殖細胞的體外培養(yǎng)已經(jīng)取得巨大的進展，基本實現(xiàn)了體外培養(yǎng)中精原細胞的增殖分化，精母細胞經(jīng)減數(shù)分裂分化為精細胞的過程。但是體外培養(yǎng)中尚未實現(xiàn)精細胞分化為精子的過程。
　　 相對于哺乳動物的細胞培養(yǎng)，甲殼動物細胞培養(yǎng)開始的比較晚，并且培養(yǎng)主要集中于蝦類血淋巴、心臟和卵巢，而對增殖能力較強的精巢體外培養(yǎng)研究的報道較少。
　　 本文以中華絨螯蟹雄性生殖細胞為

2、研究對象，以細胞的貼壁率、存活率和RNA/DNA比值為生理和生化指標，分別測定了幾種不同滲透壓（600，700，800，900，1000，1100 mmol/L）和pH值（6.8，7.0，7.2，7.4，7.6，7.8）條件下體外培養(yǎng)雄性生殖細胞的生長狀況。指出1000 mmol/L為培養(yǎng)細胞的最適滲透壓，在此滲透壓條件下，培養(yǎng)細胞的貼壁率、存活率、RNA/DNA最大。培養(yǎng)細胞的適宜pH范圍是7.2-7.4，在此pH條件下，細胞的貼壁率

3、、存活率、RNA/DNA均較大。
　　 在此基礎(chǔ)上，觀察了細胞培養(yǎng)和組織培養(yǎng)中細胞的生長情況。實驗發(fā)現(xiàn)，細胞培養(yǎng)中細胞的存活時間短，分裂能力低；組織培養(yǎng)中，細胞的存活時間較長，分裂增殖能力強，且能形成以組織塊為中心的局部單層。
　　 另外，本文研究了添加摘除中華絨螯蟹眼柄血淋巴對體外培養(yǎng)的雄性生殖細胞的影響。結(jié)果表明，摘除眼柄48 h后的血淋巴能促進細胞的生長，RNA/DNA值最大，但不能啟動和促進細胞的分裂，與摘除24