氟苯尼考混懸乳劑注射液毒理學及在豬體內殘留的初步研究.pdf

1、氟苯尼考又名氟甲砜霉素，是美國先靈-葆雅公司于1988年研發(fā)的一類動物專用的氯霉素類抗生素。氟苯尼考抗菌譜廣、吸收良好、在體內分布廣泛、無殘留或殘留量很低、無潛在性致再生障礙性貧血作用等，自1990年首次在日本上市用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)以來，被廣泛應用于水產(chǎn)魚類及牛、豬、雞等畜禽細菌性疾病的防治。1999年，我國批準該藥為國家二類新獸藥，用于豬、牛、禽類等多種動物細菌性疾病的防治。目前常用的劑型有預混劑、注射劑、可溶性粉等。目前國內外對于氟苯尼

2、考混懸乳劑注射液的毒理學文獻報道很少，同時也無氟苯尼考及氟苯尼考胺在豬體內殘留的研究報道。本課題通過對氟苯尼考混懸乳劑注射液毒理學及在豬體內殘留的初步研究，為臨床用藥提供理論依據(jù)，同時為估算氟苯尼考混懸乳劑注射液在豬體內的休藥期提供參考。
　　 1氟苯尼考混懸乳劑注射液的毒理學研究
　　 本試驗就氟苯尼考混懸乳劑注射液對昆明種小鼠的急性毒性、蓄積毒性、亞慢性毒性、致突變毒性和對SD大鼠的致畸毒性進行了研究。采用改良寇氏法

3、進行了對小鼠的急性毒性試驗，求得半數(shù)致死劑量（LD50）和劑量-死亡率曲線。采用蓄積系數(shù)劑量遞增法進行了對小鼠的蓄積毒性試驗，并進行了耐受性試驗；設高（1/5 LD50）、中（1/10 LD50）、低（1/20 LD50）三個劑量組，另設有機溶劑和生理鹽水對照組，連續(xù)28 d對小鼠腹腔注射20％氟苯尼考混懸乳劑注射液，進行了亞慢性毒性試驗。結果：氟苯尼考混懸乳劑注射液小鼠口服的LD50大于5000 mg·kg-1，按照外源化學物相對毒性

4、分級標準屬于實際無毒藥物。其腹腔注射LD50為3140 mg·kg-1，LD50的95％可信限為2930～3370 mg·kg-1。蓄積毒性試驗中無小鼠死亡，蓄積系數(shù)K>5，表明氟苯尼考在小鼠體內有弱蓄積。耐受性試驗表明，試驗組小鼠對氟苯尼考乳劑注射液產(chǎn)生了一定程度的耐受性。亞慢性毒性試驗中，試驗前1周高劑量組小鼠有輕微中毒癥狀：豎尾、搔鼻、輕度興奮和驚跳，增重緩慢，其它試驗組和對照組小鼠生長活動基本正常，試驗期內無小鼠死亡。血常規(guī)和血

5、生化指標檢查結果表明，在此試驗條件下，氟苯尼考混懸乳劑注射液對小鼠血常規(guī)指標和肝腎功能有一定的影響。此外，病理學組織檢查結果表明，高劑量組小鼠肝臟和腎臟有炎癥反應，其它各組臟器無明顯病理變化。小鼠精子畸形和骨髓微核試驗結果均呈陰性，表明氟苯尼考混懸乳劑注射液對小鼠無致突變毒性。大鼠致畸試驗結果表明，在此試驗條件下，氟苯尼考混懸乳劑注射液對SD大鼠有一定的胚胎毒性。氟苯尼考混懸乳劑注射液的毒理學研究結果初步表明，該藥臨床應用毒性小，安全范

6、圍廣。
　　 2氟苯尼考及氟苯尼考胺在豬體內殘留的初步研究
　　 建立了高效液相色譜法（HPLC）檢測豬體內氟苯尼考及代謝標識物氟苯尼考胺的殘留。以20 mg·kg-1單次劑量于豬股四頭肌肌肉注射20％氟苯尼考混懸乳劑注射液。于給藥后的第1、2、3、5，9、14、20、25天剖殺采樣。豬前腔靜脈放血致死，快速取其肝臟、腎臟、肺臟、肌肉、皮膚+脂肪等組織。樣品組織經(jīng)勻漿、提取、濃縮、凈化、有機濾膜過濾后，樣品上機檢測。結果

7、顯示：氟苯尼考和氟苯尼考胺在10～1000μg·kg-1組織濃度范圍內，線性關系良好，相關系數(shù)R2均大于0.99，最低檢測限為10μg·kg-1。將氟苯尼考和氟苯尼考胺以高、中、低（500、100、20μg·kg-1）3個濃度水平分別添加到空白組織中進行添加回收率和精密度試驗，測得肌肉、肝臟、腎臟、肺臟、脂肪+皮膚組織中氟苯尼考和氟苯尼考胺回收率均大于75％，日內變異和日間變異RSD％均小于10％。殘留消除研究結果顯示：氟苯尼考及氟苯尼

8、考胺在動物組織中分布較廣，其中肝臟含量最高，其次為腎臟和肺臟，皮脂中藥物含量也較高，肌肉中最低。豬單劑量肌肉注射氟苯尼考混懸乳劑注射液后的前5天，各組織內氟苯尼考及氟苯尼考胺消除較快，停藥后的6～14天，消除速率趨于平緩，停藥后的第25天各組織中均檢測不到氟苯尼考及氟苯尼考胺。殘留消除曲線表明，氟苯尼考及氟苯尼考胺在豬體內的殘留消除很快，殘留量低。根據(jù)歐盟、中國國家標準及試驗結果，以單劑量20 mg·kg-1給豬肌肉注射20％氟苯尼考混