巴音布魯克羊、德國(guó)美利奴羊、多浪羊BMPR-IB、BMP15、GDF9、MC4R、CAST基因的研究.pdf

1、綿羊育種主要是改善其生長(zhǎng)和繁殖性狀。迄今為止已發(fā)現(xiàn)了一些控制這些生長(zhǎng)和繁殖性狀的基因，比如，BMPR-IB、BMP15和GDF9已被確認(rèn)為綿羊的高繁殖力主效基因;黑素皮質(zhì)素受體-4(melanocortin-4 receptor，MC4R)是一類G-蛋白偶聯(lián)受體，主要在下丘腦表達(dá)，在體重、能量平穩(wěn)和采食量的調(diào)控中發(fā)揮重要作用。鈣蛋白酶抑制蛋白(calpastatin，CAST)是鈣蛋白酶系統(tǒng)的主要成員之一，它是鈣激活蛋白酶的抑制因子，可

2、以通過(guò)激活鈣蛋白酶或降低鈣蛋白酶抑制蛋白的活性來(lái)提高肌肉的嫩度，改善肉質(zhì)。
　　 本研究利用連接酶檢測(cè)反應(yīng)(ligase detection reaction，LDR)技術(shù)及生物信息學(xué)技術(shù)，檢測(cè)了綿羊繁殖候選基因BMPR-IB、BMP15和GDF9在巴音布魯克羊(含低產(chǎn)和高產(chǎn)兩個(gè)群體)、德國(guó)美利奴羊、多浪羊中的多態(tài)性，并分析了其多態(tài)性與產(chǎn)羔性狀的關(guān)系;同時(shí)檢測(cè)了生長(zhǎng)性狀候選基因MC4R和CAST在德國(guó)美利奴羊中的多態(tài)性并分析了其

3、與部分產(chǎn)肉性狀的關(guān)系，為綿羊的標(biāo)記輔助選擇提供了參考依據(jù)。本研究主要包括以下內(nèi)容:
　　 Ⅰ以巴音布魯克羊普通群(100只，B群)和多羔小群(20只，A群)、內(nèi)蒙古有完整產(chǎn)羔記錄的德國(guó)美利奴羊、巴州的多浪羊?yàn)檠芯繉?duì)象，采用LDR技術(shù)，對(duì)BMPR-IB，BMP15和GDF9三個(gè)高繁殖力基因的10個(gè)位點(diǎn):BMPR-IB基因FecB突變位點(diǎn)，BMP15基因上FecXI、FecXB、FecXL、 FecXH、FecXG和FecXR突變住

4、點(diǎn)以及GDF9基因上G1、G8和FecTT突變位點(diǎn)，進(jìn)行單核苷酸多態(tài)性(single nucleotidepolymorphism，SNP)檢測(cè)，以比較BMPR-IB基因、BMP15基因和GDF9基因在巴音布魯克羊普通群和多羔小群、德國(guó)美利奴羊及多浪羊中的多態(tài)性，并與產(chǎn)羔性能進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。
　　 Ⅱ以內(nèi)蒙古有完整生長(zhǎng)、產(chǎn)肉性能(初生重、背膘厚度、眼肌面積、日均增重)測(cè)定記錄的德國(guó)美利奴羔羊?yàn)檠芯繉?duì)象，采用LDR技術(shù)對(duì)MC4R基因

5、上4個(gè)突變位點(diǎn)、CAST基因第二外顯子上7個(gè)突變位點(diǎn)進(jìn)行SNP檢測(cè)，并與生長(zhǎng)、產(chǎn)肉性能進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。
　　 主要結(jié)果是:
　　 1 BMPR-IB基因在巴音布魯克羊、德國(guó)美利奴羊、多浪羊中的多態(tài)性及其與產(chǎn)羔數(shù)的相關(guān)性
　　 在巴音布魯克羊群中發(fā)現(xiàn)了BMPR-IB/FecB基因突變。其中，A、B兩群的野生型(Fec++)、雜合型(FecB+)和突變型(FecBB)基因型頻率分別為0.15、0.7、0.15和1.0、

6、0、0，對(duì)應(yīng)的野生型和突變型基因頻率分別為0.5、0.5和1.0、0。 A群與B群獨(dú)立性檢驗(yàn)結(jié)果表明，F(xiàn)ecB多態(tài)位點(diǎn)對(duì)巴音布魯克羊群體的產(chǎn)羔數(shù)具有極顯著影響。據(jù)此推測(cè):BMPR-IB/FecB可確認(rèn)為影響巴音布魯克羊多羔群產(chǎn)羔數(shù)的主效基因，并可以此遺傳標(biāo)記對(duì)該群體的繁殖力性狀實(shí)施標(biāo)記輔助選擇。在德國(guó)美利奴羊和多浪羊中未發(fā)現(xiàn)BMP-IB/FecB突變，由此推斷，BMPR-IB/FecB突變與德國(guó)美利奴羊和多浪羊的繁殖性能無(wú)關(guān)聯(lián)。

7、　　 2 BMP15基因在巴音布魯克羊、德國(guó)美利奴羊、多浪羊中的多態(tài)性及其與產(chǎn)羔數(shù)的相關(guān)性
　　 在三個(gè)品種中均未檢測(cè)到BMP15基因上的FecXI、FecXB、FecXL、FecXH、FecXG和FecXR等6個(gè)位點(diǎn)發(fā)生突變，據(jù)此推測(cè):6個(gè)關(guān)聯(lián)高繁殖力的BMP15基因的突變與巴音布魯克羊、德國(guó)美利奴羊、多浪羊的繁殖力無(wú)關(guān)聯(lián)。
　　 3 GDF9基因在巴音布魯克羊、德國(guó)美利奴羊、多浪羊中的多態(tài)性及其與產(chǎn)羔數(shù)的相關(guān)性

8、r>　　 在巴音布魯克羊、德國(guó)美利奴羊GDF9基因上檢測(cè)到了G1突變，但未檢測(cè)到FecGH(G8)、FecTT突變， G1突變?cè)诘聡?guó)美利奴羊達(dá)到中度多態(tài)，在所檢測(cè)群體中均處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)，但其多態(tài)與產(chǎn)羔數(shù)的相關(guān)性不顯著;在多浪羊中未檢測(cè)到GDF9基因的三個(gè)突變位點(diǎn)。據(jù)此推測(cè):GDF9基因的上述位點(diǎn)不是影響巴音布魯克羊、德國(guó)美利奴羊、多浪羊產(chǎn)羔數(shù)的主效基因。
　　 4 MC4R基因在德國(guó)美利奴羊中的多態(tài)性

9、及其與部分產(chǎn)肉性狀的相關(guān)性
　　 在德國(guó)美利奴羊MC4R基因上檢測(cè)到了G309A、G508A、G1232A和T1456C4個(gè)突變。各突變位點(diǎn)在所檢測(cè)群體中處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)，其中G1232A突變位點(diǎn)達(dá)到中度多態(tài)，其余三個(gè)位點(diǎn)為低度多態(tài)。4個(gè)突變位點(diǎn)中，G309A突變AA型背膘厚極顯著高于GG型(P＜0.01);AG型背膘厚顯著高于GG型(P＜0.05)，眼肌面積、出生重AA型顯著高于AG型、GG型(P＜0.

10、05); G1232A突變背膘厚AA型、AG型顯著高于GG型(P＜0.05);日增重AA型顯著高于GG型(P＜0.05)。據(jù)此推測(cè):MC4R基因是影響德國(guó)美利奴羊生產(chǎn)性狀的QTL或與控制這些性狀的QTL有連鎖，因此有關(guān)標(biāo)記將來(lái)可能用于這些性狀的標(biāo)記輔助選擇。
　　 5 CAST基因在德國(guó)美利奴羊中的多態(tài)性及其與部分肉用性狀的相關(guān)性
　　 德國(guó)美利奴羊在CAST基因上存在CAST3-1、CAST3-2、CAST3-3、CA