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文檔簡介
1、煙草黑脛病是煙草產(chǎn)生連作障礙的主要病害之一,其病原菌為疫霉菌Phytophthora parasitica var.nicotianae,該病害的防治方法已成為煙草生產(chǎn)的研究熱點(diǎn).生物防治是目前研究克服土傳病害的重要途徑之一,因?yàn)樯锓乐尉哂锌共『铜h(huán)保的作用,而獲得高效拮抗菌株是進(jìn)行生物防治研究的基礎(chǔ)。
本研究從云南和安徽黑脛病重病煙田中采集健康植株根際土壤,從中共分離出細(xì)菌289株,通過平板對峙法從中篩選出對煙草疫霉(P
2、hytophthora parasitica var.nicotianae)具有拮抗作用的12株細(xì)菌,抑菌率59.4%~71.1%;其中C-5菌株的拮抗活性最高,抑菌率為71.1%,抑菌直徑達(dá)到2.8cm.
C-5菌株不僅對煙草黑脛病病原菌有較強(qiáng)的拮抗作用,同時(shí)對其他多種病原菌也具有拮抗作用,抑菌率均達(dá)53.3%以上。其中對甜瓜枯萎病病原菌的抑菌率高達(dá)73.3%;對青椒疫病、棉花枯萎病病原菌的抑菌率為66.7%和66.8%
3、;對香蕉、黃瓜枯萎病以及黃瓜立枯病病原菌的抑菌率達(dá)53.3~55.0%;而對西瓜枯萎病病原菌卻沒有抑制作用.
采用傳統(tǒng)的細(xì)菌系統(tǒng)鑒定方法鑒定拮抗菌株C-5,結(jié)果發(fā)現(xiàn)它與多粘芽孢桿菌和多粘類芽孢桿菌都很相似,但無法精確確定其分類地位.采用16SrDNA序列分析法從分子角度確定菌株C-5的分類地位,結(jié)果表明菌株C-5與多粘類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)的同源性為100%,最終鑒定其為多粘類芽孢桿菌。
4、
通過對C-5產(chǎn)酶能力的研究發(fā)現(xiàn),菌株C-5具有產(chǎn)纖維素酶和蛋白酶的能力。其中產(chǎn)蛋白酶的水解圈達(dá)到23 mm,產(chǎn)纖維素酶的水解圈達(dá)到3.3 mm,這可能在抗真菌上發(fā)揮一定的作用,當(dāng)然,這并不排除其他酶或未知拮抗成分也在拮抗過程中發(fā)揮著作用。
對菌株C-5的培養(yǎng)條件進(jìn)行的初步測定結(jié)果表明,菌株C-5在30℃、pH7.0、裝液量為20%條件下生長最好,其最適碳源和氮源分別為蔗糖、蛋白胨,葡萄糖和硫酸銨次之。
5、> 盆栽試驗(yàn)證明:利用C-5菌株制備的微生物有機(jī)肥能有效防治煙草黑脛病的發(fā)生,苗期防治率達(dá)80%;C-5菌株及其微生物有機(jī)肥的使用能改變根際土壤的微生物區(qū)系,和連作土壤(CK2)相比,使用微生物有機(jī)肥處理(MOF)和單加拮抗菌處理(ANT)的土壤中真菌數(shù)量減少,細(xì)菌和放線菌數(shù)量有顯著增加.其中,細(xì)菌分別為CK2的2.4倍、3.5倍左右;放線菌為CK2的4.4倍左右、11.9倍左右.與CK2相比,MOF的鮮重、干重和株高分別增加約1
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