豬源致病大腸桿菌耐藥性及質(zhì)粒介導(dǎo)ESBLs耐藥基因檢測.pdf

1、人和動(dòng)物腸道的正常菌群中大腸桿菌占有一席之地，但有些大腸桿菌卻是人畜共患病原菌。大腸桿菌病在動(dòng)物種群中的流行及爆發(fā)會(huì)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失，由致病性大腸桿菌引起的常見豬流行病有斷奶仔豬水腫病、仔豬黃痢以及仔豬白痢等，這類疾病在豬業(yè)養(yǎng)殖中發(fā)病率和死亡率都較高;為高效治療大腸桿菌引起的豬類疾病，抗菌藥物常常在豬業(yè)養(yǎng)殖中被廣泛且不規(guī)范使用，導(dǎo)致細(xì)菌的耐藥現(xiàn)象尤其是多重耐藥現(xiàn)象日益嚴(yán)重。因此豬源致病性大腸桿菌耐藥現(xiàn)象的研究已成為當(dāng)前科學(xué)研究的熱點(diǎn)及

2、重點(diǎn)。
　　近些年來，隨著β-內(nèi)酰胺類藥物的廣泛使用使得豬源致病性大腸桿菌對其耐藥性有增強(qiáng)的趨勢，故本次試驗(yàn)檢測了江西省臨床分離的豬源致病大腸桿菌的耐藥性，同時(shí)對質(zhì)粒介導(dǎo)的β-內(nèi)酰胺類耐藥基因的流行情況進(jìn)行分析討論，以進(jìn)一步對其耐藥性產(chǎn)生機(jī)制和傳播方式進(jìn)行分析，為日后高效及合理使用藥物提供一定的理論依據(jù)。試驗(yàn)所采用的紙片擴(kuò)散法主要依據(jù)CLSI的標(biāo)準(zhǔn)，按此法檢測67株分離自規(guī)?；B(yǎng)豬場致病大腸桿菌對14種抗生素類藥物的耐藥性強(qiáng)弱，分

3、析比較多重耐藥致病大腸桿菌對14種抗生素類藥物的耐藥率及耐藥情況。試驗(yàn)結(jié)果顯示:由規(guī)?；B(yǎng)豬場分離的67株致病大腸桿菌均表現(xiàn)出多重耐藥表象;其中4-11耐為多重耐藥菌株的主要表現(xiàn)形式，多重耐藥菌株對藥物慶大霉素、頭孢曲松、復(fù)方新諾明、阿米卡星及鏈霉素的耐藥率高達(dá)83％以上，對氯霉素、氟苯尼考及阿莫西林/克拉維酸三種藥物的耐藥率都超過了50％，對頭孢噻呋、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、磷霉素、多西環(huán)素及多粘菌素B相對比較敏感，其中對磷霉素、多西環(huán)素

4、和多粘菌素B的耐藥率更低，耐藥率依次為2.98％、0和0。本試驗(yàn)同時(shí)采用微量稀釋法對67株豬源致病性大腸桿菌的最小抑菌濃度MIC進(jìn)行試驗(yàn)，微量稀釋法所得結(jié)果與紙片擴(kuò)散法所得結(jié)果一致，67株豬源致病性大腸桿菌的主要耐藥表型及耐藥率進(jìn)一步得到證實(shí)。
　　對67株豬源致病性大腸桿菌的標(biāo)準(zhǔn)抗單因子血清型進(jìn)行鑒定，結(jié)果顯示除4株菌株未定型外，共鑒定出63株菌株，占耐藥菌株的94.03％(63/67)。結(jié)果表明這些菌株中共涵蓋了19種血清型，

5、其中O4及O9為江西地區(qū)主要流行的血清型。
　　本試驗(yàn)對67株豬源致病性大腸桿菌ESBLs耐藥基因進(jìn)行檢查，通過PCR凝膠電泳圖觀察到有三種耐藥基因CTX-M、TEM及OXA檢出，而SHV耐藥性基因在這67株豬源致病性大腸桿菌中未見檢出。結(jié)果表明江西地區(qū)主要流行的ESBLs耐藥基因?yàn)镃TX-M、TEM及OXA。
　　本試驗(yàn)得到接合子菌株共30株，菌株的接合率為44.78％。通過藥敏試驗(yàn)可以看出，分離出來的受試菌存在多重耐藥的

6、問題，所得接合菌株與其相對應(yīng)的親本菌株相比也顯現(xiàn)出多重耐藥狀態(tài)，受試菌均有不同程度獲得外源耐藥基因的能力。通過PCR凝膠電泳圖可觀察到接合子菌株也攜帶耐藥基因，說明耐藥基因可以通過接合性質(zhì)粒水平傳播。
　　本次實(shí)驗(yàn)分析了耐藥基因通過質(zhì)粒接合水平傳播后耐藥性表達(dá)的變化。由于耐藥菌株的耐藥基因在水平傳播過程中可能發(fā)生改變，故需加大力度研究豬源致病大腸桿菌接合性質(zhì)粒水平傳播方式，同時(shí)加大對接合性質(zhì)粒水平傳播監(jiān)控力度，這樣可以有效控制大腸