印度谷螟對Cry1AC毒蛋白抗性篩選及抗性機理的初步探討.pdf

1、本論文以重要儲糧害蟲印度谷螟（Plodia interpunctella）為研究對象，研究了Cry1Ac毒蛋白對印度谷螟幼蟲死亡率、幼蟲發(fā)育歷期、化蛹率、羽化率及總發(fā)育歷期等種群特征參數的影響，并就印度谷螟對Cry1Ac毒蛋白進行了抗性篩選。此外，還研究了取食Cry1Ac毒蛋白后印度谷螟體內重要保護酶、解毒酶及中腸蛋白酶活性的變化。論文主要研究結果如下:
　　1.Cry1Ac毒蛋白對印度谷螟生長發(fā)育的影響
　　含Cry1Ac

2、毒蛋白的人工飼料被印度谷螟幼蟲取食24 h后即開始發(fā)揮作用，當Cry1Ac毒蛋白濃度大于1.22μg/g時，其幼蟲死亡率顯著高于對照，達到極顯著水平。72h后，印度谷螟取食Cry1Ac毒蛋白濃度越高，其幼蟲死亡率越大，且各處理間幼蟲死亡率達到了極顯著差異。而當Cry1Ac毒蛋白濃度為0.3μg/g時，對印度谷螟死亡率無顯著影響。與對照相比，取食了含Cry1Ac毒蛋白人工飼料的印度谷螟化蛹率和羽化率均顯著降低，幼蟲發(fā)育歷期和總發(fā)育歷期明顯

3、延長，且隨Cry1Ac毒蛋白濃度升高，差異越顯著。
　　2.印度谷螟對Cry1Ac毒蛋白的抗性品系篩選
　　用含不同濃度Cry1A毒蛋白的人工飼料喂食印度谷螟，選取使其死亡率在40％左右的Cry1Ac毒蛋白濃度，篩選6代后，印度谷螟對Cry1Ac毒蛋白的抗性上升到原來的2.68倍，仍處于低抗水平。印度谷螟各篩選世代的化蛹率和羽化率與對照相比顯著降低，幼蟲發(fā)育歷期和總發(fā)育歷期明顯延長。印度谷螟生長發(fā)育受到明顯抑制，印度谷螟各篩

4、選世代其蛹重明顯低于對照，但各代平均蛹重比較穩(wěn)定，差異不明顯。
　　3.Cry1Ac毒蛋白對印度谷螟主要保護酶的影響
　　用含不同濃度Cry1Ac毒蛋白的人工飼料喂食印度谷螟12天，其體內過氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力均受到明顯抑制，其活力均隨Cry1Ac毒蛋白濃度的升高而降低，但過氧化物酶活力在取食不同濃度Cry1Ac毒蛋白的印度谷螟之間不存在顯著差異。印度谷螟取食含Cry1Ac毒蛋白的人工飼料12h

5、、24h、36h、48 h和72h，過氧化物酶的活力均低于對照，在48 h和72 h達到極顯著差異。超氧化物歧化酶的活力除印度谷螟取食Cry1Ac毒蛋白12h外，其它時間均低于對照，在48h和72h達到極顯著差異。
　　4.Cry1Ac毒蛋白對印度谷螟主要解毒酶的影響
　　用含不同濃度Cry1Ac毒蛋白的人工飼料喂食印度谷螟12天，其體內乙酰膽堿酯酶(ACHE)的活力隨Cry1Ac毒蛋白濃度的升高而升高，堿性磷酸酯酶(ALP

6、)的活力隨濃度升高呈下降趨勢，但均高于對照。印度谷螟取食含Cry1Ac毒蛋白的人工飼料12h、24h、36h、48h和72 h，乙酰膽堿酯酶的活力升高，尤其在24 h其活性顯著高于對照，達到極顯著差異。堿性磷酸酯酶的活力升高，在24h和72h顯著高于對照，達到極顯著差異。
　　5.Cry1Ac毒蛋白對印度谷螟主要中腸蛋白酶的影響
　　用含不同濃度Cry1Ac毒蛋白的人工飼料喂食印度谷螟12天，其體內強堿性類胰蛋白酶和類胰凝乳