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1、2006年-2008年分別在貴州省開陽(yáng)縣和河南農(nóng)業(yè)大學(xué)科技示范園區(qū)進(jìn)行了大田試驗(yàn)和盆栽試驗(yàn),研究了烤煙葉片細(xì)胞發(fā)育規(guī)律以及細(xì)胞壁糖蛋白積累與葉片開片關(guān)系的研究,結(jié)果如下: 1.烤煙葉片發(fā)育過程中組織和細(xì)胞的變化規(guī)律研究 葉片葉齡1d時(shí),葉肉細(xì)胞排列緊密、規(guī)則,葉片14d葉齡時(shí)柵欄組織和海綿組織分化明顯,柵欄組織細(xì)胞縱向伸長(zhǎng)成柵欄狀,海綿組織細(xì)胞橫向伸長(zhǎng),形狀不規(guī)則,細(xì)胞間出現(xiàn)間隙,葉片28d葉齡時(shí),葉片進(jìn)入旺盛生長(zhǎng)期,柵
2、欄組織和海綿組織開始增厚,59d葉齡時(shí),葉片定長(zhǎng),葉面積擴(kuò)展速率降至最低,63d葉齡時(shí),葉片成熟,細(xì)胞核萎縮,部分細(xì)胞收縮分解,細(xì)胞內(nèi)含絮狀低電子致密物質(zhì),77d葉齡時(shí),大部分細(xì)胞收縮分解,葉片結(jié)構(gòu)已變得非常疏松。 對(duì)細(xì)胞進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)觀察可見葉片在生長(zhǎng)發(fā)育的過程中,細(xì)胞逐漸變大,細(xì)胞壁越來(lái)越厚,細(xì)胞質(zhì)由濃變稀,內(nèi)含物隨著葉片的變長(zhǎng)而逐漸降解,其位置由位于細(xì)胞中央逐漸被不斷膨大的液泡擠至細(xì)胞邊緣:液泡隨著葉片的生長(zhǎng)由小變大,并逐漸
3、發(fā)育為成熟的中央大液泡,把細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞器擠至細(xì)胞邊緣;質(zhì)體由小變大,由未成熟的、只有簡(jiǎn)單的片層結(jié)構(gòu)的前質(zhì)體發(fā)育為成熟的、類囊體片層系統(tǒng)發(fā)達(dá)的葉綠體,其內(nèi)的淀粉粒由無(wú)到有,由小變大;高電子密度的黑色嗜鋨顆粒物質(zhì)由大變小,數(shù)量由少到多。另外,幼葉的表皮層細(xì)胞內(nèi)含有細(xì)胞核和較濃的細(xì)胞質(zhì),葉片成熟時(shí)這些物質(zhì)降解,到葉片過熟時(shí)只剩下細(xì)胞壁。 柵厚/海厚的值在整個(gè)發(fā)育期無(wú)明顯變化,柵厚/葉厚的值呈鋸齒狀,當(dāng)葉片接近成熟時(shí),柵厚/葉厚的值達(dá)到
4、最大,對(duì)煙葉品質(zhì)的提高有積極的作用,在葉片發(fā)育的第56~63天是下部葉成熟的最佳時(shí)期,70天后葉片過熟,葉片內(nèi)部各個(gè)結(jié)構(gòu)開始降解。 2.烤煙葉片發(fā)育過程中組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)變化規(guī)律 從葉片發(fā)生至葉片成熟,還原糖、淀粉、脂類物質(zhì)的含量一直保持上升的趨勢(shì);調(diào)制過程中淀粉和脂類物質(zhì)的含量逐漸降低,而還原糖含量在進(jìn)行調(diào)制時(shí)突然有較大程度的上升,分析其原因可能是因?yàn)榈矸鄣忍妓衔锊粩喾纸廪D(zhuǎn)化為了還原糖;蛋白質(zhì)含量在整個(gè)發(fā)育階段連
5、續(xù)降低,至成熟期時(shí)有一個(gè)大幅度的降低,至調(diào)制結(jié)束時(shí)含量降至最低。 在葉片進(jìn)入旺盛生長(zhǎng)期時(shí),細(xì)胞擴(kuò)展速度達(dá)到最大值,細(xì)胞壁糖蛋白層已經(jīng)出現(xiàn)且緊固于細(xì)胞壁表面,隨著發(fā)育時(shí)間的延長(zhǎng),糖蛋白層開始出現(xiàn)增多并且連為一體,直到處理的第40天即葉片趨近成熟時(shí)糖蛋白層開始出現(xiàn)脫落。 3.逆境條件下煙葉發(fā)育過程中細(xì)胞壁Expansins變化規(guī)律 正常生長(zhǎng)條件下附著在細(xì)胞壁上的糖蛋白先是逐漸增多,凝聚成一層,然后逐漸脫落;與正常生長(zhǎng)
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