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1、1.生防菌的分離、篩選及其生物學(xué)特性的研究本試驗(yàn)從甘肅各地采集的179份土樣中分離得到481株細(xì)菌,對(duì)10種以上病原真菌有抑制作用的細(xì)菌有89株;用抑菌帶-定殖力雙重測(cè)定法,從中篩選出3株在辣椒根際定殖能力最好、抑制辣椒疫霉菌能力較強(qiáng)的生防菌F-152、Q-28和O-39。 生防菌生物學(xué)特性試驗(yàn)結(jié)果表明,3菌株的最適培養(yǎng)時(shí)間為20~28h;最適培養(yǎng)溫度為30~37℃;最適培養(yǎng)液PH為6~8;通氣量對(duì)3菌株的生長(zhǎng)影響不明顯。F-1
2、52生長(zhǎng)的最適NaCL濃度為0.17%,蔗糖濃度為9%;Q-28和O-39生長(zhǎng)的最適NaCL濃度為1.5%,蔗糖濃度為3%。 2.生防菌的鑒定經(jīng)培養(yǎng)性狀和形態(tài)學(xué)特征的觀察及生理生化特征的測(cè)定,初步鑒定F-152、Q-28和O-39菌株均為多粘類芽孢桿菌(Paenibacilluspolymyxa),但3菌株的培養(yǎng)性狀和生理生化特征各有不同。F-152和O-39菌株的16SrDNA序列分析結(jié)果表明,它們分別與GenBank中已報(bào)道
3、的Paenibacilluspolymyxa16SrDNA序列(登錄號(hào):AY302439和AY359622)有99%的相似性,由系統(tǒng)樹(shù)可見(jiàn)F-152與O-39的親緣關(guān)系較遠(yuǎn),證實(shí)了形態(tài)特征與生理生化鑒定結(jié)果。F-152和O-39菌株保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC),保藏號(hào)分別為M206041和M206042。 3.生防菌在辣椒根部及根圍土中的定殖動(dòng)態(tài)研究本試驗(yàn)結(jié)果表明,生防菌高濃度接種在辣椒根部及根圍土中的定殖濃度始終
4、高于低濃度接種的定殖密度,高濃度接種F-152、Q-28和O-39的定殖消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)都是先降后升再降并逐漸保持穩(wěn)定,到60天時(shí),定殖密度仍可保持在3-5個(gè)數(shù)量級(jí);接種辣椒疫霉菌對(duì)F-152的定殖影響較大,O-39次之,對(duì)Q-28的定殖影響不太明顯;先接種生防菌后接種辣椒疫霉菌對(duì)生防菌的定殖影響較小,相反則影響較大。 4.生防菌室內(nèi)抑菌控病效果研究抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明,3菌株的無(wú)菌濾液對(duì)辣椒疫霉菌的抑制率較低,但滅菌培養(yǎng)液的抑菌率有明顯提
5、高。3株生防菌浸種對(duì)辣椒種子發(fā)芽率都有明顯的提高。溫室試驗(yàn)結(jié)果表明,采用培養(yǎng)液灌根接種生防菌,以先接種生防菌,5天后接種病原菌,2天后再接種生防菌,待發(fā)病后再接種生防菌的方法處理,可得到最好的防治效果,即O-39、Q-28和F-152培養(yǎng)液28天時(shí)的防治效果分別為90.63%、88.40%和67.04%。 5.F-152與B-21原生質(zhì)體融合選育多功能生防菌通過(guò)對(duì)能有效定殖于辣椒根際的多粘類芽孢桿菌F-152(Rif+、Em-)
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