東鄉(xiāng)野生稻內(nèi)生、根際細(xì)菌多樣性及具ACC脫氨酶活性菌株篩選.pdf

1、東鄉(xiāng)野生稻作為水稻優(yōu)良種質(zhì)資源，具有抗病蟲害、抗旱、耐寒等諸多優(yōu)良性狀，其組織內(nèi)微生物資源豐富。有研究表明，植物內(nèi)生菌有助于提升宿主植物的抗逆能力，其中一些具有1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸（ACC）脫氨酶活性的內(nèi)生細(xì)菌在促進(jìn)宿主植物的生長及抗鹽脅迫中起重要作用。因此，利用具有ACC脫氨酶活性的植物促生細(xì)菌（PGPB）來減少不利環(huán)境脅迫對作物生產(chǎn)力的有害影響是農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展最為重要的策略。
　　本論文以江西省東鄉(xiāng)野生稻抽穗期樣品為材料，

2、采用高通量測序法開展其內(nèi)生、根際細(xì)菌多樣性分析；以培養(yǎng)法分離獲得的內(nèi)生及根際細(xì)菌為對象，開展其ACC脫氨酶活性及其它促生活性檢測，并開展其提升植物耐鹽性的活性評價。
　　(1)利用高通量測序技術(shù)對東鄉(xiāng)野生稻內(nèi)生、根際的細(xì)菌多樣性進(jìn)行了分析，將細(xì)菌歸屬為藍(lán)細(xì)菌門(Cyanobacteria)、變形菌門(Proteobacteria)、酸桿菌門(Acidobacteria)、綠彎菌門(Chloroflexi)和厚壁菌門(Firmicu

3、tes)5大門和58個屬，其中優(yōu)勢屬為Cyanobacteria norank（53.7%）、Mitochondria norank（3.9%）、不動桿菌屬（Acinetobacter sp.，2.7%）、伯克氏菌屬（Burkholderia sp.，2.1%）、（Anaerolineaceae uncultured，1.4%）和厭氧粘細(xì)菌（Anaeromyxobacter，1.1%）。根際土壤和根中細(xì)菌種群的多樣性豐度最大，而優(yōu)勢種屬

4、在葉和莖中數(shù)量最多。
　　(2)開展產(chǎn)ACC脫氨酶的東鄉(xiāng)野生稻內(nèi)生及根際細(xì)菌菌株篩選。從52株菌中篩選出29株有ACC脫氨酶活性的菌株，并對其進(jìn)行 IAA、鐵載體、溶磷活性檢測。經(jīng)16S rDNA基因序列分析，將所分離菌株歸屬為芽孢桿菌屬（Bacillus,56%）、泛菌屬(Pantoea，12%)、微球菌屬（Micrococcus，4.2%）、不動桿菌屬（Acinetobacter sp.，2.5%)等18個屬。
　　(3

5、)選擇15株不同ACC脫氨酶活性的菌株進(jìn)行鹽脅迫種子萌發(fā)實驗，發(fā)現(xiàn)5株（CR9、CL8、CL13、CL18和CRH27）能不同程度促進(jìn)水稻種子的萌發(fā)、幼苗和幼芽的增長，其中CR9和CRH27促生效果最好，高鹽濃度下上述菌株處理后在種子萌發(fā)率、幼苗和幼芽長度上均比對照組有顯著提高。
　?。?）研究了不同鹽濃度條件下CR9和CRH27對水稻秧苗的解鹽促生作用，經(jīng)菌處理后幼苗生理指標(biāo)檢測結(jié)果顯示，在鹽脅迫條件下與對照組相比，植株體內(nèi)MD