玉米幼胚培養(yǎng)系統(tǒng)優(yōu)化及硝態(tài)氮代謝與幼胚培養(yǎng)關(guān)系的研究.pdf

1、針對(duì)玉米自交系較難誘導(dǎo)高質(zhì)量愈傷組織的問(wèn)題，本試驗(yàn)以鄭22、掖478和鄭58三個(gè)自交系為材料，研究了不同激素、不同濃度及其配比對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)和生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明：愈傷組織誘導(dǎo)率和愈傷質(zhì)量存在基因型差異，對(duì)鄭22較易誘導(dǎo)出高質(zhì)量愈傷的材料，可直接用含2mg·L-12，4-D的誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)，用添加2mg·L-12，4-D的培養(yǎng)基進(jìn)行繼代培養(yǎng)；對(duì)于鄭58和掖478等較難誘導(dǎo)愈傷的材料，可使用2～3mg·L-1的麥草畏誘導(dǎo)，再用添加2mg·

2、L-12，4-D的培養(yǎng)基繼代培養(yǎng)。 本研究同樣證實(shí)，同一基因型的材料隨著繼代次數(shù)的增加，愈傷組織生長(zhǎng)量及植株再生率明顯下降，且自交系生長(zhǎng)量與植株再生率普遍低于雜交組合；Ⅱ型愈傷如齊319經(jīng)多次繼代后生長(zhǎng)量與植株再生率均無(wú)明顯下降。為保持長(zhǎng)期繼代愈傷組織的胚性，提高植株再生率，在分化前對(duì)愈傷組織進(jìn)行了48h干燥處理，再生苗率平均比對(duì)照提高57.39％，最高為對(duì)照的11倍。此外又用不同濃度的ABA、山梨醇及干燥48h在繼代與分化前對(duì)

3、愈傷組織進(jìn)行預(yù)處理，結(jié)果表明：（1）適當(dāng)濃度的山梨醇能夠加快愈傷組織的生長(zhǎng)，其適宜濃度為4％或5％；ABA處理對(duì)愈傷組織生長(zhǎng)量的影響不明顯；48h干燥處理后，所有基因型愈傷組織的生長(zhǎng)量比對(duì)照均有顯著提高。（2）三種處理的植株再生率均高于對(duì)照，其中干燥48h處理的效果最好，ABA在提高植株再生方面相對(duì)比較明顯，再生苗率最大值多出現(xiàn)在3mg·L-1ABA處理中；三種方法均能明顯加快植株再生進(jìn)程。從提高愈傷組織生長(zhǎng)量、植株再生率及加快再生進(jìn)程

4、方面綜合分析，干燥48h處理的效果最好，并且操作簡(jiǎn)便，沒(méi)有基因型的差異，具有廣泛的適應(yīng)性。 基于ABA在提高植株再生方面優(yōu)于山梨醇的特點(diǎn)，將愈傷組織在繼代與分化前用不同濃度ABA預(yù)處理一周與將愈傷組織放在含ABA的繼代和分化培養(yǎng)基上直接培養(yǎng)對(duì)生長(zhǎng)量和植株再生率的影響進(jìn)行比較分析，結(jié)果顯示：直接用含ABA的繼代培養(yǎng)基培養(yǎng)，愈傷組織生長(zhǎng)能力普遍較低，而用ABA預(yù)處理一周后，生長(zhǎng)量普遍較對(duì)照有所提高；用3mg·L-1ABA進(jìn)行預(yù)處理，

5、愈傷組織生長(zhǎng)量明顯高于其他濃度處理；另外，3mg·L-1ABA預(yù)處理可使長(zhǎng)期繼代的愈傷組織植株再生率提高25.71％，且第二周平均植株再生率可達(dá)22.6％，而直接生長(zhǎng)在含ABA的分化培養(yǎng)基上的材料第二周無(wú)再生苗，可見(jiàn)，3mg·L-1ABA預(yù)處理對(duì)提高生長(zhǎng)量和植株再生率及加快再生進(jìn)程均有一定的促進(jìn)作用。氮代謝是植物體內(nèi)最基本的物質(zhì)代謝之一，亞硝酸積累對(duì)細(xì)胞有毒害作用，有關(guān)氮代謝及其他生理因素對(duì)玉米愈傷組織生長(zhǎng)量和植株再生的影響尚未見(jiàn)詳細(xì)報(bào)

6、道。本文對(duì)玉米自交系在脫分化、繼代及分化過(guò)程中的硝態(tài)氮代謝進(jìn)行了研究，對(duì)同一基因型不同類(lèi)型的愈傷組織及經(jīng)干燥48h處理的愈傷組織的氮代謝進(jìn)行了比較分析。研究表明：（1）不同基因型脫分化過(guò)程中氮代謝存在差異，各基因型硝酸鹽含量差異不顯著，而亞硝酸還原酶活性自交系本地白最低，其他基因型為本地白的2～2.7倍，另外本地白的亞硝酸鹽積累量明顯高于其他基因型。（2）繼代與分化過(guò)程中，掖478的NiR活性均較高而其亞硝酸鹽含量也較高，雖能長(zhǎng)期繼代但