春劍和大花蕙蘭種間雜交種子無菌萌發(fā)及雜交后代的RAPD分析.pdf

1、本研究以春劍‘翠仙’(Cymbidium longibracteatum‘cuixian’)、大花蕙蘭‘黃金虎’(C.. Moring Moon‘Great Tiger’)、‘溪流’(C.hybridium Enzan Stream‘Orpheus’)為材料進(jìn)行種間雜交，對雜交種子進(jìn)行非共生萌發(fā)試驗(yàn)，并運(yùn)用RAPD分子標(biāo)記對雜交F1代進(jìn)行分析。本研究的目的是通過蘭屬種間雜交方法培育出新的種質(zhì)，并在分子水平上評價(jià)雜交后代特性，為春劍與大花

2、蕙蘭的雜交育種進(jìn)行基礎(chǔ)性的探索工作。主要研究結(jié)果如下。
　　 1.以春劍為母本，大花蕙蘭為父本均能獲得雜交果實(shí)，其中春劍‘翠仙’×大花蕙蘭‘溪流’結(jié)果率最高，為78.5％；以大花蕙蘭為母本，春劍‘翠仙’為父本，雜交結(jié)果率均為0；春劍為試材進(jìn)行自交易于成功，結(jié)果率為100％。
　　 2.雜交種子無菌萌發(fā)的最適培養(yǎng)基為：MS+NAA0.1mg/L+6-BA0.5mg/L+Tryptone50mg/L+AC1000mg/L;原

3、球莖增殖的最佳培養(yǎng)基為：1/2MS+NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L+KT0.05mg/L，增殖系數(shù)為6.07;直徑大小為0.3cm的原球莖最適宜增殖培養(yǎng)，增殖系數(shù)為6.10;培養(yǎng)基中添加150mg/L酵母浸膏，對原球莖增殖有明顯促進(jìn)作用；原球莖分化芽苗的最佳培養(yǎng)基為：MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L+Tryptone250mg/L+AC1.0g/L，分化率為88.33％；原球莖分化叢生芽的最佳培養(yǎng)基為：M

4、S+NAA0.2mg/L+Tryptone250mg/L+TDZ1.0mg/L，叢生芽增殖系數(shù)最高為5.38;適合根形成與生長的培養(yǎng)基為：MS+AC1.0g/L和MS+NAA0.1mg/L+AC1.0g/L，生根率為100％，平均根長2.4～2.54cm:獲得根數(shù)最多的培養(yǎng)基為：MS+NAA0.1mg/L+AC0.5g/L，平均根數(shù)2.06條/苗；采用混合基質(zhì)(腐殖土：陶粒=5:1混勻)栽植，成活率達(dá)93.02％。
　　 3.用