菌根真菌與春蘭共生和寄生的轉(zhuǎn)化研究.pdf

1、蘭科植物作為一種重要的植物資源，具有巨大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和科研價(jià)值。廣義的蘭花是指整個(gè)蘭科植物的總稱(chēng)。由于市場(chǎng)供需矛盾突出，在經(jīng)濟(jì)利益驅(qū)動(dòng)下，由于人為的過(guò)度采集，生境的破壞和喪失，野生蘭科植物資源日趨瀕危。野生狀態(tài)下的蘭花繁殖能力極低，而且必需有真菌的參與才能正常生長(zhǎng)。菌根真菌對(duì)于蘭科植物完成正常的生活史具有不可替代的作用。目前雖然蘭科植物組培技術(shù)的應(yīng)用實(shí)現(xiàn)蘭科植物的產(chǎn)業(yè)化育苗，但是蘭科植物的組培苗的快速生長(zhǎng)技術(shù)卻尚待解決。因此從菌根真菌的角

2、度研究珍稀瀕危蘭科植物的保育工作是十分必要，將菌根技術(shù)應(yīng)用于瀕危蘭科植物的保育將成為一項(xiàng)關(guān)鍵的技術(shù)。探索菌根技術(shù)在蘭科植物保育中的應(yīng)用，解決瀕危蘭科植物在人工栽培中的關(guān)鍵問(wèn)題。本研究是以地生蘭中的春蘭為代表，對(duì)該地生蘭與菌根真菌共生機(jī)制的一些前沿問(wèn)題進(jìn)行闡明，具有重要的學(xué)術(shù)意義，同時(shí)研究成果涉及地生蘭生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)控途徑，可用于指導(dǎo)中國(guó)地生蘭珍貴品種的規(guī)?；a(chǎn)，并為菌根真菌菌劑的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。
　　 蘭科植物菌根

3、作為植物菌根中的一種獨(dú)特類(lèi)型，一直是國(guó)內(nèi)外眾多學(xué)者的研究興趣所在。本研究通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)與菌根化技術(shù)相結(jié)合的手段，研究菌根真菌在地生蘭生長(zhǎng)發(fā)育中的作用，即菌根真菌與地生蘭共生與寄生的轉(zhuǎn)化機(jī)制。以野生春蘭為材料，從春蘭不同生境類(lèi)型的營(yíng)養(yǎng)根中分離獲得菌根真菌。在盆栽條件下，通過(guò)對(duì)組培苗人工接種菌根真菌技術(shù)，設(shè)置了菌根真菌液體菌劑的濃度梯度，篩選菌根真菌共生與寄生轉(zhuǎn)化的臨界濃度。從生物量增長(zhǎng)，幼苗成活率和真菌重分離等方面獲得的證據(jù)表明，已成功

4、獲得菌根真菌液體菌劑對(duì)春蘭盆栽組培苗共生與寄生轉(zhuǎn)化臨界菌劑濃度。通過(guò)上述的研究，可以得出以下結(jié)論：
　　 1.成功獲得了健壯的春蘭無(wú)菌組培苗。春蘭種子無(wú)菌萌發(fā)最適的培養(yǎng)基1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA3.0mg/L+AC0.5g/L+椰子汁l50ml_/L；原球莖增殖的繼代培養(yǎng)基1/2MS+NAA0.1mg/L+6-BA0.5mg/L+AC0.5g/L；生根壯苗的培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.5mg/L+AC2g/L。

5、春蘭無(wú)菌組培苗經(jīng)過(guò)10天左右的煉苗，以鋸末為基質(zhì)，移栽成活率可達(dá)到為100％。
　　 2.從云南等地的野生春蘭新鮮營(yíng)養(yǎng)根中分離得到內(nèi)生真菌菌株，經(jīng)初步鑒定，大致分為15類(lèi)：絲核菌屬、毛殼菌屬、蘭科絲核菌、木霉屬、鐮刀菌屬、小菌核屬、絲孢綱、單端孢屬、青霉屬、頂枝孢、異孢迭球孢霉、團(tuán)絲核菌屬、小菇屬、無(wú)孢菌群和Gliomastix murorum。其中絲核菌屬的菌株最多，為18株，其次是毛殼菌屬12株，再次是鐮刀菌屬9株。