硫丹對(duì)土壤酶活性影響及其高效降解菌JBW4的篩選和降解特性.pdf

1、本文以硫丹（Endosulfan）作為主要的研究對(duì)象，研究了不同濃度的硫丹對(duì)土壤酶活性（土壤過(guò)氧化氫酶、土壤蛋白酶及土壤蔗糖酶）的影響，并通過(guò)富集培養(yǎng)的方法從曾生產(chǎn)過(guò)硫丹原藥的工廠廢水中篩選到一株高效硫丹降解細(xì)菌JBW4。對(duì)此菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)、生理生化及16SrDNA鑒定，初步確定為產(chǎn)堿菌屬糞產(chǎn)堿菌種（Alcaligenes.faecalis.）。本論文對(duì)降解微生物的富集分離，環(huán)境條件對(duì)JBW4的影響以及硫丹在JBW4降解作用下的降解產(chǎn)物

2、做了系統(tǒng)的研究。主要研究?jī)?nèi)容如下：
　　 1、為了探明硫丹對(duì)土壤環(huán)境的影響，研究了在0.1、1.0、10.0μg·g-1的硫丹濃度下土壤過(guò)氧化氫酶、蛋白酶和蔗糖酶活性的變化。結(jié)果表明：低濃度的硫丹（0.1μg·g-1和1.0μg·g-1）對(duì)土壤過(guò)氧化氫酶活性幾乎沒(méi)有影響；較高濃度硫丹（10.0μg·g-1）對(duì)土壤過(guò)氧化氫酶活性表現(xiàn)出先激活后抑制的效應(yīng)；硫丹對(duì)土壤蛋白酶的抑制作用隨著土壤中硫丹濃度的增大逐漸增強(qiáng)的，但隨著時(shí)間的延長(zhǎng)

3、，不同濃度土壤蛋白酶活性的差異越來(lái)越??；低濃度硫丹對(duì)土壤蔗糖酶活性有一定的抑制作用，而高濃度硫丹對(duì)土壤蔗糖酶活性影響不大。
　　 2、通過(guò)富集培養(yǎng)法和直接培養(yǎng)法分離出數(shù)個(gè)硫丹的高效降解細(xì)菌：JBW4、JBW1、JBW2、JBM3。其中JBW1、JBW2及JBM3為混合菌。這些菌在30℃、中性條件下，5d內(nèi)對(duì)100μg·mL-1的硫丹均達(dá)到60％以上，其中單菌JBW4對(duì)硫丹的降解率最高，經(jīng)過(guò)對(duì)其形態(tài)、生理生化特征及16SrDNA的

4、分析，鑒定為產(chǎn)堿菌屬糞產(chǎn)堿菌種（Alcaligenes faecalis.），最終選定JBW4高效降解細(xì)菌硫丹作為下一步深入研究的菌株。
　　 3、測(cè)定了不同pH、溫度、硫丹濃度及接菌量對(duì)細(xì)菌JBW4降解能力和生長(zhǎng)量的影響。結(jié)果表明：該菌株10d內(nèi)對(duì)100μg·mL-1硫丹的降解率達(dá)到90％左右：培養(yǎng)溫度、pH條件接菌量及對(duì)JBW4的生長(zhǎng)及其對(duì)硫丹的降解有較大的影響，適宜JBW4生長(zhǎng)及其對(duì)硫丹降解率達(dá)到最大時(shí)的溫度是40℃，pH

5、在6.0～8.0之間，接菌量3‰5％，5d可以達(dá)到90％左右；在最佳溫度和pH條件下，當(dāng)硫丹濃度為100μg·mL-1以下濃度時(shí)幾乎被JBw4全部降解，在硫丹濃度為200μg·mL-1時(shí)仍被降解50％左右；細(xì)菌的生長(zhǎng)量與降解能力具有相關(guān)性。
　　 4、對(duì)硫丹在菌株JBW4作用下的降解代謝產(chǎn)物做了初步的研究。本研究中通過(guò)GC-MS分析，使用PE TurboMass5.1數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)解析，結(jié)果表明該菌株可將硫丹降解形成硫丹二醇、硫丹